| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第17-38页 |
| 1.1 心血管疾病的介入治疗与再狭窄概述 | 第17-21页 |
| 1.1.1 心血管疾病与介入治疗 | 第17-19页 |
| 1.1.2 再狭窄发生的病理 | 第19-20页 |
| 1.1.3 药物洗脱支架及其面临的问题 | 第20-21页 |
| 1.2 植入材料表面原位内皮化 | 第21-28页 |
| 1.2.1 血管的组织结构与内皮细胞的重要性 | 第21-22页 |
| 1.2.2 构建促进内皮细胞生长的表面的研究 | 第22-25页 |
| 1.2.3 提升内皮细胞相对于平滑肌细胞的竞争性 | 第25-26页 |
| 1.2.4 维持内皮层的内皮功能 | 第26-28页 |
| 1.3 细胞外基质的物理因素—硬度 | 第28-31页 |
| 1.3.1 硬度对于内皮细胞生长的影响 | 第29页 |
| 1.3.2 硬度对于内皮功能的影响 | 第29-31页 |
| 1.4 层状组装多层膜及其在生物医疗领域的应用 | 第31-35页 |
| 1.4.1 层状组装的概述 | 第31-32页 |
| 1.4.2 层状组装多层膜负载生物活性分子的研究 | 第32-33页 |
| 1.4.3 层状组装多层膜硬度调控细胞行为的研究 | 第33-35页 |
| 1.5 课题提出与设计思路 | 第35-38页 |
| 1.5.1 课题提出 | 第35-36页 |
| 1.5.2 具体设计思路 | 第36-38页 |
| 第二章 功能基因多层膜提升内皮细胞相对于平滑肌细胞的竞争性 | 第38-56页 |
| 2.1 引言 | 第38-39页 |
| 2.2 实验部分 | 第39-43页 |
| 2.2.1 原料与试剂 | 第39页 |
| 2.2.2 (PrS/DNA)多层膜的构建 | 第39-40页 |
| 2.2.3 (PrS/DNA)多层膜的表征 | 第40页 |
| 2.2.4 细胞的培养 | 第40-41页 |
| 2.2.5 EC和SMC的转染实验 | 第41页 |
| 2.2.6 EC和SMC的增殖实验 | 第41页 |
| 2.2.7 EC和SMC的共培养实验 | 第41-42页 |
| 2.2.8 功能基因多层膜心血管支架的构建 | 第42页 |
| 2.2.9 功能基因多层膜修饰后支架的动物体内实验 | 第42-43页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第43-55页 |
| 2.3.1 多层膜的构建与表征 | 第43-45页 |
| 2.3.1.1 QCM-D跟踪多层膜的组装 | 第43页 |
| 2.3.1.2 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的厚度 | 第43页 |
| 2.3.1.3 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的稳定性 | 第43-44页 |
| 2.3.1.4 (PrS/HGF-pDNA)_n多层膜的表面形貌 | 第44-45页 |
| 2.3.2 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜对EC和SMC的转染 | 第45-46页 |
| 2.3.3 EC和SMC的增殖 | 第46-48页 |
| 2.3.4 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜对EC和SMC竞争性的影响 | 第48-51页 |
| 2.3.5 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜修饰心血管支架及其体内的评价 | 第51-55页 |
| 2.3.5.1 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜修饰后支架的表面形貌 | 第51-52页 |
| 2.3.5.2 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜支架表面内皮化的评价 | 第52-53页 |
| 2.3.5.3 (PrS/HGF-pDNA)_(12)多层膜支架抗再狭窄效果的评价 | 第53-55页 |
| 2.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第三章 软硬材料复合策略实现内皮细胞的选择性粘附 | 第56-73页 |
| 3.1 引言 | 第56-57页 |
| 3.2 实验部分 | 第57-59页 |
| 3.2.1 原料与试剂 | 第57页 |
| 3.2.2 下层基底的准备 | 第57-58页 |
| 3.2.3 (PrS/DNA)_n多层膜的制备 | 第58页 |
| 3.2.4 (PrS/DNA)_n多层膜的表征 | 第58页 |
| 3.2.5 细胞的培养 | 第58-59页 |
