泰乐菌素单克隆抗体的制备及应用
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第12-24页 |
| 1.1 大环内酯类抗生素概述 | 第12页 |
| 1.2 泰乐菌素的介绍 | 第12-19页 |
| 1.2.1 理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2.2 作用特点 | 第13-14页 |
| 1.2.3 作用机理 | 第14页 |
| 1.2.4 不良反应 | 第14页 |
| 1.2.5 耐药性 | 第14-15页 |
| 1.2.6 最高残留限量 | 第15页 |
| 1.2.7 泰乐菌素残留的国内外研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3 ELISA 介绍 | 第19页 |
| 1.3.1 ELISA 原理 | 第19页 |
| 1.3.2 实践中常用的 ELISA 方法 | 第19页 |
| 1.4 小分子抗原合成的基本原理 | 第19-21页 |
| 1.4.1 半抗原的概述 | 第19-20页 |
| 1.4.2 半抗原的要求 | 第20页 |
| 1.4.3 半抗原的选择与设计 | 第20页 |
| 1.4.4 半抗原合成注意事项 | 第20页 |
| 1.4.5 载体的选择 | 第20-21页 |
| 1.4.6 合成方法 | 第21页 |
| 1.4.7 人工抗原的纯化与鉴定 | 第21页 |
| 1.5 单克隆抗体技术的简述 | 第21-23页 |
| 1.5.1 单克隆抗体的概念 | 第21-22页 |
| 1.5.2 单克隆抗体的制备原理 | 第22页 |
| 1.5.3 单克隆抗体与多克隆抗体性质比较 | 第22-23页 |
| 1.6 本课题的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 仪器与设备 | 第24页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第24-25页 |
| 2.1.3 所用溶液的配制 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-37页 |
| 2.2.1 泰乐菌素半抗原的制备 | 第26-28页 |
| 2.2.2 泰乐菌素完全抗原的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.3 抗原的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.4 动物免疫 | 第30页 |
| 2.2.5 间接 ELISA 法检测血清效价 | 第30-31页 |
| 2.2.6 抗原、抗体最佳工作浓度的确定 | 第31页 |
| 2.2.7 特异性检测 | 第31页 |
| 2.2.8 杂交瘤细胞株的建立 | 第31-33页 |
| 2.2.9 杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
| 2.2.10 杂交瘤细胞的亚克隆与冻存 | 第33-34页 |
| 2.2.11 单克隆抗体的制备与纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.12 单克隆抗体的鉴定 | 第35页 |
| 2.2.13 稳定性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.14 交叉反应率检测 | 第36页 |
| 2.2.15 标准曲线的建立 | 第36页 |
| 2.2.16 回收率的测定 | 第36-37页 |
| 3 试验结果与分析 | 第37-45页 |
| 3.1 半抗原鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.1 半抗原 1（STYL）的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.1.2 半抗原 2（PTYL）半抗原的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2 完全抗原的鉴定 | 第39页 |
| 3.3 两种偶联物浓度的测定 | 第39页 |
| 3.4 两种偶联物偶联比的测定 | 第39页 |
| 3.5 血清效价 | 第39-40页 |
| 3.6 抗原、抗体最佳工作浓度 | 第40页 |
| 3.7 血清的特异性 | 第40页 |
| 3.8 杂交瘤细胞株 | 第40-41页 |
| 3.9 单克隆抗体 | 第41-42页 |
| 3.9.1 杂交瘤细胞培养上清效价及特异性 | 第41页 |
| 3.9.2 单克隆抗体的效价 | 第41页 |
| 3.9.3 单抗特异性 | 第41-42页 |
| 3.9.4 杂交瘤细胞株稳定性测定 | 第42页 |
| 3.10 单克隆抗体与其它药物的交叉反应 | 第42-43页 |
| 3.11 标准曲线的建立 | 第43页 |
| 3.12 添加回收率 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 半抗原的设计 | 第45页 |
| 4.2 半抗原、完全抗原的合成 | 第45-46页 |
| 4.3 关于偶联比 | 第46页 |
| 4.4 关于小鼠的选择 | 第46页 |
| 4.5 关于小鼠的血清效价 | 第46-47页 |
| 4.6 关于免疫 | 第47页 |
| 4.7 关于骨髓瘤细胞系的选择 | 第47页 |
| 4.8 关于细胞融合 | 第47页 |
| 4.9 关于杂交瘤细胞的筛选与克隆 | 第47-48页 |
| 4.10 关于交叉反应 | 第48页 |
| 4.11 关于样品检测 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
