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多重PCR方法鉴别诊断禽肿瘤性病毒感染

符号说明第4-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 引言第11-19页
    1.1 三种禽肿瘤性疾病的研究现状第12-15页
        1.1.1 RE 的研究现状第12-13页
        1.1.2 MD 的研究现状第13-14页
        1.1.3 AL 的研究现状第14-15页
    1.2 禽肿瘤性疾病的诊断方法第15-19页
        1.2.1 禽肿瘤性疾病的传统诊断方法第16页
        1.2.2 禽肿瘤性疾病免疫学检测方法第16-17页
        1.2.3 分子生物学检测方法第17-18页
        1.2.4 其他相关技术第18页
        1.2.5 PCR 技术的发展第18-19页
    1.3 本研究的目的和意义第19页
2 材料与方法第19-29页
    2.1 实验所需细胞、病毒、阳性病料、菌种第19-20页
    2.2 实验所需主要试剂第20页
    2.3 实验用主要仪器第20-21页
    2.4 实验常用试剂的配置第21-22页
    2.5 REV、ALV-J、ALV-A 三种病毒的扩毒、保存与 MDV 阳性病料的准备第22-23页
        2.5.1 REV、ALV-J、ALV-A 三种病毒的扩毒及检测第22-23页
        2.5.2 MDV 阳性病料的准备第23页
    2.6 接毒培养细胞总 RNA 的提取及阳性病料组织总 RNA 提取第23-25页
        2.6.1 接毒培养细胞总 RNA 的提取第23页
        2.6.2 日常送检病例筛选 MDV 阳性病料的 DNA 提取第23-24页
        2.6.3 MDV 阳性病料总 RNA 提取第24-25页
        2.6.4 总 RNA 的逆转录反应第25页
    2.7 禽肿瘤性疾病多重 RT-PCR 方法的建立和优化第25-28页
        2.7.1 禽肿瘤性疾病多重 RT-PCR 引物的选用第25页
        2.7.2 多重 PCR 方法的初建及优化第25-28页
        2.7.3 多重 PCR 方法的敏感性试验第28页
        2.7.4 多重 PCR 方法的特异性试验第28页
        2.7.5 多重 PCR 方法的重复性试验第28页
    2.8 多重 PCR 方法在临床检测上的初步应用第28-29页
3 结果与分析第29-39页
    3.1 接毒细胞禽白血病抗原检测结果第29页
    3.2 多重 RT-PCR 方法的建立和优化第29-38页
        3.2.1 目的条带的确定第30-33页
        3.2.2 多重 RT-PCR 最佳退火温度的确定第33页
        3.2.3 多重 RT-PCR 最佳引物浓度的优化第33-34页
        3.2.4 多重 RT-PCR 循环次数的优化第34-35页
        3.2.5 多重 RT-PCR 方法的敏感性检测第35页
        3.2.6 多重 RT-PCR 特异性检测第35-36页
        3.2.7 多重 RT-PCR 可重复性检测第36-37页
        3.2.8 多重 RT-PCR 体系的最终完成第37-38页
    3.3 多重 RT-PCR 在临床病例检测上的初步应用第38-39页
4 讨论第39-42页
结论第42-43页
参考文献第43-50页
研究生期间论文发表情况第50-51页
致谢第51页

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