| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 油棕概述 | 第9-11页 |
| 1.1.1 油棕起源 | 第9页 |
| 1.1.2 油棕地理分布 | 第9-10页 |
| 1.1.3 油棕栽培史 | 第10页 |
| 1.1.4 油棕植物学与品系分类 | 第10-11页 |
| 1.2 油棕花粉在种质资源保存与创新利用中的重要性 | 第11页 |
| 1.3 油棕花粉保存技术的发展 | 第11-12页 |
| 1.4 影响油棕花粉活力的主要因素 | 第12-13页 |
| 1.4.1 温度 | 第12页 |
| 1.4.2 相对湿度 | 第12-13页 |
| 1.4.3 大气成分和大气压力 | 第13页 |
| 1.5 油棕花粉离体萌发研究 | 第13页 |
| 1.6 转录组测序及萌发相关基因筛选 | 第13-14页 |
| 1.6.1 转录组测序 | 第13-14页 |
| 1.6.2 萌发相关基因筛选方法介绍 | 第14页 |
| 1.7 引物设计与合成方法介绍 | 第14-15页 |
| 1.7.1 引物设计的原则及注意事项 | 第14页 |
| 1.7.2 引物合成 | 第14-15页 |
| 1.7.3 内参基因的选择 | 第15页 |
| 1.8 RT-PCR概述 | 第15-18页 |
| 1.8.1 RT-PCR原理 | 第15-16页 |
| 1.8.2 RT-PCR主要方法介绍 | 第16-17页 |
| 1.8.3 RT-PCR技术评价及应用展望 | 第17页 |
| 1.8.4 实时荧光定量PCR在植物基因表达验证上的发展 | 第17-18页 |
| 1.9 技术路线及研究目的意义 | 第18-20页 |
| 1.9.1 技术路线 | 第18-19页 |
| 1.9.2 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 油棕花粉采集方法 | 第20页 |
| 2.1.1 油棕花粉采集时间 | 第20页 |
| 2.1.2 油棕花粉采集方法 | 第20页 |
| 2.2 油棕花粉保存前预处理 | 第20-21页 |
| 2.3 油棕花粉保存方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 低温保存 | 第21页 |
| 2.3.2 超低温保存 | 第21-22页 |
| 2.3.3 气体保存 | 第22页 |
| 2.3.4 有机溶剂保存 | 第22页 |
| 2.4 油棕花粉活力检测方法 | 第22-24页 |
| 2.4.1 I-IK染色法 | 第22页 |
| 2.4.2 TTC测定法 | 第22-23页 |
| 2.4.3 FCR测定方法 | 第23页 |
| 2.4.4 醋酸洋红染色法 | 第23页 |
| 2.4.5 培养基萌发法 | 第23-24页 |
| 2.5 油棕人工授粉 | 第24页 |
| 2.5.1 授粉器 | 第24页 |
| 2.5.2 花粉稀释 | 第24页 |
| 2.5.3 授粉方法 | 第24页 |
| 2.6 油棕花粉萌发最佳培养方法的选择 | 第24-26页 |
| 2.6.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.6.2 花粉培养方法 | 第24-25页 |
| 2.6.3 最适培养温度与最适培养时间的选择 | 第25页 |
| 2.6.4 最适培养基的选择 | 第25-26页 |
| 2.7 油棕花粉批量萌发 | 第26页 |
| 2.7.1 仪器用具及材料 | 第26页 |
| 2.7.2 批量萌发步骤 | 第26页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR | 第26-30页 |
| 2.8.1 仪器用具 | 第26页 |
| 2.8.2 试剂配制 | 第26-27页 |
| 2.8.3 油棕花粉总RNA提取 | 第27页 |
| 2.8.4 1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量 | 第27页 |
| 2.8.5 cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| 2.8.6 cDNA质量检测 | 第28页 |
| 2.8.7 内参基因的选择与荧光定量PCR体系及程序 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-45页 |
| 3.1 油棕花粉保存方法筛选结果 | 第30页 |
| 3.2 油棕花粉萌发率最佳测定方法的确定 | 第30页 |
| 3.3 油棕花粉萌发最佳培养基、培养温度与培养时间的筛选结果 | 第30-36页 |
| 3.3.1 油棕花粉萌发率及花粉管长度与温度的关系 | 第30-32页 |
| 3.3.2 油棕花粉萌发率及花粉管长度与培养时间的关系 | 第32-35页 |
| 3.3.3 油棕花粉萌发的最适培养基分析 | 第35-36页 |
| 3.4 油棕花粉批量萌发 | 第36-39页 |
| 3.5 RNA及cDNA的质量检测分析 | 第39-41页 |
| 3.5.1 RNA检测结果 | 第39-40页 |
| 3.5.2 cDNA检测结果 | 第40-41页 |
| 3.6 基因表达验证分析 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1 油棕花粉收集保存 | 第45页 |
| 4.2 花粉萌发最适培养基的选择 | 第45页 |
| 4.3 花粉萌发最佳培养时间的选择 | 第45-46页 |
| 4.4 油棕花粉萌发关键基因表达验证的问题探讨 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
