| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-24页 |
| 研究现状、成果 | 第12-22页 |
| 研究目的、方法 | 第22-24页 |
| 对象和方法 | 第24-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-31页 |
| 1.1.1 细胞株及菌株 | 第24页 |
| 1.1.2 质粒载体 | 第24页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.4 主要溶液、缓冲液与培养基 | 第25-30页 |
| 1.1.5 仪器设备 | 第30-31页 |
| 1.2 实验方法 | 第31-38页 |
| 1.2.1 针对SND1基因序列的sgRNA设计 | 第31页 |
| 1.2.2 重组真核表达质粒PX462-sgRNA的构建 | 第31-34页 |
| 1.2.3 重组真核表达质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| 1.2.4 HeLa细胞培养及转染 | 第34-35页 |
| 1.2.5 HeLa细胞SND1基因敲除稳定株的单克隆筛选 | 第35页 |
| 1.2.6 HeLa细胞SND1基因敲除稳定株Western Blot检测 | 第35-36页 |
| 1.2.7 免疫荧光技术检测HeLa细胞中的SND1 | 第36-37页 |
| 1.2.8 CCK-8 法检测 5-Fu对敲除SND1基因的HeLa细胞增殖的影响 | 第37页 |
| 1.2.9 流式细胞术检测敲除SND1基因的HeLa细胞的周期分布 | 第37-38页 |
| 结果 | 第38-44页 |
| 2.1 sgRNA靶点的选择及寡核酸链的设计 | 第38-39页 |
| 2.2 重组真核表达质粒PX462-sgRNA的酶切结果 | 第39-40页 |
| 2.3 重组真核表达质粒PX462-sgRNA的测序结果 | 第40页 |
| 2.4 Western Blot检测HeLa细胞SND1基因敲除稳定株SND1蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 2.5 利用免疫荧光法鉴定SND1完全敲除的HELA细胞 | 第41-42页 |
| 2.6 CCK-8 法检测 5-FU对敲除SND1基因的HELA细胞增殖的影响 | 第42页 |
| 2.7 敲除SND1基因对HELA细胞周期的影响 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第59-60页 |
| 综述 CRISPR-CAS9在肿瘤生物学中的应用 | 第60-73页 |
| 综述参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 个人简历 | 第75页 |
