| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 引言 | 第11-16页 |
| 第一章 PAR1在热打击致血管内皮细胞炎症激活中的作用的研究 | 第16-42页 |
| 1.1 材料 | 第16-19页 |
| 1.1.1 实验材料与主要试剂 | 第16-18页 |
| 1.1.2 主要溶液配置 | 第18-19页 |
| 1.1.3 主要实验仪器及设备 | 第19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 1.2.1 HUVECs的培养 | 第19-20页 |
| 1.2.2 THP1细胞的培养 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Western blot | 第21-22页 |
| 1.2.4 提取总RNA和RT-PCR | 第22-24页 |
| 1.2.5 PAR1siRNA干扰 | 第24页 |
| 1.2.6 腺病毒转染 | 第24-25页 |
| 1.2.7 ELISA检测细胞上清炎症及粘附因子 | 第25-26页 |
| 1.2.8 单核细胞粘附 | 第26页 |
| 1.2.9 统计学处理 | 第26页 |
| 1.3 实验方法设计 | 第26-28页 |
| 1.3.1 热打击HUVECs后TNF-α、IL-6、ICAM-1的表达 | 第26-27页 |
| 1.3.2 观察单核细胞对热打击HUVECs后的粘附 | 第27页 |
| 1.3.3 热打击不同时间对HUVECs PAR1蛋白及mRNA表达水平 | 第27页 |
| 1.3.5 PAR1抑制剂、激动剂、siRNA及过表达对热打击后三种炎症因子表达的影响 | 第27-28页 |
| 1.3.6 观察PAR1抑制剂、激动剂、siRNA及腺病毒对热打击后白细胞粘附的影响 | 第28页 |
| 1.4 实验结果 | 第28-38页 |
| 1.4.1 热打击使HUVECs TNF-α、IL-6、ICAM-1表达增加 | 第28-30页 |
| 1.4.2 热打击使单核细胞对HUVECs粘附增加 | 第30-31页 |
| 1.4.3 热打击HUVECs使PAR1 mRNA及蛋白表达增加 | 第31-32页 |
| 1.4.4 PAR1 siRNA能有效降低热打击后PAR1的表达/AdPAR1有效增加热打击后PAR1的表达 | 第32页 |
| 1.4.5 抑制或敲除PAR1减轻热打击后细胞因子TNF-α/IL-6和粘附因子ICAM-1 mRNA的表达；激活或过表达则可增加上述基因 | 第32-35页 |
| 1.4.6 抑制PAR1可减少单核细胞对HUVECs的粘附,而激活PAR1则增强这种粘附 | 第35-38页 |
| 1.5 讨论 | 第38-42页 |
| 第二章 PAR1在重症中暑小鼠全身炎症反应中的作用 | 第42-49页 |
| 2.1 材料 | 第42-43页 |
| 2.1.1 实验材料与主要试剂 | 第42页 |
| 2.1.2 主要溶液配置 | 第42页 |
| 2.1.3 主要实验仪器及设备 | 第42-43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 2.2.1 预处理小鼠 | 第43页 |
| 2.2.2 热打击小鼠 | 第43页 |
| 2.2.3 心脏取血 | 第43页 |
| 2.2.4 ELISA检测血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1炎症因子的水平 | 第43页 |
| 2.2.5 免疫组化观察心、肝、肺、肠PAR1的表达及H & E染色观察心、肝、肺、肠的损伤 | 第43-44页 |
| 2.2.6 各处理组小鼠存活率统计 | 第44页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第44页 |
| 2.3 实验设计 | 第44-45页 |
| 2.3.1 观察正常及重症中暑小鼠心、肝、肺、小肠PAR1的表达 | 第44页 |
| 2.3.2 检测正常对照及重症中暑小鼠血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1的表达水平 | 第44页 |
| 2.3.3 检测PAR1抑制剂及激动剂对重症中暑小鼠血清中TNF-a、IL-6、ICAM-1的水平的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.4 观察PAR1抑制剂及激动剂对重症中暑小鼠脏器损伤的影响 | 第45页 |
| 2.3.5 观察PAR1抑制剂及激动剂对重症中暑小鼠生存率的影响 | 第45页 |
| 2.4 实验结果 | 第45-47页 |
| 2.4.1 PAR1蛋白在重症中暑小鼠心、肝、肺和小肠表达增加 | 第45页 |
| 2.4.2 抑制PAR1可降低重症中暑小鼠血清TNF-α、IL-6和ICAM-1水平,而激活PAR1则增加上述蛋白水平 | 第45-46页 |
| 2.4.3 抑制PAR1可减轻重症中暑心、肝、肺、小肠损伤,而激活PAR1则加重上述脏器损伤 | 第46-47页 |
| 2.4.4 抑制PAR1可提高重症中暑小鼠72h存活率,而激活PAR1则降低72h存活率 | 第47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-49页 |
| 结语 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 在校期间发表文章 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 统计学审核证明 | 第57页 |
