中文摘要 | 第10-15页 |
英文摘要 | 第15-21页 |
第一部分 检测SRSF1基因在不同肺癌组织类型和细胞中的表达及其对预后相关性的初步探讨 | 第22-49页 |
(一) 前言 | 第22-24页 |
(二) 材料和方法 | 第24-36页 |
1. 材料 | 第24-29页 |
1.1 细胞系 | 第24页 |
1.2 肺癌组织标本 | 第24-25页 |
1.3 组织芯片 | 第25-26页 |
1.4 主要仪器和试剂 | 第26-29页 |
1.5 主要溶液的配置 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-36页 |
2.1 SRSF1相关基因的筛选方法 | 第29页 |
2.2 SRSF1相关基因的功能分类方法 | 第29页 |
2.3 细胞培养、传代、复苏及冻存 | 第29-30页 |
2.4 免疫印迹法 | 第30-31页 |
2.5 逆转录-聚合酶链反应 | 第31-33页 |
2.6 实时定量-聚合酶链反应 | 第33-34页 |
2.7 组织芯片技术 | 第34-35页 |
2.8 统计学分析 | 第35-36页 |
(三) 结果 | 第36-43页 |
1. SRSF1相关基因的分析结果 | 第36-37页 |
1.1 SRSF1相关基因的筛选结果 | 第36页 |
1.2 SRSF1相关基因的蛋白功能分析 | 第36-37页 |
2. 检测SRSF1基因在不同肺癌组织类型和细胞中的表达 | 第37-40页 |
2.1 SRSF1基因在肺癌细胞系中的表达 | 第37-38页 |
2.2 SRSF1蛋白在肺癌组织中的表达 | 第38-39页 |
2.3 SRSF1蛋白在肺癌组织芯片中的表达 | 第39-40页 |
3. SRSF1与肺癌临床病理特征及预后的相关性分析 | 第40-43页 |
3.1 SRSF1与肺癌临床病理特征的相关性 | 第40-42页 |
3.2 SRSF1与肺癌患者预后的相关性 | 第42-43页 |
(四) 讨论 | 第43-45页 |
(五) 结论 | 第45-46页 |
(六) 参考文献 | 第46-49页 |
第二部分 探讨SRSF1基因对肺癌细胞生物学行为的影响及相关机制研究 | 第49-80页 |
(一) 前言 | 第49-50页 |
(二) 材料和方法 | 第50-59页 |
1. 材料 | 第50-53页 |
1.1 细胞系 | 第50页 |
1.2 裸鼠 | 第50页 |
1.3 主要仪器和试剂 | 第50-53页 |
1.4 主要溶液的配置 | 第53页 |
2. 实验方法 | 第53-59页 |
2.1 细胞培养、传代、复苏及冻存 | 第53页 |
2.2 免疫印迹法 | 第53页 |
2.3 逆转录-聚合酶链反应 | 第53页 |
2.4 实时定量-聚合酶链反应 | 第53页 |
2.5 构建质粒 | 第53-54页 |
2.6 细胞转染 | 第54-55页 |
2.7 平板克隆形成实验 | 第55-56页 |
2.8 细胞划痕愈合实验 | 第56页 |
2.9 Transwell体外迁移和侵袭实验 | 第56-57页 |
2.10 细胞凋亡检测实验 | 第57页 |
2.11 细胞周期检测实验 | 第57-58页 |
2.12 裸鼠成瘤实验 | 第58页 |
2.13 统计学分析 | 第58-59页 |
(三) 结果 | 第59-69页 |
1. 过表达SRSF1基因对肺癌细胞生物学行为的影响 | 第59-64页 |
1.1 建立稳定表达SRSF1基因的肺癌细胞株 | 第59页 |
1.2 过表达SRSF1基因促进肺癌细胞的增殖和运动能力 | 第59-60页 |
1.3 过表达SRSF1基因促进肺癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第60-62页 |
1.4 过表达SRSF1基因减少肺癌细胞凋亡 | 第62页 |
1.5 过表达SRSF1基因改变肺癌细胞周期 | 第62-63页 |
1.6 过表达SRSF1基因促进裸鼠肿瘤形成 | 第63-64页 |
2. 沉默SRSF1基因对肺癌细胞生物学功能的影响 | 第64-68页 |
2.1 建立稳定沉默SRSF1基因的肺癌细胞株 | 第65页 |
2.2 沉默SRSF1基因抑制肺癌细胞的增殖和运动能力 | 第65-66页 |
2.3 沉默SRSF1基因抑制肺癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第66-68页 |
3. SRSF1基因与肺癌EMT相关蛋白的关系 | 第68-69页 |
(四) 讨论 | 第69-73页 |
(五) 结论 | 第73-74页 |
(六) 参考文献 | 第74-80页 |
第三部分 研究肺癌细胞中SRSF1基因对抗肿瘤治疗敏感性的影响 | 第80-100页 |
(一) 前言 | 第80-81页 |
(二) 材料和方法 | 第81-85页 |
1. 材料 | 第81-82页 |
1.1 细胞系 | 第81页 |
1.2 主要仪器和试剂 | 第81-82页 |
2. 实验方法 | 第82-85页 |
2.1 顺铂敏感性实验 | 第82-83页 |
2.2 细胞增殖-毒性检测实验 | 第83页 |
2.3 化疗方法 | 第83页 |
2.4 热疗方法 | 第83页 |
2.5 X线照射方法 | 第83-84页 |
2.6 热疗联合化疗方法 | 第84页 |
2.7 热疗联合放疗方法 | 第84页 |
2.8 细胞凋亡检测实验 | 第84页 |
2.9 统计学分析 | 第84-85页 |
(三) 结果 | 第85-91页 |
1. 过表达SRSF1基因对肺癌细胞抗肿瘤治疗敏感性的影响 | 第85-88页 |
1.1 过表达SRSF1基因降低肺癌细胞对DDP的敏感性 | 第85-86页 |
1.2 过表达SRSF1基因对抗肿瘤治疗后的肺癌细胞增殖的影响 | 第86-87页 |
1.3 过表达SRSF1基因对抗肿瘤治疗后的肺癌细胞凋亡的影响 | 第87-88页 |
2. 沉默SRSF1基因对肺癌细胞抗肿瘤治疗敏感性的影响 | 第88-91页 |
2.1 沉默SRSF1基因增加肺癌细胞对DDP的敏感性 | 第88页 |
2.2 沉默SRSF1基因对抗肿瘤治疗后的肺癌细胞增殖的影响 | 第88-89页 |
2.3 沉默SRSF1基因对抗肿瘤治疗后的肺癌细胞凋亡的影响 | 第89-91页 |
(四) 讨论 | 第91-94页 |
(五) 结论 | 第94-95页 |
(六) 参考文献 | 第95-100页 |
综述 | 第100-122页 |
参考文献 | 第109-122页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |