摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第13-28页 |
1.1 塔里木马鹿 | 第13-14页 |
1.1.1 分布情况 | 第13页 |
1.1.2 生物学特性 | 第13页 |
1.1.3 种质资源保护 | 第13-14页 |
1.2 塔里木马鹿茸的生长发育 | 第14-17页 |
1.2.1 组织形态结构 | 第14-15页 |
1.2.2 生长发育特点 | 第15-16页 |
1.2.3 鹿茸生长的影响因素 | 第16-17页 |
1.3 鹿茸组织的再生 | 第17-19页 |
1.3.1 间充质干细胞 | 第17页 |
1.3.2 鹿茸间充质干细胞的组织特性 | 第17-18页 |
1.3.3 间充质细胞的生物学功能 | 第18页 |
1.3.4 鹿茸生长的微环境 | 第18-19页 |
1.4 鹿茸生长与再生调控的分子机制研究 | 第19-20页 |
1.5 原癌基因c-myc对鹿茸生长调控的研究 | 第20-24页 |
1.5.1 原癌基因(protooncogene) | 第20-21页 |
1.5.2 c-myc基因 | 第21-22页 |
1.5.3 c-myc与Wnt信号通路 | 第22-24页 |
1.6 间充质干细胞(MSCs)研究技术 | 第24-26页 |
1.6.1 间充质干细胞(MSCs)体外培养及诱导分化技术 | 第24-26页 |
1.6.2 腺病毒转染技术 | 第26页 |
1.7 研究目的和意义 | 第26-27页 |
1.8 总体技术路线 | 第27-28页 |
第二章 塔里木马鹿茸c-myc基因cDNA全长克隆与原核表达 | 第28-42页 |
2.1 试验材料与方法 | 第28-36页 |
2.1.1 试验材料 | 第28页 |
2.1.2 试验试剂与溶液配制 | 第28-29页 |
2.1.3 主要的试验仪器 | 第29-30页 |
2.1.4 马鹿茸总RNA提取 | 第30-31页 |
2.1.5 马鹿茸c-myc基因的cDNA全长克隆 | 第31-34页 |
2.1.6 序列比对分析 | 第34页 |
2.1.7 马鹿茸c-myc基因原核表达 | 第34-36页 |
2.2 结果 | 第36-40页 |
2.2.1 塔里木马鹿茸c-myc基因cDNA全长克隆 | 第36页 |
2.2.2 塔里木马鹿茸c-myc蛋白生物学分析 | 第36-39页 |
2.2.3 c-myc基因原核表达结果与分析 | 第39-40页 |
2.3 讨论 | 第40-42页 |
第三章 c-myc基因在不同生长期马鹿茸组织中的表达 | 第42-53页 |
3.1 材料与方法 | 第42-46页 |
3.1.1 试验材料 | 第42页 |
3.1.2 试剂 | 第42-43页 |
3.1.3 主要的试验仪器 | 第43-44页 |
3.1.4 方法 | 第44-46页 |
3.1.5 数据统计与分析 | 第46页 |
3.2 试验结果 | 第46-50页 |
3.2.1 c-myc在不同生长期鹿茸组织中的表达定量 | 第46-47页 |
3.2.2 c-myc在鹿茸组织中的表达定位 | 第47-50页 |
3.3 讨论 | 第50-52页 |
3.3.1 c-myc在鹿茸组织中的定量表达 | 第50-52页 |
3.4 结论 | 第52-53页 |
第四章 外源TGFβ1诱导马鹿茸MSCs软骨分化过程c-myc基因的表达 | 第53-65页 |
4.1 材料与方法 | 第53-58页 |
4.1.1 试验材料 | 第53-54页 |
4.1.2 主要试验仪器 | 第54页 |
4.1.3 方法 | 第54-57页 |
4.1.4 统计学处理 | 第57-58页 |
4.2 结果 | 第58-63页 |
4.2.1 鹿茸MSCs原代培养结果 | 第58-59页 |
4.2.2 细胞生长曲线 | 第59页 |
4.2.3 诱导软骨分化结果 | 第59-61页 |
4.2.4 细胞RNA提取 | 第61页 |
4.2.5 基因表达定量检测 | 第61-63页 |
4.3 讨论 | 第63-64页 |
4.4 结论 | 第64-65页 |
第五章 c-myc基因上游Wnt信号通路抑制对马鹿茸MSCs软骨分化的影响 | 第65-83页 |
5.1 材料和方法 | 第65-72页 |
5.1.1 试验材料 | 第65页 |
5.1.2 试验试剂与溶液配制 | 第65-67页 |
5.1.3 主要仪器 | 第67页 |
5.1.4 方法 | 第67-71页 |
5.1.5 统计学处理 | 第71-72页 |
5.2 结果与分析 | 第72-80页 |
5.2.1 马鹿DKK1基因ORF区序列克隆 | 第72-73页 |
5.2.2 重组DKK1过表达腺病毒包装及收毒 | 第73-74页 |
5.2.3 重组DKK1过表达腺病毒转染复数(MOI)梯度实验 | 第74页 |
5.2.4 Ad-DKK1腺病毒转染结果 | 第74-75页 |
5.2.5 Ad-DKK1腺病毒转染对鹿茸MSCs活力影响 | 第75-76页 |
5.2.6 Ad-DKK1腺病毒转染后鹿茸MSCs增殖过程基因的表达变化 | 第76页 |
5.2.7 Ad-DKK1腺病毒转染鹿茸MSCs对其软骨分化的影响 | 第76-79页 |
5.2.8 Ad-DKK1腺病毒转染鹿茸MSCs的软骨分化过程c-myc基因表达变化 | 第79-80页 |
5.3 讨论 | 第80-83页 |
5.3.1 DKK1过表达对鹿茸MSCs增殖的影响 | 第80页 |
5.3.2 DKK1过表达对鹿茸MSCs软骨分化的影响 | 第80-81页 |
5.3.3 c-myc的"fail-safe"机制 | 第81-83页 |
第六章 结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
个人简历 | 第96页 |