摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
前言 | 第11-14页 |
第一部分 TFPI-2在非小细胞肺癌组织中的表达 | 第14-29页 |
1. 材料和方法 | 第14-21页 |
1.1 组织标本 | 第14页 |
1.2 主要实验仪器 | 第14-15页 |
1.3 主要实验试剂 | 第15-16页 |
1.3.1 半定量 RT-PCR 试剂 | 第15页 |
1.3.2 免疫组化试剂 | 第15-16页 |
1.4 常用试剂配制 | 第16-17页 |
1.5 物品处理 | 第17页 |
1.6 实验方法 | 第17-21页 |
1.6.1 半定量 RT-PCR | 第17-20页 |
1.6.2 免疫组化 | 第20-21页 |
1.7 统计学方法 | 第21页 |
2. 结果 | 第21-27页 |
2.1 组织RNA的纯度及完整性检测 | 第21页 |
2.2 TFPI-2基因转录表达结果 | 第21-23页 |
2.3 TFPI-2蛋白表达结果 | 第23页 |
2.4 TFPI-2的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的联系 | 第23-27页 |
3.讨论 | 第27-29页 |
第二部分 非小细胞肺癌组织中TFPI-2基因启动子甲基化检测 | 第29-43页 |
1.材料与方法 | 第29-35页 |
1.1 组织标本 | 第29页 |
1.2 主要实验仪器 | 第29-30页 |
1.3 主要实验试剂 | 第30页 |
1.4 物品处理 | 第30页 |
1.5 实验方法(甲基化特异性 PCR) | 第30-35页 |
1.5.1 实验原理 | 第30页 |
1.5.2 MSP引物设计合成 | 第30-31页 |
1.5.3 实验对照设置 | 第31页 |
1.5.4 DNA的提取 | 第31-33页 |
1.5.5 M.SssI酶处理正常人外周血 DNA | 第33页 |
1.5.6 亚硫酸氢盐修饰 DNA 并纯化 | 第33-34页 |
1.5.7 PCR扩增检测甲基化状态 | 第34-35页 |
1.5.8 MSP结果判定 | 第35页 |
1.5.9 统计学方法 | 第35页 |
2. 结果 | 第35-39页 |
2.1 DNA的纯度及完整性检测 | 第35-36页 |
2.2 MSP检测TFPI-2基因启动子甲基化状态 | 第36-37页 |
2.3 TFPI-2基因启动子甲基化状态与其表达的相关性 | 第37页 |
2.4 TFPI-2基因启动子甲基化与肺癌患者临床病理学特征的关系分析 | 第37-39页 |
3.讨论 | 第39-42页 |
结论与展望 | 第42-43页 |
1.结论 | 第42页 |
2.展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
综述 | 第48-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |