| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 认识藻胆蛋白 | 第12页 |
| 1.2 藻胆蛋白的结构功能及光谱学特征 | 第12-15页 |
| 1.2.1 藻胆蛋白结构及功能 | 第12-14页 |
| 1.2.2 藻胆蛋白光谱特征 | 第14-15页 |
| 1.3 藻胆蛋白的应用及研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 作为天然色素及添加剂 | 第15页 |
| 1.3.2 抗氧化和抗肿瘤作用 | 第15-16页 |
| 1.3.3 藻胆蛋白作为光敏剂的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 链霉亲和素结构与功能以及在免疫检测中的应用 | 第17-19页 |
| 1.4.1 链霉亲和素结构与功能介绍 | 第17-18页 |
| 1.4.2 链霉亲和素在免疫检测中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 荧光标记免疫测定技术 | 第19-20页 |
| 1.6 藻胆蛋白荧光标记及检测中的应用 | 第20-22页 |
| 1.7 本课题主要研究内容及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 两种藻胆蛋白/链霉亲和素-荧光探针的构建 | 第24-37页 |
| 2.1 实验试剂材料及仪器 | 第24-27页 |
| 2.1.1 基因模板及引物设计 | 第24-25页 |
| 2.1.2 DNA限制性内切酶及试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第25-27页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第27页 |
| 2.2 SA-PCA-PCB表达载体构建方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 重组质粒构建构建方案 | 第27-28页 |
| 2.2.2 质粒提取及基因克隆 | 第28页 |
| 2.2.3 重叠PCR及T载体连接 | 第28-30页 |
| 2.2.4 sa-cpcA基因的亚克隆 | 第30-31页 |
| 2.2.5 阳性克隆的筛选及验证 | 第31页 |
| 2.3 SA-PCA-PEB表达载体构建的方法 | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果讨论 | 第32-36页 |
| 2.4.1 SA-PCA-PCB表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.4.2 SA-PCA-PEB表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 重组荧光蛋白的表达纯化及稳定性研究 | 第37-64页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第37-40页 |
| 3.1.1 主要酶类 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第37-40页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-46页 |
| 3.2.1 重组蛋白表达条件的优化 | 第40-42页 |
| 3.2.2 重组蛋白的分离纯化 | 第42-43页 |
| 3.2.3 重组蛋白的性质表征 | 第43-45页 |
| 3.2.4 重组蛋白稳定性研究 | 第45-46页 |
| 3.3 实验结果及讨论 | 第46-63页 |
| 3.3.1 重组蛋白表达条件的优化 | 第46-51页 |
| 3.3.2 SA-PCA-PCB的分离纯化及表征 | 第51-55页 |
| 3.3.3 SA-PCA-PEB的分离纯化及表征 | 第55-59页 |
| 3.3.4 重组蛋白稳定性研究 | 第59-63页 |
| 3.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 藻胆蛋白/链霉亲和素荧光探针在早期肝癌检测中的应用评价 | 第64-80页 |
| 4.1 实验试剂及仪器 | 第64-65页 |
| 4.1.1 所用蛋白及酶试剂 | 第64页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第64-65页 |
| 4.1.3 主要试剂及溶液的配制 | 第65页 |
| 4.2 三种不同免疫检测方法的对比 | 第65-69页 |
| 4.2.1 直接ELISA法与间接ELISA法对检测灵敏度的影响 | 第65-67页 |
| 4.2.2 间接ELISA法与双抗夹心法对检测灵敏度的影响 | 第67-69页 |
| 4.3 双抗夹心ELISA检测条件的优化 | 第69-70页 |
| 4.3.1 抗体包被温度对免测结果的影响 | 第69页 |
| 4.3.2 AFP捕获抗体及生物素化检测抗体浓度对检测结果的影响 | 第69页 |
| 4.3.3 荧光探针浓度对检测结果的影响 | 第69页 |
| 4.3.4 商业化藻红蛋白/链霉亲和素探针分子SA-RPE对AFP检测的应用评价 | 第69-70页 |
| 4.4 重组藻胆蛋白/链霉亲和素探针分子对早期肝癌标志物的检测评价 | 第70页 |
| 4.4.1 两种藻胆蛋白/链霉亲和素探针分子对AFP检测的应用评价 | 第70页 |
| 4.4.2 两种藻胆蛋白/链霉亲和素探针分子对不同肝癌标志物检测结果的评价 | 第70页 |
| 4.4.3 SA-PCA-PEB与商品化SA-RPE检测结果对比 | 第70页 |
| 4.5 实验结果讨论 | 第70-78页 |
| 4.5.1 直接ELISA法与间接ELISA法的结果结果对比 | 第70-71页 |
| 4.5.2 间接ELISA与双抗夹心ELISA检测结果对比 | 第71-72页 |
| 4.5.3 双抗夹心法检测条件的优化结果 | 第72-76页 |
| 4.5.4 两种藻胆蛋白/链霉亲和素探针分子对AFP检测结果的应用评价 | 第76页 |
| 4.5.5 两种藻胆蛋白/链霉亲和素探针分子对不同肝癌标志物检测结果的评价 | 第76-77页 |
| 4.5.6 SA-PCA-PEB与商品化SA-RPE检测结果的对比 | 第77-78页 |
| 4.6 本章小结 | 第78-80页 |
| 第五章 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
