致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-35页 |
1.1 病原物模式分子触发免疫(PTI) | 第17-20页 |
1.1.1 已鉴定的PRR/PAMP模式 | 第17-20页 |
1.1.2 病原物对PTI的干扰 | 第20页 |
1.2 植物R基因介导的抗病机制(ETI) | 第20-28页 |
1.2.1 稻瘟菌中已克隆和鉴定的效应因子 | 第21-22页 |
1.2.2 水稻中已克隆的R基因及其特点 | 第22-24页 |
1.2.3 R基因与无毒基因的互作 | 第24-27页 |
1.2.4 ETI的信号传导受到核孔蛋白的控制 | 第27-28页 |
1.3 核孔复合体及核孔蛋白98的研究进展 | 第28-34页 |
1.3.1 核孔复合体的结构 | 第28页 |
1.3.2 核孔复合体的蛋白组成 | 第28-30页 |
1.3.3 大分子物质在核孔中的转运 | 第30-31页 |
1.3.4 核孔蛋白Nup98的研究进展 | 第31-33页 |
1.3.5 植物中核孔蛋白的功能研究 | 第33-34页 |
1.4 本研究的主要内容、目的和意义 | 第34-35页 |
第二章 稻瘟菌效应因子AvrPiz-t氨基酸残基的功能分析 | 第35-52页 |
2.1 材料与方法 | 第37-43页 |
2.1.1 供试植物 | 第37页 |
2.1.2 供试菌株 | 第37页 |
2.1.3 供试载体 | 第37页 |
2.1.4 试剂和试剂盒 | 第37-38页 |
2.1.5 培养基和试剂配方 | 第38页 |
2.1.6 载体的构建 | 第38-40页 |
2.1.7 水稻的稻瘟菌接种实验 | 第40页 |
2.1.8 细菌转化、培养及质粒提取 | 第40页 |
2.1.9 稻瘟菌转化实验 | 第40-41页 |
2.1.10 AvrPiz-t突变体与APIP蛋白的酵母双杂互作实验 | 第41-42页 |
2.1.11 农杆菌侵染烟草瞬时过表达实验 | 第42-43页 |
2.2 结果与分析 | 第43-50页 |
2.2.1 AvrPiz-t氨基酸残基突变位点的选择 | 第43-44页 |
2.2.2 突变位点表达载体的构建 | 第44-45页 |
2.2.3 AvrPiz-t氨基酸残基突变位点的功能互补分析 | 第45-46页 |
2.2.4 AvrPiz-t氨基酸残基突变体与APIP蛋白互作分析 | 第46-48页 |
2.2.5 AvrPiz-t及氨基酸残基突变体的亚细胞定位 | 第48-50页 |
2.3 讨论 | 第50-52页 |
第三章 AvrPiz-t水稻靶蛋白APIP12功能分析 | 第52-77页 |
3.1 材料与方法 | 第52-60页 |
3.1.1 供试植物 | 第52-53页 |
3.1.2 供试菌株 | 第53页 |
3.1.3 供试载体 | 第53页 |
3.1.4 蛋白序列同源分析和系统进化分析 | 第53页 |
3.1.5 载体构建 | 第53-55页 |
3.1.6 水稻和稻瘟菌的培养以及致病性分析 | 第55页 |
3.1.7 转基因植株的获得 | 第55页 |
3.1.8 水稻基因组DNA提取 | 第55页 |
3.1.9 植物RNA提取,cDNA合成 | 第55-56页 |
3.1.10 反转录、RT-PCR与Real-time PCR | 第56-57页 |
3.1.11 水稻原生质体的瞬时表达实验 | 第57-58页 |
3.1.12 重组蛋白的原核表达和纯化 | 第58-59页 |
3.1.13 GST-Pulldown | 第59页 |
3.1.14 蛋白电泳和Western杂交 | 第59-60页 |
3.2 结果与分析 | 第60-75页 |
3.2.1 APIP12编码一个水稻特有的新型Nup98同源蛋白 | 第60-61页 |
3.2.2 APIP12与AvrPiz-t互作验证 | 第61-63页 |
3.2.3 中花11中敲除APIP12导致水稻稻瘟病抗性下降 | 第63-65页 |
3.2.4 APIP12 RNAi转基因日本晴水稻的稻瘟病抗性下降 | 第65-66页 |
3.2.5 APIP12过表达转基因日本晴水稻稻瘟病抗性无明显变化 | 第66-68页 |
3.2.6 APIP12的异位表达不干扰Piz-t介导的稻瘟病抗性 | 第68-69页 |
3.2.7 APIP12基因在抗病基因表达调控中的作用 | 第69-71页 |
3.2.8 APIP12蛋白的亚细胞定位 | 第71页 |
3.2.9 APIP12蛋白与AvrPiz-t蛋白的共定位 | 第71-73页 |
3.2.10 APIP12蛋白与其它蛋白的互作 | 第73-75页 |
3.3 讨论 | 第75-77页 |
结论与展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-90页 |