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釉结在牙齿发育中作用的探究及iPS细胞向软骨方向诱导分化的体外研究

中文摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 绪论第8-18页
    1.1 牙齿的发生发育及釉结的发生发育第8-12页
        1.1.1 牙齿的发生发育第8-9页
        1.1.2 釉结的发生发育第9-10页
        1.1.3 釉结与牙齿发生发育现状研究第10-12页
    1.2 多能干细胞的相关研究与应用第12-13页
    1.3 多能干细胞向软骨方向分化第13-16页
        1.3.1 软骨的发生发育第13-14页
        1.3.2 软骨损伤退变及相关疾病的现状研究及治疗研究第14-15页
        1.3.3 多能干细胞体外向软骨分化的相关研究第15-16页
    1.4 目的与意义第16页
    1.5 研究思路第16-18页
        1.5.1 釉结在牙齿发生发育中的重要作用第16-17页
        1.5.2 多能干细胞体外向软骨分化的相关研究第17-18页
第二章 釉结在牙齿发生发育中重要作用的探究第18-30页
    2.1 实验动物与实验耗材第18-19页
        2.1.1 实验动物第18页
        2.1.2 实验器材第18页
        2.1.3 实验试剂第18-19页
    2.2 实验方法第19-24页
        2.2.1 14.5 天牙胚的获取第19页
        2.2.2 牙胚上皮与间充质的分离第19-20页
        2.2.3 上皮组织与间充质组织的重组与体外培养第20页
        2.2.4 肾包膜移植、移植后取样第20-21页
        2.2.5 冰冻组织切片第21页
        2.2.6 组织切片苏木素-伊红(HE)染色及显微镜下观察第21页
        2.2.7 处理培养牙胚以及处理后牙胚的肾包膜移植第21-22页
        2.2.8 组织原位杂交第22-24页
    2.3 实验结果与讨论第24-29页
        2.3.1 牙胚的分离形态观察及釉结的识别切割第24-25页
        2.3.2 重组牙胚的移植结果第25-26页
        2.3.3 重组后牙齿的染色形态观察第26-27页
        2.3.4 体外培养不同组重组牙胚的釉结-FGF4 原位杂交定位第27-29页
    2.4 小结第29-30页
第三章 诱导多能干细胞向软骨方向分化的体外研究第30-46页
    3.1 实验耗材第30-31页
        3.1.1 实验器材第30页
        3.1.2 实验试剂第30-31页
    3.2 实验方法第31-39页
        3.2.1 细胞的准备第31-32页
        3.2.2 拟胚体(embryonic body, EB)的制备第32页
        3.2.3 向软骨方向诱导分化第32-33页
        3.2.4 分化过程中样品的收集第33页
        3.2.5 RNA 的提取第33-34页
        3.2.6 RNA 反转录第34页
        3.2.7 qRT-PCR 检测第34-35页
        3.2.8 形态观察第35页
        3.2.9 冰冻切片第35页
        3.2.10 组织切片苏木素-伊红(HE)染色及显微镜下观察第35页
        3.2.11 阿利新蓝染色(Alcian blue staining,AB)第35页
        3.2.12 免疫组织化学染色第35-36页
        3.2.13 免疫印迹实验(Western blot)第36-39页
    3.3 实验结果与讨论第39-45页
        3.3.1 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化过程中形态的变化第39-40页
        3.3.2 iPSCs/ESCs 向软骨方向分化的形态观察第40页
        3.3.3 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化前期中胚层基因表达情况第40-41页
        3.3.4 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化不同时期软骨相关基因表达情况第41-42页
        3.3.5 iPSCs/ESCs 诱导成软骨的胞外基质表达情况第42-44页
        3.3.6 iPSCs/ESCs 诱导成软骨的胞外蛋白分泌情况第44-45页
    3.4 小结第45-46页
参考文献第46-49页
作者简介第49页
已发表论文第49-50页
致谢第50页

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