| 符号说明 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 三种禽肿瘤性疾病的研究现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 RE 的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.1.2 MD 的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.3 AL 的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2 禽肿瘤性疾病的诊断方法 | 第15-19页 |
| 1.2.1 禽肿瘤性疾病的传统诊断方法 | 第16页 |
| 1.2.2 禽肿瘤性疾病免疫学检测方法 | 第16-17页 |
| 1.2.3 分子生物学检测方法 | 第17-18页 |
| 1.2.4 其他相关技术 | 第18页 |
| 1.2.5 PCR 技术的发展 | 第18-19页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验所需细胞、病毒、阳性病料、菌种 | 第19-20页 |
| 2.2 实验所需主要试剂 | 第20页 |
| 2.3 实验用主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.4 实验常用试剂的配置 | 第21-22页 |
| 2.5 REV、ALV-J、ALV-A 三种病毒的扩毒、保存与 MDV 阳性病料的准备 | 第22-23页 |
| 2.5.1 REV、ALV-J、ALV-A 三种病毒的扩毒及检测 | 第22-23页 |
| 2.5.2 MDV 阳性病料的准备 | 第23页 |
| 2.6 接毒培养细胞总 RNA 的提取及阳性病料组织总 RNA 提取 | 第23-25页 |
| 2.6.1 接毒培养细胞总 RNA 的提取 | 第23页 |
| 2.6.2 日常送检病例筛选 MDV 阳性病料的 DNA 提取 | 第23-24页 |
| 2.6.3 MDV 阳性病料总 RNA 提取 | 第24-25页 |
| 2.6.4 总 RNA 的逆转录反应 | 第25页 |
| 2.7 禽肿瘤性疾病多重 RT-PCR 方法的建立和优化 | 第25-28页 |
| 2.7.1 禽肿瘤性疾病多重 RT-PCR 引物的选用 | 第25页 |
| 2.7.2 多重 PCR 方法的初建及优化 | 第25-28页 |
| 2.7.3 多重 PCR 方法的敏感性试验 | 第28页 |
| 2.7.4 多重 PCR 方法的特异性试验 | 第28页 |
| 2.7.5 多重 PCR 方法的重复性试验 | 第28页 |
| 2.8 多重 PCR 方法在临床检测上的初步应用 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 接毒细胞禽白血病抗原检测结果 | 第29页 |
| 3.2 多重 RT-PCR 方法的建立和优化 | 第29-38页 |
| 3.2.1 目的条带的确定 | 第30-33页 |
| 3.2.2 多重 RT-PCR 最佳退火温度的确定 | 第33页 |
| 3.2.3 多重 RT-PCR 最佳引物浓度的优化 | 第33-34页 |
| 3.2.4 多重 RT-PCR 循环次数的优化 | 第34-35页 |
| 3.2.5 多重 RT-PCR 方法的敏感性检测 | 第35页 |
| 3.2.6 多重 RT-PCR 特异性检测 | 第35-36页 |
| 3.2.7 多重 RT-PCR 可重复性检测 | 第36-37页 |
| 3.2.8 多重 RT-PCR 体系的最终完成 | 第37-38页 |
| 3.3 多重 RT-PCR 在临床病例检测上的初步应用 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
