| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 乳腺癌概述 | 第10-11页 |
| 1.2 肿瘤细胞转移相关信号通路概述 | 第11-16页 |
| 1.2.1 JAK/STAT信号通路 | 第11-13页 |
| 1.2.2 Wnt信号通路 | 第13-14页 |
| 1.2.3 NF-κB信号通路 | 第14-16页 |
| 1.3 ETS家族概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 ETS家族 | 第16页 |
| 1.3.2 ELF5结构与功能 | 第16-19页 |
| 1.4 CD24概述 | 第19-21页 |
| 1.5 论文选题依据及研究内容 | 第21-23页 |
| 1.5.1 选题依据 | 第21-22页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 2 ELF5对乳腺癌细胞增殖及转移的影响 | 第23-37页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第23-26页 |
| 2.2.1 仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.2 试剂 | 第24页 |
| 2.2.3 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 细胞的复苏与培养 | 第26页 |
| 2.3.2 转染及蛋白样品制备 | 第26-27页 |
| 2.3.3 免疫印迹（Western Blot） | 第27-28页 |
| 2.3.4 MTT检测细胞增殖 | 第28页 |
| 2.3.5 细胞划痕及Transwell实验 | 第28-29页 |
| 2.3.6 细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 2.4 结果分析 | 第30-35页 |
| 2.4.1 外源pCMV6-DDK-Myc-ELF5质粒、ELF5-shRNA及内源ELF5蛋白水平检测 | 第30-31页 |
| 2.4.2 ELF5对细胞增殖能力的影响 | 第31-32页 |
| 2.4.3 ELF5对细胞转移能力的影响 | 第32-34页 |
| 2.4.4 ELF5对细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-36页 |
| 2.6 小结 | 第36-37页 |
| 3 ELF5与乳腺癌细胞转移信号通路的关系 | 第37-44页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 仪器及试剂 | 第37-38页 |
| 3.2.1 仪器 | 第37页 |
| 3.2.2 试剂 | 第37-38页 |
| 3.2.3 试剂配制 | 第38页 |
| 3.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.3.1 细胞培养及转染 | 第38页 |
| 3.3.2 RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.3.3 反转录 | 第39页 |
| 3.3.4 实时定量 | 第39-40页 |
| 3.3.5 免疫印迹 | 第40页 |
| 3.4 结果分析 | 第40-42页 |
| 3.4.1 ELF5对信号通路关键因子或者下游靶基因转录水平的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.2 ELF5对STAT3蛋白水平的影响 | 第41-42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-43页 |
| 3.6 小结 | 第43-44页 |
| 4 ELF5对CD24转录水平的调控 | 第44-62页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第44-47页 |
| 4.2.1 仪器 | 第44页 |
| 4.2.2 试剂 | 第44-45页 |
| 4.2.3 试剂配制 | 第45-47页 |
| 4.2.4 菌种、细胞与质粒 | 第47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-54页 |
| 4.3.1 细胞培养及转染 | 第47页 |
| 4.3.2 RNA提取 | 第47页 |
| 4.3.3 反转录 | 第47页 |
| 4.3.4 流式检测蛋白含量 | 第47页 |
| 4.3.5 RT-PCR | 第47-48页 |
| 4.3.6 基因组提取 | 第48-49页 |
| 4.3.7 PGL3-CD24-Luc质粒的构建 | 第49-52页 |
| 4.3.8 荧光素酶报告基因实验 | 第52页 |
| 4.3.9 染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第52-54页 |
| 4.4 结果分析 | 第54-60页 |
| 4.4.1 ELF5对CD24、CD44表达的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.2 ELF5对CD24转录水平的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.3 预测CD24启动子上ELF5的结合位点 | 第56-57页 |
| 4.4.4 构建PGL3-CD24-Luc质粒 | 第57-58页 |
| 4.4.5 ELF5调节CD24-WT-Luc的转录活性 | 第58-59页 |
| 4.4.6 ELF5结合到CD24的启动子区域 | 第59-60页 |
| 4.5 讨论 | 第60-61页 |
| 4.6 小结 | 第61-62页 |
| 5 ELF5抑制STAT3因子的分析 | 第62-68页 |
| 5.1 引言 | 第62页 |
| 5.2 仪器与试剂 | 第62-63页 |
| 5.2.1 仪器 | 第62页 |
| 5.2.2 试剂 | 第62页 |
| 5.2.3 试剂配制 | 第62页 |
| 5.2.4 菌种、细胞及质粒 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-64页 |
| 5.3.1 细胞培养 | 第63页 |
| 5.3.2 细胞转染 | 第63页 |
| 5.3.3 RNA提取 | 第63页 |
| 5.3.4 反转录 | 第63页 |
| 5.3.5 实时定量实验 | 第63页 |
| 5.3.6 MTT及小室侵袭实验 | 第63-64页 |
| 5.4 结果分析 | 第64-66页 |
| 5.4.1 干扰CD24后ELF5对STAT3转录水平的影响 | 第64-65页 |
| 5.4.2 干扰CD24后ELF5对细胞增殖的影响 | 第65页 |
| 5.4.3 干扰CD24后ELF5对细胞转移的影响 | 第65-66页 |
| 5.5 讨论 | 第66-67页 |
| 5.6 小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
