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紫心甘薯查尔酮异构酶基因的克隆及其功能分析

摘要第8-11页
Abstract第11-13页
缩写词表第14-15页
第1章 文献综述第15-26页
    1.1 植物花色素苷的研究进展第15-22页
        1.1.1 花色素苷的结构和种类第15-17页
        1.1.2 花色素苷的合成途径第17-22页
    1.2 查尔酮异构酶的研究进展第22-24页
        1.2.1 chi基因的克隆及其结构第22-23页
        1.2.2 CHI蛋白的结构第23-24页
        1.2.3 chi基因在类黄酮物质代谢调控中的作用第24页
    1.3 紫心甘薯的研究进展第24-26页
第2章 引言第26-28页
    2.1 研究目的和意义第26页
    2.2 研究内容第26-28页
第3章 材料与方法第28-55页
    3.1 实验材料第28-30页
        3.1.1 植物材料第28页
        3.1.2 菌种和载体第28页
        3.1.3 试剂与试剂盒第28-29页
        3.1.4 培养基和主要试剂的配制第29-30页
    3.2 实验方法第30-55页
        3.2.1 Ibchi基因cDNA全序列的RACE克隆第30-35页
        3.2.2 目的DNA片段的回收、连接、转化与测序第35-37页
        3.2.3 Ibchi基因的生物信息学分析第37页
        3.2.4 Ibchi基因结构与拷贝数的分析第37-42页
        3.2.5 Ibchi基因的原核表达第42-45页
        3.2.6 Ibchi基因真核表达载体的构建第45-48页
        3.2.7 Ibchi基因的亚细胞定位第48-49页
        3.2.8 花色素苷的提取与含量的测定第49页
        3.2.9 Ibchi基因的功能鉴定第49-51页
        3.2.10 Ibchi基因mRNA表达量的测定第51-53页
        3.2.11 IbCHI蛋白表达量的测定第53-55页
第4章 结果与分析第55-99页
    4.1 紫心甘薯Ibchi基因全长cDNA的克隆及序列特征分析第55-61页
        4.1.1 紫心甘薯Ibchi基因全长cDNA的克隆第55-57页
        4.1.2 紫心甘薯IbCHI蛋白的氨基酸序列多重比对分析第57-58页
        4.1.3 紫心甘薯IbCHI蛋白结构与亚细胞定位的预测第58-59页
        4.1.4 紫心甘薯Ibchi基因的系统进化树第59-61页
    4.2 紫心甘薯Ibchi基因的结构分析第61-63页
        4.2.1 紫心甘薯Ibchi基因的内部结构第61-62页
        4.2.2 紫心甘薯Ibchi基因的拷贝数第62页
        4.2.3 不同甘薯品种(系)中Ibchi基因的RFLP分析第62-63页
    4.3 紫心甘薯Ibchi基因的原核表达第63-70页
        4.3.1 Ibchi基因原核表达载体的构建第63-65页
        4.3.2 IbCHI重组蛋白的诱导表达第65-68页
        4.3.3 IbCHI重组蛋白的纯化与鉴定第68-69页
        4.3.4 IbCHI重组蛋白抗体的制备与鉴定第69-70页
    4.4 IbCHI蛋白的亚细胞定位第70-74页
        4.4.1 Ibchi-EGFP真核表达载体的构建第70-73页
        4.4.2 洋葱表皮细胞中IbCHI蛋白的亚细胞定位第73-74页
    4.5 紫心甘薯Ibchi基因的功能分析第74-99页
        4.5.1 Ibchi基因的功能鉴定第74-81页
        4.5.2 Ibchi基因结构与花色素苷含量的相关性第81-83页
        4.5.3 Ibchi基因mRNA表达水平与花色素苷含量的相关性第83-88页
        4.5.4 Ibchi基因蛋白表达水平与花色素苷含量的相关性第88-90页
        4.5.5 转Ibchi基因的拟南芥对胁迫的响应第90-99页
第5章 讨论第99-107页
    5.1 Ibchi基因的结构特征第99页
    5.2 IbCHI蛋白的结构特征第99-100页
    5.3 IbCHI蛋白的亚细胞定位第100-101页
    5.4 Ibchi基因的功能互补验证第101页
    5.5 Ibchi在紫心甘薯花色素苷合成中的作用第101-103页
        5.5.1 Ibchi基因mRNA表达水平与花色素苷含量的相关性第101-102页
        5.5.2 Ibchi基因蛋白表达水平与花色素苷含量的相关性第102页
        5.5.3 不同甘薯品种(系)中Ibchi基因表达差异的原因第102-103页
    5.6 Ibchi基因对胁迫的响应第103-105页
        5.6.1 Ibchi基因对蔗糖的响应第103-104页
        5.6.2 Ibchi基因对高光胁迫的响应第104-105页
        5.6.3 Ibchi基因对干旱胁迫的响应第105页
    5.7 展望第105-107页
第6章 结论第107-108页
参考文献第108-118页
附录第118-121页
致谢第121-122页
发表论文及参加课题一览表第122页

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