符号与缩略语 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 鸭坦布苏病毒概述 | 第12-13页 |
1.2 分子生物学特性 | 第13-17页 |
1.2.1 形态结构 | 第13-16页 |
1.2.2 在细胞内的复制 | 第16页 |
1.2.3 培养特性 | 第16-17页 |
1.3 鸭坦布苏病毒的研究进展 | 第17-18页 |
1.4 反向遗传操作系统概述 | 第18-22页 |
1.4.1 RNA 病毒的反向遗传技术 | 第18-19页 |
1.4.2 黄病毒的反向遗传操作系统的研究进展 | 第19-21页 |
1.4.3 黄病毒反向遗传操作系统的应用 | 第21-22页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-38页 |
2.1 材料 | 第23页 |
2.1.1 病毒和细胞 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-38页 |
2.2.1 FX2010 株感染性 DNA 的构建 | 第23-32页 |
2.2.1.1 病毒核酸提取 | 第23-24页 |
2.2.1.2 反转录 | 第24页 |
2.2.1.3 全长序列的分片段引物设计及克隆策略 | 第24-26页 |
2.2.1.4 全长分片段 PCR 扩增 | 第26-27页 |
2.2.1.5 克隆构建 | 第27-31页 |
2.2.1.6 FX2010 株全长 DNA 的获取 | 第31-32页 |
2.2.2 FX2010 株病毒的拯救 | 第32-36页 |
2.2.2.1 体外转录 | 第32-33页 |
2.2.2.2 体外转录产物纯化 | 第33页 |
2.2.2.3 转染 | 第33-34页 |
2.2.2.4 拯救病毒的鉴定 | 第34-36页 |
2.2.3 基因重配病毒的拯救 | 第36-38页 |
2.2.3.1 基因重配病毒基因组构建策略 | 第36-37页 |
2.2.3.2 基因重配病毒全长 DNA 的获得 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-45页 |
3.1 FX2010 株分片段扩增结果 | 第38-39页 |
3.2 FX2010 株融合全长两半端电泳结果 | 第39-40页 |
3.3 FX2010 株全长 DNA 电泳图 | 第40页 |
3.4 FX2010 株病毒拯救结果 | 第40-43页 |
3.4.1 细胞病变 | 第40-41页 |
3.4.2 RT-PCR 鉴定结果 | 第41页 |
3.4.3 间接免疫荧光试验结果 | 第41-42页 |
3.4.4 鸡胚致病性试验结果 | 第42-43页 |
3.4.5 序列比对结果 | 第43页 |
3.5 基因重配病毒的拯救结果 | 第43-45页 |
3.5.1 电泳结果 | 第43-44页 |
3.5.2 细胞病变 | 第44页 |
3.5.3 测序比对结果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 反向遗传操作系统 | 第45-47页 |
4.2 基因重配病毒研究 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-60页 |
致谢 | 第60-62页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第62页 |