| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1.1 前言 | 第14页 |
| 1.2 奶牛酮病概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 酮病的症状和分类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 酮病的流行现状及危害 | 第15-16页 |
| 1.2.3 酮病的发病机制和病因 | 第16-18页 |
| 1.2.4 酮病的治疗和预防 | 第18页 |
| 1.3 胰岛素 | 第18-22页 |
| 1.3.1 胰岛素信号转导 | 第18-19页 |
| 1.3.2 胰岛素抵抗 | 第19-20页 |
| 1.3.3 非酯化脂肪酸与胰岛素抵抗 | 第20-21页 |
| 1.3.4 奶牛酮病与胰岛抵抗 | 第21-22页 |
| 1.4 荧光定量PCR研究进展 | 第22-25页 |
| 1.4.1 荧光定量PCR方法 | 第22-23页 |
| 1.4.2 荧光定量PCR的应用 | 第23-25页 |
| 第二章 奶牛分娩前后胰岛素敏感性指数动态变化 | 第25-38页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第25-26页 |
| 2.2.2 样本处理 | 第26页 |
| 2.2.3 血液生化指标检测方法 | 第26-27页 |
| 2.2.4 主要仪器与试剂 | 第27页 |
| 2.2.5 数据统计分析 | 第27-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-35页 |
| 2.3.1 酮体结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 非酯化脂肪酸结果 | 第29-30页 |
| 2.3.3 血糖结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 胰岛素结果 | 第31-33页 |
| 2.3.5 胰岛素敏感性指数结果 | 第33-34页 |
| 2.3.6 相关性分析结果 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 2.4.1 酮病奶牛能量代谢变化 | 第35-36页 |
| 2.4.2 胰岛素与奶牛酮病 | 第36页 |
| 2.4.3 胰岛素敏感性与酮病的关系 | 第36-38页 |
| 第三章 BHBA、NEFA对肝脏和脂肪组织胰岛素信号的影响 | 第38-58页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 材料和方法 | 第38-42页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第39页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第39-41页 |
| 3.2.4 试剂配制 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-48页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第42-43页 |
| 3.3.2 cDNA的合成 | 第43页 |
| 3.3.3 引物的设计与合成 | 第43-44页 |
| 3.3.4 引物特异性验证 | 第44-45页 |
| 3.3.5 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第45-46页 |
| 3.3.6 敏感性与重复性实验 | 第46-47页 |
| 3.3.7 组织分离与培养 | 第47页 |
| 3.3.8 组织样本荧光定量PCR检测 | 第47页 |
| 3.3.9 荧光定量PCR相对定量方法 | 第47页 |
| 3.3.10 数据统计与分析 | 第47-48页 |
| 3.4 结果与分析 | 第48-56页 |
| 3.4.1 总RNA纯度及完整性验证 | 第48页 |
| 3.4.2 引物特异性验证 | 第48-49页 |
| 3.4.3 阳性克隆质粒测序结果 | 第49页 |
| 3.4.4 荧光定量PCR动力学曲线 | 第49-50页 |
| 3.4.5 荧光定量标准曲线 | 第50-52页 |
| 3.4.6 荧光定量PCR融解曲线 | 第52-53页 |
| 3.4.7 敏感性与重复性结果 | 第53页 |
| 3.4.8 BHBA处理结果 | 第53-54页 |
| 3.4.9 NEFA处理结果 | 第54-56页 |
| 3.5 讨论 | 第56-58页 |
| 3.5.1 BHBA对胰岛素信号相关基因表达量的影响 | 第56-57页 |
| 3.5.2 NEFA对胰岛素信号相关基因表达量的影响 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文的情况 | 第65页 |
