| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 一、引言 | 第8-13页 |
| 1 脂肪酸去饱和酶简介 | 第8-11页 |
| ·生物膜的组成 | 第8-9页 |
| ·低温和光照对生物膜的影响 | 第9页 |
| ·不饱和脂肪酸与植物耐冷性之间的关系 | 第9-10页 |
| ·植物脂肪酸去饱和酶简介 | 第10-11页 |
| ·植物及藻类中的不脂肪酸去饱和酶的研究现状 | 第11页 |
| 2 水稻脂肪酸去饱和酶的研究及利用 | 第11-13页 |
| 二、材料与方法 | 第13-30页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| ·植物材料 | 第13页 |
| ·细菌载体与主要试剂 | 第13-14页 |
| ·主要的仪器设备 | 第14页 |
| 2 方法 | 第14-30页 |
| ·水稻OSFAD6的克隆 | 第14-18页 |
| ·水稻总RNA的提取 | 第14-15页 |
| ·RNA提取过程中的注意事项 | 第14-15页 |
| ·RNA提取方法 | 第15页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第15-16页 |
| ·RT-PCR扩增水稻OSFAD6基因的开放读框 | 第16页 |
| ·PCR产物的T-A克隆 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第17页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第17页 |
| ·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第17-18页 |
| ·OSFAD6的序列分析及FAD家族成员的表达谱分析 | 第18-21页 |
| ·OSFAD6 DNA序列测定及序列分析 | 第18-19页 |
| ·FAD家族成员的进化分析 | 第19页 |
| ·OSFAD6蛋白的基本参数分析 | 第19-20页 |
| ·RT-PCR研究FAD家族成员基因的表达模式 | 第20-21页 |
| ·利用FAD基因对水稻进行转基因改造 | 第21-30页 |
| ·载体构建 | 第21-23页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第23页 |
| ·农杆菌的转化 | 第23页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第23页 |
| ·农杆菌介导水稻转基因 | 第23-30页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第23-25页 |
| ·侵染和共培养 | 第25-27页 |
| ·农杆菌的去除 | 第27页 |
| ·愈伤组织的筛选 | 第27-28页 |
| ·水稻阳性愈伤组织的分化 | 第28-29页 |
| ·生根 | 第29-30页 |
| 三、结果与分析 | 第30-44页 |
| 1 水稻OSFAD6基因的分离以及FAD各成员与非生物胁迫的关系 | 第30-35页 |
| ·水稻OSFAD6基因的分离和序列分析 | 第30-31页 |
| ·水稻FAD家族成员的系统进化分析 | 第31-33页 |
| ·OSFAD2、OSFAD6、OSFAD3、OSFAD7和OSFAD8 | 第33页 |
| ·OSFAD2、OSFAD3、OSFAD6、OSFAD7对低温的响应研究 | 第33-34页 |
| ·OSFAD2、OSFAD3、OSFAD6和OSFAD7对光照的响应研究 | 第34-35页 |
| 2 脂肪酸去饱和酶(FAD)家族成员对水稻的转基因改造 | 第35-44页 |
| ·载体构建 | 第37-39页 |
| ·AtCor15a-promoter-OsFAD6-pCAMB1A1304构建的详细过程 | 第37-38页 |
| ·OSFAD8-PROMOTER-OSFADs- PCAMBIA1304构建过程 | 第38-39页 |
| ·农杆菌介导的水稻转基因 | 第39-44页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第39-40页 |
| ·侵染共培养 | 第40-41页 |
| ·阳性愈伤组织筛选 | 第41页 |
| ·分化和生根 | 第41-42页 |
| ·练苗及大田移植 | 第42-44页 |
| 四、讨论与展望 | 第44-48页 |
| 1 OSFAD6的克隆及其家族成员的非生物胁迫 | 第44-46页 |
| ·OSFAD6的序列分析 | 第44页 |
| ·FAD家族成员的表达谱 | 第44页 |
| ·FAD家族成员与低温的关系 | 第44-45页 |
| ·FAD家族成员与光照的关系 | 第45-46页 |
| 2 FAD家族成员对水稻的转基因改造 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 发表论文与专利申请列表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
