| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第12-17页 |
| 1.1 课题背景 | 第12-14页 |
| 1.1.1 植物转录因子 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物抗盐碱性分子机制 | 第13-14页 |
| 1.2 胁迫相关蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 SAP蛋白的作用 | 第14-15页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 水稻OsiSAP1基因的克隆及生物信息学分析 | 第17-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第17-22页 |
| 2.1.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第18-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-25页 |
| 2.2.1 水稻OsiSAP1基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.2 植物表达载体pGWB11-OsiSAP1-Flag的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.3 水稻OsiSAP1基因的信息学分析 | 第25页 |
| 2.3 本章小结 | 第25-27页 |
| 3 水稻OsiSAP1的表达特性及OsiSAP1的亚细胞定位 | 第27-34页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 材料 | 第27页 |
| 3.2 方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 OsiSAP1基因表达特性分析 | 第27-28页 |
| 3.2.2 OsiSAP1蛋白的亚细胞定位 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-33页 |
| 3.3.1 OsiSAP1基因在不同组织器官的表达特性 | 第29-30页 |
| 3.3.2 OsiSAP1基因不同时间胁迫下特异性表达分析 | 第30-31页 |
| 3.3.3 构建瞬时表达载体的酶切鉴定 | 第31-33页 |
| 3.4 本章小结 | 第33-34页 |
| 4 水稻OsiSAP1基因在拟南芥中的表达及抗性解析 | 第34-43页 |
| 4.1 材料和方法 | 第34-37页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 4.1.2 方法 | 第34-36页 |
| 4.1.3 转OsiSAP1基因拟南芥的耐盐碱性分析 | 第36-37页 |
| 4.2 结果与分析 | 第37-42页 |
| 4.2.1 转OsiSAP1基因拟南芥植株的分子检测 | 第37-38页 |
| 4.2.2 转OsiSAP1基因拟南芥的抗盐碱性分析 | 第38-42页 |
| 4.3 本章小结 | 第42-43页 |
| 5 碱性盐胁迫下过表达OsiSAP1基因水稻的抗性分析 | 第43-52页 |
| 5.1 | 第43-45页 |
| 5.1.1 材料 | 第43-45页 |
| 5.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 5.2.1 诱导水稻愈伤组织 | 第45页 |
| 5.2.2 转化苗的获得 | 第45-47页 |
| 5.2.3 过表达OsiSAP1基因水稻抗性分析 | 第47页 |
| 5.3 结果与分析 | 第47-51页 |
| 5.3.1 农杆菌介导法获得水稻转化子 | 第47-48页 |
| 5.3.2 过表达OsiSAP1基因水稻转化苗潮霉素抗性筛选 | 第48-51页 |
| 5.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 6 水稻OsiSAP1互作蛋白的筛选鉴定 | 第52-64页 |
| 6.1 实验材料 | 第52页 |
| 6.1.1 菌株和载体 | 第52页 |
| 6.1.2 培养基及实验试剂 | 第52页 |
| 6.2 实验方法 | 第52-58页 |
| 6.2.1 水稻酵母cDNA文库菌的获得 | 第52-54页 |
| 6.2.2 重组表达载体的构建及酶切鉴定 | 第54-55页 |
| 6.2.3 转pGBKT7-Osi SAP1(Bait)酵母菌的自激活检测 | 第55页 |
| 6.2.4 酵母双杂交筛库 | 第55-56页 |
| 6.2.5 酵母双杂交蛋白互作菌株的深度鉴定 | 第56-57页 |
| 6.2.6 OsiSAP1蛋白与互作基因的反向验证 | 第57-58页 |
| 6.3 结果与分析 | 第58-63页 |
| 6.3.1 酵母表达载体pGBKT7-Osi SAP1的构建及酶切鉴定 | 第58-60页 |
| 6.3.2 酵母双杂交互作蛋白的筛选与基因鉴定 | 第60-61页 |
| 6.3.3 反向验证与OsiSAP1互作蛋白间的作用 | 第61-63页 |
| 6.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 7 讨论 | 第64-67页 |
| 7.1 水稻OsiSAP1是一个含A20/AN1锌指结构域的胁迫相关蛋白 | 第64页 |
| 7.2 OsiSAP1参与植物盐碱胁迫应答机制 | 第64-65页 |
| 7.3 OsiSAP1蛋白是与其他蛋白共同的作用 | 第65-67页 |
| 8 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
