摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
CONTENTS | 第6-9页 |
INTRODUCTION | 第9-32页 |
0.1 GLOBAL CANCER STATISTICS | 第14-15页 |
0.2 CONTROVERSIES OVER THE EXISTENCE OF LIPID RAFTS | 第15-16页 |
0.3 The STRUCTURAL ANALYSIS AND COMPOSITION OF LIPID RAFTS, INTEGRIN αVβ3 AND c-SRC | 第16-22页 |
0.3.1 Lipid Rafts | 第16-18页 |
0.3.2 Integrins | 第18-20页 |
0.3.3 The structural composition and activation of c-SRC | 第20-22页 |
0.4THE ROLE OF LIPID RAFTS, c-SRC and INTEGRIN αVβ3 IN REGULATING CANCER CELL MIGRATION | 第22-25页 |
0.4.1 Lipid Rafts Regulate Cell Migration Through Enhancing Signal Transduction | 第22-23页 |
0.4.2 Integrins'Adhesive Structures Form Linkage Between The ECM And Actin Cytoskeleton To Bring About Migration | 第23-24页 |
0.4.3 c-SRC Acts As A Kinase To Regulate Migration | 第24-25页 |
0.5 THE CROSSTALK BETWEEN LIPID RAFTS, c-SRC AND INTEGRIN αVβ3 | 第25-28页 |
0.6 MODELS USE IN THE STUDY OF CELL MIGRATION | 第28-29页 |
0.7 RESEARCH AIMS | 第29-30页 |
0.8 RESEARCH SIGNIFICANCE | 第30-32页 |
MATERIALS | 第32-35页 |
1.1 TUMOR CELL LINE | 第32页 |
1.2 COMPETENT CELLS STRAIN | 第32页 |
1.3 ANTIBODIES | 第32页 |
1.4 REAGENTS | 第32-33页 |
1.5 MAIN INSTRUMENTS | 第33页 |
1.6 MEDIA AND SOLUTION PREPARATIONS | 第33-35页 |
1.6.1 SDS-PAGE, Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis Solution | 第34页 |
1.6.2 Western Blot Buffers | 第34-35页 |
1.6.3 LB (Luria Bertani) Medium Preparation | 第35页 |
1.6.4 Agarose Gel Preparation | 第35页 |
METHODS | 第35-51页 |
2.1 CELL CULTURE | 第35页 |
2.2 c-SRC DOMAINS PLASMID CONSTRUCT | 第35-42页 |
2.2.1 Extracting the plasmid from the filter paper | 第36页 |
2.2.2 Transformation | 第36页 |
2.2.3 Culturing and storing single clones | 第36页 |
2.2.4 Extraction of plasmid from grown cultured medium | 第36-38页 |
2.2.5 Polymerase Chain Reaction(PCR) | 第38-39页 |
2.2.6 PCR Master Mix | 第39页 |
2.2.7 Primers | 第39-40页 |
2.2.8 Running the gel | 第40页 |
2.2.9 Purifying the gel | 第40-41页 |
2.2.10 Restriction cutting | 第41页 |
2.2.11 Ligation | 第41-42页 |
2.3 CELLS TRANSFECTION | 第42页 |
2.4 siRNA INTEGRIN β3 PREPARATION | 第42-45页 |
2.4.1 Making cDNA | 第43-44页 |
2.4.2 PCR Master Mix | 第44页 |
2.4.3 PCR Cycle Reaction Times | 第44页 |
2.4.4 Integrin β3 Primers | 第44页 |
2.4.5 Confocal Immunofluorescence Microscopy | 第44-45页 |
2.5 MTT CELL PROLIFERATION ASSAY | 第45页 |
2.6 WOUND HEALING ASSAY | 第45-46页 |
2.6.1 Calculations | 第46页 |
2.7 TRANSWELL ASSAY | 第46-47页 |
2.8 COIMMUNOPRECIPITATION AND WESTERN BLOT | 第47-48页 |
2.8.1 Western Blot | 第47-48页 |
2.9 CONFOCAL IMMUNOFLUORESCENCE MICROSCOPY FOR COLOCALIZATION EXPERIMENT | 第48页 |
2.10 STATISTICAL ANALYSIS | 第48-51页 |
RESULTS | 第51-62页 |
3.0 LIPID RAFTS AND c-SRC AFFECTS CELL PROLIFERATION | 第51-52页 |
3.1 LIPID RAFT DISRUPTION AND c-SRC INHIBITION INDEPENDENTLY REDUCES A375 CELL MIGRATION | 第52-57页 |
3.2 OVEREXPRESSION OF c-SRC DOES NOT INCREASE A375 CELLS MIGRATION | 第57-58页 |
3.3 DEPLETION OF INTEGRIN β3 CAUSES A DECREASE IN A375 CELL MIGRATION | 第58-60页 |
3.4 LIPID RAFT DISRUPTION DOES NOT AFFECT c-SRC INTERACTION WITH INTEGRIN αVβ3 | 第60-62页 |
DISCUSSION | 第62-65页 |
CONCLUSION | 第65-66页 |
REFERENCES | 第66-73页 |
ACKNOWLEDGEMENT | 第73-74页 |
PUBLISHED PAPERS DURING MASTER DEGREE (2010-2013) | 第74页 |