中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第8-18页 |
1.1 牙齿的发生发育及釉结的发生发育 | 第8-12页 |
1.1.1 牙齿的发生发育 | 第8-9页 |
1.1.2 釉结的发生发育 | 第9-10页 |
1.1.3 釉结与牙齿发生发育现状研究 | 第10-12页 |
1.2 多能干细胞的相关研究与应用 | 第12-13页 |
1.3 多能干细胞向软骨方向分化 | 第13-16页 |
1.3.1 软骨的发生发育 | 第13-14页 |
1.3.2 软骨损伤退变及相关疾病的现状研究及治疗研究 | 第14-15页 |
1.3.3 多能干细胞体外向软骨分化的相关研究 | 第15-16页 |
1.4 目的与意义 | 第16页 |
1.5 研究思路 | 第16-18页 |
1.5.1 釉结在牙齿发生发育中的重要作用 | 第16-17页 |
1.5.2 多能干细胞体外向软骨分化的相关研究 | 第17-18页 |
第二章 釉结在牙齿发生发育中重要作用的探究 | 第18-30页 |
2.1 实验动物与实验耗材 | 第18-19页 |
2.1.1 实验动物 | 第18页 |
2.1.2 实验器材 | 第18页 |
2.1.3 实验试剂 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 14.5 天牙胚的获取 | 第19页 |
2.2.2 牙胚上皮与间充质的分离 | 第19-20页 |
2.2.3 上皮组织与间充质组织的重组与体外培养 | 第20页 |
2.2.4 肾包膜移植、移植后取样 | 第20-21页 |
2.2.5 冰冻组织切片 | 第21页 |
2.2.6 组织切片苏木素-伊红(HE)染色及显微镜下观察 | 第21页 |
2.2.7 处理培养牙胚以及处理后牙胚的肾包膜移植 | 第21-22页 |
2.2.8 组织原位杂交 | 第22-24页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第24-29页 |
2.3.1 牙胚的分离形态观察及釉结的识别切割 | 第24-25页 |
2.3.2 重组牙胚的移植结果 | 第25-26页 |
2.3.3 重组后牙齿的染色形态观察 | 第26-27页 |
2.3.4 体外培养不同组重组牙胚的釉结-FGF4 原位杂交定位 | 第27-29页 |
2.4 小结 | 第29-30页 |
第三章 诱导多能干细胞向软骨方向分化的体外研究 | 第30-46页 |
3.1 实验耗材 | 第30-31页 |
3.1.1 实验器材 | 第30页 |
3.1.2 实验试剂 | 第30-31页 |
3.2 实验方法 | 第31-39页 |
3.2.1 细胞的准备 | 第31-32页 |
3.2.2 拟胚体(embryonic body, EB)的制备 | 第32页 |
3.2.3 向软骨方向诱导分化 | 第32-33页 |
3.2.4 分化过程中样品的收集 | 第33页 |
3.2.5 RNA 的提取 | 第33-34页 |
3.2.6 RNA 反转录 | 第34页 |
3.2.7 qRT-PCR 检测 | 第34-35页 |
3.2.8 形态观察 | 第35页 |
3.2.9 冰冻切片 | 第35页 |
3.2.10 组织切片苏木素-伊红(HE)染色及显微镜下观察 | 第35页 |
3.2.11 阿利新蓝染色(Alcian blue staining,AB) | 第35页 |
3.2.12 免疫组织化学染色 | 第35-36页 |
3.2.13 免疫印迹实验(Western blot) | 第36-39页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第39-45页 |
3.3.1 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化过程中形态的变化 | 第39-40页 |
3.3.2 iPSCs/ESCs 向软骨方向分化的形态观察 | 第40页 |
3.3.3 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化前期中胚层基因表达情况 | 第40-41页 |
3.3.4 iPSCs/ESCs 向软骨方向诱导分化不同时期软骨相关基因表达情况 | 第41-42页 |
3.3.5 iPSCs/ESCs 诱导成软骨的胞外基质表达情况 | 第42-44页 |
3.3.6 iPSCs/ESCs 诱导成软骨的胞外蛋白分泌情况 | 第44-45页 |
3.4 小结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
作者简介 | 第49页 |
已发表论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |