| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 第一部分： 新型脂质体-siRNA体系的构建及评价 | 第17-33页 |
| 一. 材料与方法 | 第18-23页 |
| 1. 材料 | 第18-21页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·细胞株 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-20页 |
| ·主要试剂配方 | 第20-21页 |
| 2. 方法 | 第21-23页 |
| ·阳离子脂质体的制备及理化性质的分析 | 第21页 |
| ·透射电镜观察脂质体形态 | 第21页 |
| ·细胞转染实验 | 第21-22页 |
| ·荧光显微镜观察脂质体包裹siRNA入胞情况 | 第22页 |
| ·RT-PCR考察复合物靶mRNA的沉默效应 | 第22页 |
| ·肿瘤细胞生长抑制率测定 | 第22-23页 |
| 二. 结果与分析 | 第23-30页 |
| 1. 阳离子脂质体制备及条件优化 | 第23-25页 |
| 2. 新型脂质体siRNA复合物形态学考察 | 第25-26页 |
| 3. 基因沉默效应 | 第26-27页 |
| 4. 荧光显微镜观察siRNA入胞效果 | 第27-28页 |
| 5. 细胞毒性评定 | 第28-30页 |
| 三. 讨论 | 第30-32页 |
| 四. 小结 | 第32-33页 |
| 第二部分： 寡核苷酸适配子介导的脂质体-siRNA递送系统的构建及评价 | 第33-61页 |
| 一、材料与方法 | 第35-43页 |
| 1. 材料 | 第35-37页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·DNA模板 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36-37页 |
| ·主要试剂配方 | 第37页 |
| 2. 方法 | 第37-43页 |
| ·RNA适配子转录 | 第37-39页 |
| ·转录后RNA适配子化学修饰及纯化 | 第39-40页 |
| ·PEG化适配子的回收 | 第40页 |
| ·后插入法制备适配子-脂质体-siRNA复合物 | 第40页 |
| ·透射电镜观察适配子-脂质体-siRNA复合物形态 | 第40-41页 |
| ·细胞转染实验 | 第41页 |
| ·加入DHT培养后细胞转染实验 | 第41页 |
| ·荧光显微镜观察递送系统包裹siRNA入胞情况 | 第41页 |
| ·RT-PCR考察递送系统靶mRNA的沉默效应 | 第41-42页 |
| ·适配子-脂质体-siRNA递送系统细胞亲和性测定 | 第42页 |
| ·肿瘤细胞生长抑制率测定 | 第42-43页 |
| 二、结果与分析 | 第43-56页 |
| 1. RNA适配子不同转录方法的比较 | 第43-44页 |
| 2. 转录后A10适配子PEG化修饰 | 第44页 |
| 3. 不同纯化方法对PEG-A10回收率的影响 | 第44-45页 |
| 4. 流式细胞术测定A10适配子的亲和性 | 第45-47页 |
| 5. 适配子-脂质体-siRNA复合物制备及条件优化 | 第47-48页 |
| 6. 适配子-脂质体-siRNA复合物的形态学考察 | 第48页 |
| 7. 基因沉默效应 | 第48-52页 |
| 8. 荧光显微镜观察siRNA入胞效果 | 第52-53页 |
| 9. 适配子-脂质体-siRNA复合物细胞特异性亲和性测定 | 第53-54页 |
| 10 细胞毒性评定 | 第54-56页 |
| 三. 讨论 | 第56-59页 |
| 四. 小结 | 第59-61页 |
| 全文总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 综述 适配子介导SiRNA靶向递送系统的研究进展' | 第69-85页 |
| References | 第81-85页 |
| 附录 中英文缩略词表 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第89页 |
