| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 1 材料和方法 | 第18-36页 |
| 1.1 材料 | 第18-21页 |
| 1.1.1 动物 | 第18页 |
| 1.1.2 细胞株 | 第18页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 1.1.5 引物设计 | 第20页 |
| 1.1.6 常用试剂的配制 | 第20-21页 |
| 1.2 方法 | 第21-36页 |
| 1.2.1 小鼠的繁殖 | 第21页 |
| 1.2.2 小鼠基因鉴定 | 第21-24页 |
| 1.2.3 免疫印迹（western blot） | 第24-26页 |
| 1.2.4 小鼠死亡率的观察 | 第26页 |
| 1.2.5 肝组织切片的HE染色 | 第26-27页 |
| 1.2.6 肝组织切片TUNEL染色 | 第27-28页 |
| 1.2.7 肝组织衰老检测 | 第28页 |
| 1.2.8 肝组织切片免疫组化 | 第28-29页 |
| 1.2.9 Uba3肝细胞条件性敲除小鼠（β-羟基丁酸）酮体的测定 | 第29-30页 |
| 1.2.10 Uba3肝细胞条件敲除小鼠血氨的测定 | 第30页 |
| 1.2.11 Uba3肝细胞条件敲除小鼠血糖的测定 | 第30页 |
| 1.2.12 BNL CL.2 细胞分离胞浆与线粒体 | 第30-31页 |
| 1.2.13 Uba3小鼠分离胞浆与线粒体 | 第31-32页 |
| 1.2.14 免疫荧光 | 第32页 |
| 1.2.15 细胞复苏 | 第32页 |
| 1.2.16 细胞传代 | 第32-33页 |
| 1.2.17 细胞冻存 | 第33页 |
| 1.2.18 BNL Cl.2 细胞脂肪酸氧化功能测定 | 第33-36页 |
| 2 实验结果 | 第36-46页 |
| 2.1 Nedd8肝细胞条件性敲除小鼠的表型分析 | 第36-38页 |
| 2.1.1 Nedd8Δhep小鼠PCR基因鉴定 | 第36页 |
| 2.1.2 Nedd8Δhep小鼠肝组织中NEDD8的蛋白表达检测 | 第36-38页 |
| 2.1.3 Nedd8Δhep小鼠死亡率统计 | 第38页 |
| 2.2 NEDD8对肝细胞凋亡和衰老的影响 | 第38-41页 |
| 2.2.1 Nedd8Δhep小鼠肝组织病理变化及细胞凋亡 | 第38-40页 |
| 2.2.2 Nedd8Δhep小鼠肝组织细胞衰老 | 第40-41页 |
| 2.3 Neddylation对肝细胞脂肪酸代谢的影响 | 第41-46页 |
| 2.3.1 Nedd8 ?hep小鼠肝组织脂肪水平 | 第41页 |
| 2.3.2 线粒体中的Neddylation修饰 | 第41-42页 |
| 2.3.3 Neddylation影响脂肪酸氧化 | 第42-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| 3.1 Nedd8肝细胞条件性敲除小鼠的表型分析 | 第47页 |
| 3.2 Nedd8肝细胞条件性敲除小鼠对肝细胞凋亡和衰老的影响 | 第47-48页 |
| 3.3 Neddylation对肝细胞脂肪酸代谢的影响 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 综述 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 在读期间参加学术活动及研究成果 | 第69-70页 |
