摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 前言 | 第11-12页 |
1.2 植物抗病应答 | 第12-15页 |
1.2.1 基因对基因假说 | 第12页 |
1.2.2 植物过敏反应 | 第12-13页 |
1.2.3 活性氧与植物抗病 | 第13-14页 |
1.2.4 NO与植物抗病 | 第14-15页 |
1.3 马铃薯晚疫病抗病基因类型 | 第15-16页 |
1.3.1 垂直抗性 | 第15-16页 |
1.3.2 水平抗性 | 第16页 |
1.4 植物非共生血红蛋白 | 第16-18页 |
1.4.1 nsHb1蛋白的结构 | 第16-17页 |
1.4.2 nsHb1的表达 | 第17页 |
1.4.3 nsHb1的器官及组织定位 | 第17页 |
1.4.4 nsHb1与植物抗病性 | 第17-18页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第2章 马铃薯非共生血红蛋白基因StHb1的克隆及表达 | 第19-28页 |
2.1 主要实验材料 | 第19页 |
2.1.1 植物材料与菌种 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 StHb1基因的克隆 | 第19-22页 |
2.2.2 StHb1基因在马铃薯不同组织中的表达 | 第22页 |
2.2.3 P.infestans的侵染对StHb1基因表达的影响 | 第22页 |
2.2.4 外源NO和H_2O_2对StHb1基因表达的影响 | 第22-23页 |
2.2.5 切割损伤对StHb1基因表达的影响 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-26页 |
2.3.1 StHb1基因的分离 | 第23-24页 |
2.3.2 StHb1基因在马铃薯不同组织中的表达 | 第24页 |
2.3.3 P.infestans 的侵染对StHb1基因表达的影响 | 第24-25页 |
2.3.4 外源NO、H2O2对StHb1基因表达的影响 | 第25-26页 |
2.3.5 切割损伤对StHb1基因表达的影响 | 第26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
第3章 StHb1蛋白亚细胞定位研究 | 第28-37页 |
3.1 主要实验材料 | 第28页 |
3.2 实验方法 | 第28-31页 |
3.2.1 引物的设计 | 第28页 |
3.2.2 目的基因扩增 | 第28页 |
3.2.3 融合表达载体的构建 | 第28-30页 |
3.2.4 融合重组质粒的农杆菌转化 | 第30-31页 |
3.2.5 瞬时表达鉴定 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-35页 |
3.3.1 StHb1基因ORF序列片段的扩增 | 第31-32页 |
3.3.2 融合表达载体构建 | 第32-33页 |
3.3.3 重组质粒转化农杆菌 | 第33-34页 |
3.3.4 StHb1基因的瞬时表达 | 第34-35页 |
3.4 讨论 | 第35-37页 |
第4章 StHb1基因的原核表达 | 第37-43页 |
4.1 主要实验材料 | 第37页 |
4.2 实验方法 | 第37-39页 |
4.2.1 引物的设计 | 第37页 |
4.2.2 目的基因的扩增 | 第37页 |
4.2.3 原核表达载体的构建 | 第37页 |
4.2.4 重组质粒的筛选 | 第37-38页 |
4.2.5 重组质粒转化BL21 | 第38-39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-41页 |
4.3.1 目的基因的克隆 | 第39页 |
4.3.2 原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
4.3.3 重组质粒转化BL21 | 第40-41页 |
4.3.4 StHb1蛋白的诱导表达 | 第41页 |
4.4 讨论 | 第41-43页 |
第5章 StHb1基因植物表达载体的构建 | 第43-51页 |
5.1 主要实验材料 | 第43页 |
5.2 实验方法 | 第43-46页 |
5.2.1 引物的设计 | 第43页 |
5.2.2 目的基因的扩增 | 第43-44页 |
5.2.3 植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
5.2.4 重组质粒的农杆菌转化 | 第46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-50页 |
5.3.1 目的基因的扩增 | 第46-47页 |
5.3.2 植物表达载体的构建 | 第47-48页 |
5.3.3 重组质粒的农杆菌转化 | 第48-50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录 | 第59-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第63页 |