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基于DNA恒温扩增技术的转基因作物快速检测方法研究

致谢第6-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
英文缩略表第23-26页
1 绪论第26-64页
    1.1 课题背景第26-36页
        1.1.1 转基因生物及其发展现状第26-31页
        1.1.2 转基因生物安全性评价及其管理第31-33页
        1.1.3 转基因作物的构建流程及基本概念第33-36页
    1.2 现有的检测手段及存在问题第36-41页
        1.2.1 基于蛋白分析的检测第36-37页
        1.2.2 基于核酸分析的检测第37-40页
        1.2.3 本节小结第40-41页
    1.3 基于核酸扩增技术的检测方法的基本模块及发展现状第41-43页
        1.3.1 核酸提取第41-42页
        1.3.2 核酸扩增与产物检测第42-43页
        1.3.3 本节小结第43页
    1.4 核酸恒温扩增技术原理及其在农产品检测中的应用第43-52页
        1.4.1 交叉引物恒温扩增技术(CPA)第43-46页
        1.4.2 介导恒温扩增技术(LAMP)第46-51页
        1.4.3 本节小结第51-52页
    1.5 新型核酸扩增产物检测方法的研究现状第52-58页
        1.5.1 电化学分析法第53-55页
        1.5.2 光学分析法第55-57页
        1.5.3 本节小结第57-58页
    1.6 本文选题依据第58-59页
    1.7 研究目的、内容和技术路线第59-62页
        1.7.1 研究目的和内容第59-60页
        1.7.2 技术路线第60-62页
    1.8 本章小结第62-64页
2 交叉引物恒温扩增体系用于检测转基因通用元件nos终止子的建立第64-86页
    2.1 引言第64-66页
    2.2 实验部分第66-72页
        2.2.1 材料和试剂第66-67页
        2.2.2 仪器设备第67-68页
        2.2.3 实验方法第68-72页
    2.3 结果与讨论第72-83页
        2.3.1 CPA引物设计第72-78页
        2.3.2 实时荧光CPA特异性分析第78页
        2.3.3 实时荧光CPA检测灵敏度第78-82页
        2.3.4 传统实时荧光PCR检测灵敏度第82页
        2.3.5 实时荧光CPA检测转基因掺杂的大米实际样本第82-83页
    2.4 本章小结第83-86页
3 基于pH变化的电化学无标记快速检测核酸扩增方法的建立第86-108页
    3.1 引言第86-87页
    3.2 检测原理、可行性以及工作设想第87-92页
    3.3 实验部分第92-97页
        3.3.1 材料和试剂第92-93页
        3.3.2 仪器设备第93-94页
        3.3.3 实验方法第94-97页
    3.4 结果与讨论第97-106页
        3.4.1 pH-CPA体系的建立第97-102页
        3.4.2 实时电化学检测pH-CPA扩增定量性能的考察第102-103页
        3.4.3 丝网印刷电极及pH标准曲线的建立第103-105页
        3.4.4 丝网印刷电极终点法检测pH-CPA扩增第105-106页
    3.5 本章小结第106-108页
4 新型可视化检测核酸恒温扩增方法的建立第108-128页
    4.1 引言第108-109页
    4.2 检测原理、可行性以及工作设想第109-111页
    4.3 实验部分第111-116页
        4.3.1 材料和试剂第111-112页
        4.3.2 仪器设备第112页
        4.3.3 实验方法第112-116页
    4.4 结果与讨论第116-125页
        4.4.1 钼酸铵-酒石酸钾锑-抗坏血酸(Mo-Sb-Vc)体系检测磷酸的标准曲线第116-117页
        4.4.2 扩增体系中非扩增特异性Pi信号分析第117-120页
        4.4.3 扩增体系中扩增特异性Pi信号分析第120-122页
        4.4.4 基于Pi信号产生的可视化方法用于CPA检测第122-123页
        4.4.5 基于Pi信号产生的可视化方法用于LAMP检测第123-124页
        4.4.6 防污染装置的设计和应用第124-125页
    4.5 本章小结第125-128页
5 抗虫转基因水稻品系的快速鉴定方法及其在实际样品中的应用第128-142页
    5.1 引言第128-131页
    5.2 实验部分第131-135页
        5.2.1 材料和试剂第131-132页
        5.2.2 仪器设备第132-133页
        5.2.3 实验方法第133-135页
    5.3 结果与讨论第135-139页
        5.3.1 4种抗虫转基因水稻相关基因的LAMP扩增第135-136页
        5.3.2 不同转基因掺杂度对检测的影响第136-137页
        5.3.3 加工前后样品中抗虫转基因水稻品系的鉴定第137-138页
        5.3.4 纸上可视化点阵列鉴别抗虫转基因水稻品系第138-139页
    5.4 本章小结第139-142页
6 全文总结与展望第142-149页
    6.1 主要研究结论第142-144页
    6.2 主要创新点第144-145页
    6.3 进一步研究展望第145-149页
参考文献第149-157页
作者简历第157-159页

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