| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 縮略词 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-29页 |
| 1.1 琼胶 | 第16-17页 |
| 1.2 琼胶酶 | 第17-28页 |
| 1.2.1 琼胶酶的来源 | 第17-18页 |
| 1.2.2 琼胶酶在糖苷水解酶家族中的分类 | 第18-21页 |
| 1.2.3 琼胶酶活性的检测方法 | 第21-22页 |
| 1.2.4 琼胶酶的应用 | 第22-23页 |
| 1.2.5 琼胶酶的研究进展 | 第23-28页 |
| 1.3 本论文研究的立题依据 | 第28-29页 |
| 第二章 海洋细菌新种—噬琼胶海水菌(Aquimarina agarivorans sp.nov)HQM9~T的鉴定及发酵产酶条件优化 | 第29-41页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 菌株生理生化鉴定 | 第31页 |
| 2.2.2 菌株API快速鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 细菌脂肪酸含量测定 | 第32页 |
| 2.2.4 细菌极性脂分析 | 第32页 |
| 2.2.5 细菌醌型分析 | 第32-33页 |
| 2.2.6 菌株保藏 | 第33页 |
| 2.2.7 菌株HQM9~T产酶发酵条件优化 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第34-39页 |
| 2.3.1 菌株HQM9~T的生理生化特征 | 第34-35页 |
| 2.3.2 菌株HQM9~T的脂肪酸含量 | 第35页 |
| 2.3.3 菌株HQM9~T醌型及极性脂分析 | 第35-36页 |
| 2.3.4 菌株HQM9~T产琼胶酶发酵条件的正交实验结果 | 第36-38页 |
| 2.3.5 优化后菌株HQM9~T琼胶酶的发酵进程曲线测定 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 海洋细菌HQM9~T基因组测序结果分析与胞外琼胶酶谱质谱鉴定 | 第41-54页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.2 实验菌株 | 第41页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 种子液的制备 | 第42页 |
| 3.2.2 菌株HQM9~T粗酶液的制备 | 第42页 |
| 3.2.3 不同时间琼胶酶琼胶酶组分的变化情况 | 第42页 |
| 3.2.4 活性电泳检测粗酶液琼胶酶组分 | 第42-44页 |
| 3.2.5 菌株HQM9~T基因组的提取 | 第44页 |
| 3.2.6 菌株HQM9~T基因组测序和分析 | 第44页 |
| 3.2.7 琼胶酶基因的虚拟酶切与质谱鉴定结果比较 | 第44页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第44-53页 |
| 3.3.1 不同碳源诱导下的菌株HQM9~T的胞外琼胶酶 | 第44-47页 |
| 3.3.2 质谱鉴定结果 | 第47-50页 |
| 3.3.3 菌株HQM9~T基因组测序结果分析 | 第50-51页 |
| 3.3.4 菌株HQM9~T琼胶酶基因的虚拟酶切与质谱鉴定比较 | 第51-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 菌株HQM9~T琼胶酶基因的克隆与表达 | 第54-72页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第54-56页 |
| 4.1.1 培养基 | 第54页 |
| 4.1.2 实验菌株和质粒 | 第54-56页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-61页 |
| 4.2.1 琼胶酶基因的生物信息学分析 | 第56-57页 |
| 4.2.2 琼胶酶基因的克隆 | 第57-61页 |
| 4.2.3 其它基因的pMAL融合表达 | 第61页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第61-70页 |
| 4.3.1 琼胶酶基因的生物信息学分析 | 第61-64页 |
| 4.3.2 琼胶酶基因的扩增 | 第64-65页 |
| 4.3.3 基因和载体的双酶切 | 第65页 |
| 4.3.4 SDS-PAGE检测琼胶酶基因的表达情况 | 第65-66页 |
| 4.3.5 重组酶的活性检测 | 第66-67页 |
| 4.3.6 重组酶Aga16AD的纯化 | 第67页 |
| 4.3.7 重组酶酶学性质研究 | 第67-70页 |
| 4.3.8 其它基因的pMAL融合表达 | 第70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-72页 |
| 总结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第84-85页 |
| 附录 | 第85-89页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第89页 |
