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鲤疱疹病毒Ⅱ型灭活疫苗免疫应答机理与保护效果研究

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表(按字母顺序排列)第10-12页
第一章 文献综述第12-28页
    1 鲤疱疹病毒II型研究进展第12-16页
        1.1 国内外流行现状第12页
        1.2 鲫造血器官坏死症流行病学研究第12-13页
            1.2.1 鲫造血器官坏死症的临床症状第13页
            1.2.2 鲫造血器官坏死症的流行特征第13页
        1.3 鲤疱疹病毒II型的理化和生物学特征第13-14页
        1.4 鲤疱疹病毒II型的检测技术第14-16页
            1.4.1 电镜技术第14页
            1.4.2 细胞培养技术第14-15页
            1.4.3 分子生物学检测第15-16页
                1.4.3.1 聚合酶链式反应(PCR)第15页
                1.4.3.2 巢式PCR第15-16页
                1.4.3.3 实时荧光定量PCR第16页
                1.4.3.4 环介导等温扩增技术第16页
    2 鱼类免疫系统研究第16-21页
        2.1 鱼类非特异性免疫第17-20页
            2.1.1 血细胞第17-18页
                2.1.1.1 红细胞第17页
                2.1.1.2 白细胞第17-18页
            2.1.2 血清酶活性第18-19页
                2.1.2.1 溶菌酶第18-19页
                2.1.2.2 超氧化物歧化酶第19页
            2.1.3 吞噬细胞第19页
            2.1.4 补体第19-20页
        2.2 鱼类特异性免疫第20-21页
            2.2.1 淋巴细胞第20页
            2.2.2 抗体第20-21页
    3 渔用疫苗的研究第21-26页
        3.1 疫苗的分类第21-23页
            3.1.1 传统疫苗第21-22页
            3.1.2 新型疫苗第22-23页
        3.2 疫苗的免疫途径第23-25页
            3.2.1 注射免疫第23-24页
            3.2.2 浸泡免疫第24页
            3.2.3 口服免疫第24-25页
        3.3 影响疫苗免疫效果的因素第25-26页
            3.3.1 疫苗免疫原性第25页
            3.3.2 免疫剂量第25-26页
            3.3.3 免疫佐剂第26页
    4 研究目的及意义第26-28页
第二章 鲤疱疹病毒II型(CyHV-2)细胞培养灭活疫苗有效免疫剂量研究第28-37页
    1 材料与方法第28-32页
        1.1 实验材料第28-30页
            1.1.1 实验动物第28-29页
            1.1.2 病毒与细胞系第29页
            1.1.3 实验试剂第29页
            1.1.4 实验器皿第29-30页
            1.1.5 实验仪器与设备第30页
        1.2 实验方法第30-32页
            1.2.1 细胞培养灭活疫苗的制备第30页
            1.2.2 疫苗的无菌检验与安全性检测第30-31页
            1.2.3 疫苗有效免疫剂量的测定第31页
            1.2.4 注射免疫与采血第31-32页
            1.2.5 中和抗体效价测定第32页
            1.2.6 攻毒试验第32页
        1.3 数据分析第32页
    2 结果与分析第32-35页
        2.1 疫苗的无菌检验与安全性检验第32-34页
        2.2 中和抗体检测第34-35页
        2.3 相对免疫保护率第35页
    3 讨论第35-37页
第三章 CyHV-2 灭活疫苗注射免疫异育银鲫效果研究第37-52页
    1 材料与方法第37-44页
        1.1 实验材料第37-40页
            1.1.1 试验鱼及饲养条件第37页
            1.1.2 病毒、细胞系及菌株第37-38页
            1.1.3 试验试剂第38-39页
            1.1.4 试验器皿第39页
            1.1.5 试验仪器与设备第39页
            1.1.6 引物设计第39-40页
        1.2 实验方法第40-44页
            1.2.1 CyHV-2 细胞培养灭活疫苗的制备第40页
            1.2.2 吞噬原的制备第40页
            1.2.3 注射免疫第40-41页
            1.2.4 样品采集与处理第41页
                1.2.4.1 血清采集与处理第41页
                1.2.4.2 组织采集与处理第41页
            1.2.5 免疫指标的检测第41-42页
                1.2.5.1 血液生理指标第41页
                1.2.5.2 吞噬细胞的吞噬活性第41-42页
                1.2.5.3 血清酶活性测定第42页
                1.2.5.4 中和抗体效价检测第42页
            1.2.6 Real-time PCR检测样品中IL-11和C3补体基因表达量第42-44页
                1.2.6.1 总RNA提取和cDNA的合成第42-44页
                1.2.6.2 Real-time PCR分析第44页
            1.2.7 攻毒试验第44页
        1.3 数据分析第44页
    2 结果与分析第44-50页
        2.1 血细胞计数第44-45页
        2.2 白细胞分类计数第45-46页
        2.3 吞噬细胞吞噬活性第46-47页
        2.4 血清酶活性第47-48页
        2.5 中和抗体效价第48-49页
        2.6 免疫相关基因的表达变化第49-50页
        2.7 相对免疫保护率第50页
    3 讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-63页
附录第63-64页
致谢第64页

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