摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
中英文缩略表 | 第9-12页 |
第1章 绪论 | 第12-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-34页 |
2.1 实验材料 | 第16-18页 |
2.1.1 实验细胞 | 第16页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第16页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第16-18页 |
2.1.4 主要溶液的配置 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-34页 |
2.2.1 人胃粘膜上皮GES-1细胞培养 | 第18页 |
2.2.2 GFP-hTINF2慢病毒载体的构建 | 第18-22页 |
2.2.3 GPH-hTINF2-SH慢病毒载体构建 | 第22-24页 |
2.2.4 稳定TIN2高表达和干扰TIN2表达的GES-1细胞系的建立 | 第24页 |
2.2.5 Real time PCR检测TIN2基因的表达 | 第24-25页 |
2.2.6 Western Blot检测TIN2蛋白的表达 | 第25-26页 |
2.2.7 平均端粒长度的测定 | 第26-28页 |
2.2.8 PNA-Fish检测端粒功能障碍诱导损伤灶 | 第28-29页 |
2.2.9 染色体的制备 | 第29页 |
2.2.10 染色质免疫共沉淀(Chip) | 第29-33页 |
2.2.11 平均端粒长度的计算 | 第33页 |
2.2.12 统计学分析 | 第33-34页 |
第3章 结果 | 第34-48页 |
3.1 成功构建TIN2高表达载体和干扰载体 | 第34-36页 |
3.1.1 TIN2高表达载体和干扰载体DNA测序分析 | 第34-36页 |
3.2 成功构建稳定TIN2高表达和干扰TIN2表达的GES-1细胞系 | 第36-40页 |
3.2.1 荧光显微镜观察结果 | 第36-38页 |
3.2.2 Real time PCR检测TIN2表达水平 | 第38-39页 |
3.2.3 TIN2高表达和干扰TIN2表达的GES-1细胞中TIN2蛋白的表达 | 第39-40页 |
3.3 平均端粒长度的测定 | 第40页 |
3.4 免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交(PNA-Fish)检测端粒功能障碍诱导损伤灶 | 第40-44页 |
3.5 染色体分析 | 第44-45页 |
3.6 染色质免疫共沉淀(Chip) | 第45-48页 |
第4章 讨论 | 第48-52页 |
第5章 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
文献综述 | 第60-68页 |
参考文献 | 第64-68页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第68-70页 |
本研究课题资助项目 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |