| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号及缩略语的说明 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 木霉菌的研究进展 | 第13-29页 |
| 1 木霉的分类地位、分布及作用 | 第13页 |
| 2 国内外木霉属的研究概况 | 第13-23页 |
| 2.1 解磷微生物的研究进展 | 第13-15页 |
| 2.2 解钾微生物的研究进展 | 第15-16页 |
| 2.3 木霉在生防方面的研究进展 | 第16-18页 |
| 2.3.1 竞争作用 | 第17页 |
| 2.3.2 重寄生作用 | 第17-18页 |
| 2.3.3 抗生作用 | 第18页 |
| 2.4 木霉对植物促长作用的研究进展 | 第18-19页 |
| 2.5 木霉降解农药的研究进展 | 第19-23页 |
| 参考文献 | 第23-29页 |
| 第二章 农杆菌介导的丝状真菌遗传转化 | 第29-39页 |
| 1 ATMT的转化机理 | 第29-30页 |
| 2 ATMT法转化特点 | 第30-31页 |
| 2.1 转化受体的多样性 | 第30-31页 |
| 2.2 转化效率高 | 第31页 |
| 2.3 较高的单拷贝插入 | 第31页 |
| 2.4 转化子具有较好的遗传稳定性 | 第31页 |
| 3 影响农杆菌介导的丝状真菌遗传转化效率的因素 | 第31-33页 |
| 3.1 根癌农杆菌菌株类型对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.2 乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.3 菌体浓度对转化效率的影响 | 第32-33页 |
| 3.4 共培养环境对转化效率的影响 | 第33页 |
| 4 ATMT法在木霉转化中的应用 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 第三章 土壤中多功能木霉的筛选 | 第39-49页 |
| 1 材料与仪器 | 第39-40页 |
| 1.1 供试菌种 | 第39页 |
| 1.2 培养基、试剂及主要仪器 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| 2.1 解难溶性无机磷能力的测定 | 第40页 |
| 2.2 解难溶性钾能力的测定 | 第40页 |
| 2.3 拮抗作用测定 | 第40-41页 |
| 2.4 促进植物生长能力的测定 | 第41页 |
| 2.5 降解农药效果的测定 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-45页 |
| 3.1 木霉的解磷、解钾作用 | 第41-43页 |
| 3.1.1 磷标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
| 3.1.2 木霉解磷、解钾能力的测定 | 第42-43页 |
| 3.2 拮抗作用 | 第43-44页 |
| 3.3 促进植物生长作用 | 第44-45页 |
| 3.4 降解农药能力的测定 | 第45页 |
| 4 本章小结 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第四章 多功能木霉的分类、鉴定及系统发育学分析 | 第49-59页 |
| 1 材料与仪器 | 第49-50页 |
| 1.1 供试菌种、试剂和仪器 | 第49页 |
| 1.2 主要试剂的配制 | 第49-50页 |
| 1.3 培养基的配制 | 第50页 |
| 1.4 引物 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-52页 |
| 2.1 木霉的形态学观察 | 第50页 |
| 2.2 木霉的培养及菌体收集 | 第50页 |
| 2.3 木霉基因组DNA的提取 | 第50-51页 |
| 2.4 PCR扩增木霉基因组 | 第51-52页 |
| 2.4.1 PCR反应体系 | 第51页 |
| 2.4.2 PCR反应条件 | 第51-52页 |
| 2.5 T-A克隆转化和阳性重组子的鉴定及验证 | 第52页 |
| 2.6 目的基因的序列测定 | 第52页 |
| 2.7 系统发育学分析 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-57页 |
| 3.1 形态学观察结果 | 第52-54页 |
| 3.2 木霉的分子生物学鉴定 | 第54-57页 |
| 3.2.1 ITS序列鉴定结果 | 第54-55页 |
| 3.2.2 18S rDNA序列鉴定结果 | 第55-57页 |
| 4 本章小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 第五章 农杆菌介导的康氏木霉转化系统的优化及转化子的研究 | 第59-81页 |
| 1 材料与仪器 | 第60-63页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第60页 |
| 1.2 供试培养基 | 第60-62页 |
| 1.3 引物和主要试剂 | 第62页 |
| 1.4 实验菌株保存方法 | 第62-63页 |
| 1.4.1 EHA105的保存 | 第62页 |
| 1.4.2 康氏木霉菌种的保存 | 第62-63页 |
| 1.4.3 康氏木霉T-DNA插入突变子的保存 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-66页 |
| 2.1 康氏木霉对潮霉素B浓度梯度敏感性试验 | 第63页 |
| 2.2 农杆菌对头孢霉素浓度梯度敏感性试验 | 第63页 |
| 2.3 农杆菌EHA105的活化和诱导培养 | 第63页 |
| 2.4 康氏木霉T-400分生孢子的培养 | 第63-64页 |
| 2.5 农杆菌的冻融法转化 | 第64页 |
| 2.6 农杆菌对康氏木霉的转化及转化条件的优化 | 第64-65页 |
| 2.6.1 农杆菌对康氏木霉的转化 | 第64页 |
| 2.6.2 农杆菌对康氏木霉转化条件的优化 | 第64-65页 |
| 2.7 假定转化子的遗传稳定性分析 | 第65页 |
| 2.8 木霉菌丝体的培养和收集 | 第65页 |
| 2.9 木霉基因组DNA的提取 | 第65页 |
| 2.10 假定转化子的T-DNA插入的PCR检测 | 第65-66页 |
| 2.10.1 PCR反应体系 | 第65-66页 |
| 2.10.2 PCR反应条件 | 第66页 |
| 2.11 假定转化子的解磷能力研究 | 第66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-77页 |
| 3.1 康氏木霉对潮霉素B浓度梯度敏感性试验 | 第66-67页 |
| 3.2 农杆菌对头孢霉素浓度梯度敏感性试验 | 第67-68页 |
| 3.3 农杆菌中pCAMBIA1300质粒的提取和PCR | 第68-69页 |
| 3.4 农杆菌介导的康氏木霉转的研究 | 第69-75页 |
| 3.4.1 利用农杆菌进行康氏木霉的转化 | 第69-70页 |
| 3.4.2 农杆菌介导的康氏木霉转化体系的优化 | 第70-74页 |
| 3.4.3 农杆菌介导的康氏木霉转化体系的确立和转化子的获得 | 第74-75页 |
| 3.5 假定转化子的T-DNA插入的PCR检测 | 第75-76页 |
| 3.6 木霉转化子解磷能力的研究 | 第76-77页 |
| 4 本章小结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 全文总结 | 第81-83页 |
| 本文的创新点 | 第83-85页 |
| 附录 论文中的序列 | 第85-93页 |
| 攻读硕士学位期间发表或已接收的学术论文 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
