英文缩略词 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第12-14页 |
材料与方法 | 第14-37页 |
1 主要材料 | 第14-22页 |
1.1 组织标本 | 第14页 |
1.2 细胞株来源 | 第14页 |
1.3 质粒来源 | 第14页 |
1.4 主要仪器和设备 | 第14-16页 |
1.5 主要试剂 | 第16-18页 |
1.6 主要试剂的配制 | 第18-21页 |
1.7 PCR引物 | 第21-22页 |
2 试验方法 | 第22-37页 |
2.1 组织标本采集 | 第22页 |
2.2 细胞培养 | 第22-23页 |
2.3 慢病毒包装 | 第23-24页 |
2.4 慢病毒感染细胞 | 第24-25页 |
2.5 siRNA转染胃癌细胞 | 第25-26页 |
2.6 总RNA提取及mRNA逆转成cDNA | 第26-29页 |
2.7 实时荧光定量PCR(染料法) | 第29-30页 |
2.8 Western blot实验 | 第30-33页 |
2.9 免疫组化检测 | 第33-34页 |
2.10 平板克隆形成实验 | 第34-35页 |
2.11 MTT实验检测细胞活性 | 第35页 |
2.12 流式细胞术检测细胞周期 | 第35-36页 |
2.13 裸鼠体内成瘤实验 | 第36页 |
2.14 统计学方法 | 第36-37页 |
结果 | 第37-44页 |
1 胃癌组织中LIF的表达 | 第37-39页 |
1.1 免疫组织化学结果 | 第37-39页 |
1.2 Western blot检测胃癌组织中LIF蛋白的表达 | 第39页 |
2 Western blot检测不同胃细胞株中LIF的表达情况 | 第39页 |
3 过表达LIF对胃癌细胞肿瘤特性的影响 | 第39-42页 |
3.1 过表达LIF稳转细胞株的建立和鉴定 | 第39-40页 |
3.2 MTT法检测过表达LIF对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第40页 |
3.3 平板克隆形成实验法检测过表达LIF对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第40-41页 |
3.4 流式细胞术检测过表达LIF对胃癌细胞周期的影响 | 第41页 |
3.5 稳转株裸鼠成瘤实验 | 第41-42页 |
4 正常胃黏膜上皮细胞株敲低LIF后对生物学特性的影响 | 第42-43页 |
4.1 敲低细胞株的建立及鉴定 | 第42页 |
4.2 MTT法检测敲低LIF对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第42-43页 |
4.3 平板克隆形成实验法检测敲低LIF对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第43页 |
5 LIF对细胞周期调控蛋白的影响 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
综述 LIF的研究进展及现状 | 第52-61页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |