中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
第1章 绪论 | 第7-17页 |
1.1 植物异源附加系 | 第7-10页 |
1.1.1 植物异源附加系的培育 | 第7-8页 |
1.1.2 植物异源附加系的鉴定 | 第8-9页 |
1.1.3 植物异源附加系的传递性 | 第9-10页 |
1.2 甜菜异源单体附加系 | 第10-12页 |
1.2.1 甜菜异源单体附加系的培育 | 第10-11页 |
1.2.2 甜菜异源单体附加系的鉴定 | 第11-12页 |
1.2.3 甜菜异源单体附加系的传递性 | 第12页 |
1.3 染色体微切割、微分离与微克隆技术 | 第12-15页 |
1.3.1 植物染色体微切割、微分离及微克隆技术原理 | 第12-13页 |
1.3.2 植物染色体微切割、微分离及微克隆技术的发展史 | 第13-14页 |
1.3.3 植物染色体微切割、微分离及微克隆技术的应用价值 | 第14-15页 |
1.4 生物信息学的发展及应用 | 第15-16页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-40页 |
2.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 试剂、试剂盒、质粒与菌株 | 第17页 |
2.2 甜菜单体附加系M14后代镜检及数据统计 | 第17-18页 |
2.2.1 镜检过程 | 第17-18页 |
2.2.2 镜检数据统计方法 | 第18页 |
2.3 染色体分离 | 第18-19页 |
2.3.1 染色体标本制作 | 第18-19页 |
2.3.2 微玻璃针的制备和染色体微分离 | 第19页 |
2.4 单染色体LA-PCR | 第19-23页 |
2.4.1 蛋白酶K消化 | 第19-20页 |
2.4.2 LA-PCR扩增 | 第20-23页 |
2.5 Southern杂交 | 第23-26页 |
2.6 PCR | 第26-28页 |
2.7 微克隆 | 第28-31页 |
2.7.1 目标染色体第二轮扩增产物的回收及纯化 | 第28-29页 |
2.7.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
2.7.3 连接与转化 | 第30页 |
2.7.4 阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第30-31页 |
2.7.5 选取阳性克隆测序 | 第31页 |
2.8 表达序列基因全长的克隆 | 第31-38页 |
2.8.1 总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.8.2 甜菜单体附加系M14表达序列3'端的扩增 | 第32-35页 |
2.8.3 杂交种M14表达序列5'端的扩增 | 第35-37页 |
2.8.4 基因全长的RT-PCR | 第37-38页 |
2.9 基因m14-2c1的生物信息学分析 | 第38-40页 |
第3章 结果与分析 | 第40-68页 |
3.1 甜菜单体附加系M14后代镜检及结果统计 | 第40页 |
3.2 染色体的显微观察 | 第40-41页 |
3.3 LA-PCR扩增结果以及Southern杂交 | 第41-42页 |
3.4 甜菜Genomic DNA的检测 | 第42页 |
3.5 PCR验证 | 第42-44页 |
3.6 微克隆 | 第44页 |
3.7 表达序列基因全长的克隆 | 第44-50页 |
3.8 基因m14-2c1的生物信息学分析 | 第50-68页 |
第4章 讨论 | 第68-71页 |
第5章 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
附录 | 第82-87页 |
致谢 | 第87-88页 |