摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第12-22页 |
1.1 白桦 | 第12页 |
1.2 三萜类化合物的合成及生物活性 | 第12-14页 |
1.2.1 三萜化合物的合成途径 | 第12-14页 |
1.2.2 三萜化合物的生物活性 | 第14页 |
1.3 一氧化氮(Nitric oxide)研究进展 | 第14-15页 |
1.3.1 植物中NO的来源途径 | 第14-15页 |
1.3.2 植物中NO的生理作用 | 第15页 |
1.4 活性氧 | 第15-19页 |
1.4.1 植物细胞内ROS的来源 | 第16-17页 |
1.4.2 植物细胞内ROS的清除系统 | 第17-18页 |
1.4.3 植物细胞内ROS的作用 | 第18-19页 |
1.5 钙信号 | 第19-20页 |
1.5.1 植物细胞内钙的分布和转移系统 | 第19-20页 |
1.5.2 Ca~(2+)在植物信号转导中的作用 | 第20页 |
1.6 植物细胞凋亡 | 第20-21页 |
1.7 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
2 外源NO对白桦三萜合成及抗氧化酶活性的影响 | 第22-43页 |
2.1 材料与方法 | 第22-27页 |
2.1.1 植物材料培养条件 | 第22页 |
2.1.2 外源信号的添加及猝灭 | 第22页 |
2.1.3 总三萜的提取与测定 | 第22-23页 |
2.1.4 齐墩果酸的提取与测定 | 第23页 |
2.1.5 细胞活力的测定 | 第23-24页 |
2.1.6 抗逆酶活性的测定 | 第24-25页 |
2.1.7 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第25页 |
2.1.8 脯氨酸含量的测定 | 第25-26页 |
2.1.9 Real-time PCR检测 | 第26-27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-40页 |
2.2.1 适用于白桦花药细胞SNP浓度的筛选 | 第27-29页 |
2.2.2 施加SNP对白桦细胞齐墩果酸含量的影响 | 第29-30页 |
2.2.3 外源NO对细胞活力的影响 | 第30页 |
2.2.4 外源NO对白桦细胞抗氧化酶活性的影响 | 第30-34页 |
2.2.5 外源NO对白桦细胞内丙二醛(MDA)含量的影响 | 第34-35页 |
2.2.6 外源NO对白桦细胞内脯氨酸含量的影响 | 第35-36页 |
2.2.7 外源NO对白桦细胞内基因表达量的影响 | 第36-40页 |
2.3 讨论 | 第40-42页 |
2.4 本章小结 | 第42-43页 |
3 活性氧在外源NO诱导白桦三萜合成过程中的作用 | 第43-60页 |
3.1 材料与方法 | 第43-45页 |
3.1.1 植物材料培养条件 | 第43页 |
3.1.2 外源信号的添加与淬灭 | 第43页 |
3.1.3 细胞内H_2O_2含量测定 | 第43页 |
3.1.4 超氧阴离子(O_2~(·-))含量的测定 | 第43-44页 |
3.1.5 齐墩果酸提取与测定 | 第44页 |
3.1.6 细胞活力的测定 | 第44页 |
3.1.7 抗氧化酶活性的测定 | 第44页 |
3.1.8 丙二醛含量测定 | 第44页 |
3.1.9 脯氨酸含量测定 | 第44页 |
3.1.10 Real-time PCR检测 | 第44-45页 |
3.2 结果与分析 | 第45-56页 |
3.2.1 外源NO对细胞内ROS含量的影响 | 第45-46页 |
3.2.2 ROS对NO诱导的白桦齐墩果酸的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 ROS在NO改变细胞生长状况过程中的作用 | 第47-48页 |
3.2.4 ROS在NO改变细胞活力过程中的作用 | 第48-49页 |
3.2.5 NO诱导过程中ROS对抗氧化酶活性的影响 | 第49-52页 |
3.2.6 NO诱导过程中ROS对丙二醛(MDA)含量的影响 | 第52页 |
3.2.7 NO诱导过程中ROS对细胞内游离脯氨酸含量的影响 | 第52-53页 |
3.2.8 NO诱导过程中ROS对细胞内相关基因表达的影响 | 第53-56页 |
3.3 讨论 | 第56-58页 |
3.4 本章小结 | 第58-60页 |
4 钙信号在外源NO诱导白桦三萜合成中的作用 | 第60-75页 |
4.1 材料与方法 | 第60-61页 |
4.1.1 植物材料培养条件 | 第60页 |
4.1.2 外源信号的添加及淬灭 | 第60页 |
4.1.3 胞内钙离子浓度的测定 | 第60页 |
4.1.4 齐墩果酸的提取与测定 | 第60页 |
4.1.5 细胞活力的测定 | 第60页 |
4.1.6 防御酶活性测定 | 第60页 |
4.1.7 过氧化氢含量检测 | 第60页 |
4.1.8 超氧阴离子含量检测 | 第60页 |
4.1.9 丙二醛含量检测 | 第60页 |
4.1.10 脯氨酸含量检测 | 第60-61页 |
4.1.11 Real-time PCR检测 | 第61页 |
4.2 结果与分析 | 第61-73页 |
4.2.1 外源NO对白桦细胞内钙离子浓度的影响 | 第61-62页 |
4.2.2 Ca~(2+)在NO诱导白桦齐墩果酸合成过程中的作用 | 第62-63页 |
4.2.3 Ca~(2+)对NO诱导白桦细胞生长的影响 | 第63-64页 |
4.2.4 NO诱导过程中Ca~(2+)对白桦细胞活力的影响 | 第64-65页 |
4.2.5 NO诱导过程中Ca~(2+)对抗氧化酶活性的影响 | 第65-68页 |
4.2.6 Ca~(2+)对NO诱导的白桦细胞内ROS含量的影响 | 第68-69页 |
4.2.7 Ca~(2+)对NO诱导的白桦细胞内丙二醛含量的影响 | 第69-70页 |
4.2.8 Ca~(2+)对NO诱导的白桦细胞内游离脯氨酸含量的影响 | 第70页 |
4.2.9 Ca~(2+)对NO诱导的白桦细胞内关键基因表达的影响 | 第70-73页 |
4.3 讨论 | 第73-74页 |
4.4 本章小结 | 第74-75页 |
5 外源NO诱导过程中细胞凋亡情况的变化 | 第75-84页 |
5.1 材料与方法 | 第75页 |
5.1.1 植物材料培养条件 | 第75页 |
5.1.2 外源信号的添加及淬灭 | 第75页 |
5.1.3 吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定细胞凋亡 | 第75页 |
5.1.4 台盼蓝染色测定细胞死亡率 | 第75页 |
5.2 结果与分析 | 第75-81页 |
5.2.1 外源NO诱导过程中白桦细胞凋亡水平的变化情况 | 第75-79页 |
5.2.2 ROS在外源NO诱导细胞凋亡过程中的作用 | 第79-80页 |
5.2.3 Ca~(2+)在外源NO诱导细胞凋亡过程中的作用 | 第80-81页 |
5.3 讨论 | 第81-83页 |
5.4 本章小结 | 第83-84页 |
结论 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
附录 | 第94-97页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |