| 中文摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 基因工程技术与作物抗虫性改良 | 第12-16页 |
| 1.1.1 抗虫基因及其应用 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Bt基因类型及其表达产物的杀虫机理和杀虫谱 | 第13-14页 |
| 1.1.3 利用Bt基因改良作物抗虫性的现状 | 第14-16页 |
| 1.2 甘蔗螟虫及其治理现状 | 第16-18页 |
| 1.2.1 甘蔗螟虫的种类及特点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 甘蔗螟虫的危害与治理现状 | 第17-18页 |
| 1.3 基因工程技术与甘蔗品种改良 | 第18-23页 |
| 1.3.1 甘蔗转基因改良的优势 | 第18-19页 |
| 1.3.2 甘蔗转基因改良的方法 | 第19-21页 |
| 1.3.3 甘蔗基因工程中的筛选标记 | 第21页 |
| 1.3.4 甘蔗抗虫性转基因改良的现状 | 第21-22页 |
| 1.3.5 甘蔗其它性状转基因改良的现状 | 第22-23页 |
| 1.3.6 甘蔗转基因改良存在的主要问题 | 第23页 |
| 1.4 本研究的目的意义和思路 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-44页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 植物受体材料 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.4 试剂和耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.5 所用检测引物 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-44页 |
| 2.2.1 植物表达载体的构建 | 第25-31页 |
| 2.2.2 供试植物材料的准备 | 第31-32页 |
| 2.2.3 除草剂抗性筛选体系的建立 | 第32-33页 |
| 2.2.4 甘露糖抗性筛选体系的建立 | 第33页 |
| 2.2.5 基因枪法转化甘蔗 | 第33-35页 |
| 2.2.6 农杆菌菌株EHA105生长曲线的建立 | 第35-36页 |
| 2.2.7 植物表达载体导入农杆菌 | 第36-37页 |
| 2.2.8 农杆菌介导法转化甘蔗 | 第37-39页 |
| 2.2.9 抗性植株的分子鉴定 | 第39-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-74页 |
| 3.1 植物表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 3.2 甘蔗胚性愈伤组织的诱导及再生植株的获得 | 第47-48页 |
| 3.3 甘蔗再生体系的抗性预试验 | 第48-57页 |
| 3.3.1 甘蔗对除草剂的敏感性 | 第48-53页 |
| 3.3.2 甘蔗对甘露糖的敏感性 | 第53-57页 |
| 3.4 基因枪轰击法转化甘蔗及筛选结果 | 第57-62页 |
| 3.4.1 外源DNA的准备和验证结果 | 第57-60页 |
| 3.4.2 基因枪轰击转化及抗性植株的获得 | 第60-62页 |
| 3.5 农杆菌菌株EHAl05生长曲线的建立 | 第62-63页 |
| 3.6 植物表达载体导入农杆菌 | 第63-70页 |
| 3.6.1 CaCl_2浓度对感受态细胞质量的影响 | 第63-66页 |
| 3.6.2 热激温度对植物表达载体导入农杆菌的影响 | 第66-70页 |
| 3.7 农杆菌介导法转化甘蔗及抗性筛选 | 第70页 |
| 3.8 抗性植株的分子鉴定 | 第70-74页 |
| 3.8.1 基因组DNA的质量 | 第70-71页 |
| 3.8.2 PCR检测结果 | 第71-72页 |
| 3.8.3 农业部甘蔗及制品质量监督检验测试中心检测 | 第72页 |
| 3.8.4 Dot-Southern检测结果 | 第72-73页 |
| 3.8.5 阳性植株PCR产物测序结果 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-78页 |
| 4.1 关于甘蔗遗传转化中筛选标记基因的选择问题 | 第74-75页 |
| 4.1.1 关于除草剂筛选标记 | 第74页 |
| 4.1.2 关于甘露糖筛选标记 | 第74-75页 |
| 4.2 关于甘蔗遗传转化中筛选技术体系的建立 | 第75-76页 |
| 4.3 关于农杆菌介导的甘蔗遗传转化 | 第76-77页 |
| 4.4 关于后续工作 | 第77-78页 |
| 5小结 | 第78-79页 |
| 5.1 构建了两个分别带有cryⅠA(c)和cryⅡA基因的植物表达载体 | 第78页 |
| 5.2 初步建立了三个甘蔗基因型的PPT及甘露糖筛选体系 | 第78页 |
| 5.3 明确了外源DNA导入农杆菌EHA105时的几个因素条件 | 第78页 |
| 5.4 获得了转cryⅠA(c)基因的甘蔗株系 | 第78-79页 |
| 参考文献: | 第79-85页 |
| 附录Ⅰ 农业部甘蔗及制品质量监督检验测试中心检验结果报告书 | 第85-86页 |
| 附录Ⅲ 缩略词及英汉对照 | 第86-87页 |
| 附录Ⅲ MS培养基配方及其母液的配制 | 第87-88页 |
| 附录Ⅳ 主要溶液的配制 | 第88-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