| 3.2.6 EC和SMC的粘附实验 | 第59页 |
| 3.2.7 EC和SMC的共培养实验 | 第59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-72页 |
| 3.3.1 (PrS/DNA)_n多层膜的构建与表征 | 第59-61页 |
| 3.3.2 EC和SMC的粘附 | 第61-64页 |
| 3.3.3 EC/SMC的选择性粘附 | 第64-65页 |
| 3.3.4 (PAH/PSS)_n多层膜表面的EC选择性粘附 | 第65-66页 |
| 3.3.5 PET与SS代替玻璃基底实现EC的选择性粘附 | 第66-67页 |
| 3.3.6 调控细胞粘附的因素 | 第67-70页 |
| 3.3.7 不同硬度下层基底构建(PrS/DNA)_n多层膜实现EC的选择性粘附 | 第70-72页 |
| 3.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第四章 生长因子协同基底硬度对内皮细胞的生长和内皮功能的影响 | 第73-90页 |
| 4.1 引言 | 第73页 |
| 4.2 实验部分 | 第73-77页 |
| 4.2.1 原料与试剂 | 第73-74页 |
| 4.2.2 多层膜的组装和交联 | 第74页 |
| 4.2.3 细胞的培养 | 第74页 |
| 4.2.4 EC的粘附实验 | 第74-75页 |
| 4.2.5 EC的迁移实验 | 第75页 |
| 4.2.6 EC的增殖实验 | 第75页 |
| 4.2.7 免疫蛋白印迹分析 | 第75-76页 |
| 4.2.8 内皮层的表征 | 第76-77页 |
| 4.2.8.1 内皮层形貌的表征 | 第76页 |
| 4.2.8.2 内皮层致密性的表征 | 第76页 |
| 4.2.8.3 eNOS基因表达的检测 | 第76-77页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第77-89页 |
| 4.3.1 EC的粘附 | 第77-81页 |
| 4.3.2 EC的迁移 | 第81-83页 |
| 4.3.3 EC的增殖 | 第83-84页 |
| 4.3.4 EC的HGF受体表达 | 第84-85页 |
| 4.3.5 内皮层的评价 | 第85-89页 |
| 4.3.5.1 内皮层的形貌 | 第85-86页 |
| 4.3.5.2 内皮层的致密性 | 第86-87页 |
| 4.2.5.3 eNOS的基因表达 | 第87-89页 |
| 4.4 本章小结 | 第89-90页 |
| 第五章 柔性多层膜负载VEGF提升内皮细胞的竞争性与内皮功能 | 第90-113页 |
| 5.1 引言 | 第90-91页 |
| 5.2 实验部分 | 第91-96页 |
| 5.2.1 原料与试剂 | 第91页 |
| 5.2.2 多层膜的组装与交联 | 第91-92页 |
| 5.2.3 VEGF的负载 | 第92页 |
| 5.2.4 细胞的培养 | 第92页 |
| 5.2.5 EC与SMC的粘附实验 | 第92-93页 |
| 5.2.6 EC/SMC的共培养实验 | 第93页 |
| 5.2.7 EC与SMC的增殖实验 | 第93页 |
| 5.2.8 内皮层的表征 | 第93-96页 |
| 5.2.8.1 内皮层的形貌及致密性的表征 | 第94页 |
| 5.2.8.2 一氧化氮(NO)的检测 | 第94页 |
| 5.2.8.3 内皮功能相关的基因检测 | 第94-96页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第96-112页 |
| 5.3.1 VEGF的负载 | 第96-97页 |
| 5.3.2 EC的粘附 | 第97-99页 |
| 5.3.3 SMC的粘附 | 第99-101页 |
| 5.3.4 EC与SMC的VEGF受体对粘附的影响 | 第101-103页 |
| 5.3.5 EC/SMC的选择性粘附 | 第103-104页 |
| 5.3.6 EC与SMC的增殖 | 第104-106页 |
| 5.3.7 内皮层的形貌及其致密性 | 第106-109页 |
| 5.3.8 内皮层NO的分泌 | 第109页 |
| 5.3.9 内皮功能相关基因的表达 | 第109-112页 |
| 5.4 本章小结 | 第112-113页 |
| 第六章 全文主要结论、创新和展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-134页 |
| 附录Ⅰ 人类脐静脉内皮细胞的提取和培养 | 第134-135页 |
| 附录Ⅱ 人类脐动脉平滑肌细胞的提取和培养 | 第135-136页 |
| 附录Ⅲ 细胞免疫荧光染色 | 第136-137页 |
| 附录Ⅳ 免疫蛋白印迹(Western Blotting) | 第137-140页 |
| 附录Ⅴ qRT-PCR实验步骤 | 第140-151页 |
| 作者简介 | 第151-154页 |
