| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-33页 |
| 1.1 表观遗传学简介 | 第11-12页 |
| 1.2 DNA甲基化与去甲基化 | 第12-21页 |
| 1.2.1 DNA的甲基化修饰及其功能 | 第12页 |
| 1.2.2 DNA甲基化酶 | 第12-14页 |
| 1.2.3 DNA甲基化修饰在配子形成和胚胎发育过程中的动态变化 | 第14页 |
| 1.2.4 DNA甲基化与基因表达调控 | 第14-15页 |
| 1.2.5 DNA甲基化与神经 | 第15页 |
| 1.2.6 DNA甲基化与肿瘤 | 第15-17页 |
| 1.2.7 DNA甲基化的检测方法 | 第17-19页 |
| 1.2.8 DNA去甲基化 | 第19-21页 |
| 1.3 组蛋白甲基化与去甲基化 | 第21-22页 |
| 1.4 DNA甲基化与组蛋白赖氨酸甲基化之间的关系 | 第22页 |
| 1.5 UHRF家族蛋白的研究进展 | 第22-29页 |
| 1.5.1 UHRF家族蛋白的发现史及命名 | 第23页 |
| 1.5.2 UHRF1蛋白简介 | 第23-26页 |
| 1.5.3 UHRF1蛋白的功能研究 | 第26-28页 |
| 1.5.4 UHRF2蛋白及其功能 | 第28-29页 |
| 1.6 基因工程小鼠简介 | 第29-33页 |
| 1.6.1 转基因小鼠(Transgenic Mice) | 第29页 |
| 1.6.2 完全基因敲除小鼠(Constitutive Knock-Out Mice) | 第29页 |
| 1.6.3 条件性基因敲除小鼠(Conditional Knock-Out Mice) | 第29-30页 |
| 1.6.4 基因捕获小鼠(Gene Trap Mice) | 第30-31页 |
| 1.6.5 基因敲入小鼠(Knock-In Mice) | 第31页 |
| 1.6.6 CRISPR/Cas9系统基因敲除技术 | 第31-33页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第33-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-40页 |
| 2.2 实验用溶液及其配制 | 第40-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-56页 |
| 第三章 UHRF1蛋白丧失结合H3K9me2/3修饰能力的突变体体内功能研究 | 第56-66页 |
| 3.1 前言 | 第56-57页 |
| 3.2 实验结果 | 第57-63页 |
| 3.2.1 Uhrfl~(ki/+)突变体小鼠的构建是成功的 | 第57-58页 |
| 3.2.2 Uhrfl~(ki/ki)纯合突变引起全基因组DNA甲基化水平降低 | 第58-60页 |
| 3.2.3 RRBS法对Uhrfl~(ki/ki)小鼠肝脏DNA甲基化变化进行全基因组分析 | 第60-61页 |
| 3.2.4 Uhrfl~(ki/ki)纯合突变引起重复序列转录水平的上升 | 第61-63页 |
| 3.2.5 Uhrfl~(ki/ki)突变对小鼠胚胎发育没有明显影响 | 第63页 |
| 3.3 实验结果讨论 | 第63-66页 |
| 3.3.1 Uhrfl~(ki/ki)纯合突变能引起全基因组DNA甲基化水平的降低 | 第63-64页 |
| 3.3.2 Uhrfl~(ki/ki)纯合突变能引起重复序列转录水平的改变 | 第64页 |
| 3.3.3 Uhrfl~(ki/ki)纯合突变对小鼠的胚胎发育没有大的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.4 未来工作展望 | 第65-66页 |
| 第四章 利用Uhrf2 gene trap小鼠研究UHRF2蛋白的功能 | 第66-70页 |
| 4.1 前言 | 第66页 |
| 4.2 实验结果 | 第66-69页 |
| 4.2.1 Uhrf2~(trap/trap)纯合突变对小鼠的胚胎发育基本没有影响 | 第66-67页 |
| 4.2.2 Uhrf2~(trap/trap)纯合突变仍有野生型Uhrf2基因的渗漏转录 | 第67-68页 |
| 4.2.3 Uhrf2~(trap/trap)纯合突变不影响基因组DNA的甲基化水平 | 第68-69页 |
| 4.3 实验结果讨论 | 第69-70页 |
| 第五章 利用Uhrf2 knock out小鼠研究UHRF2蛋白的功能 | 第70-75页 |
| 5.1 前言 | 第70页 |
| 5.2 实验结果 | 第70-73页 |
| 5.2.1 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变小鼠体内没有UHRF2蛋白的表达 | 第70-71页 |
| 5.2.2 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变对全基因组DNA甲基化水平的影响不大 | 第71-72页 |
| 5.2.3 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变能引起脑组织DNA羟甲基化水平的降低 | 第72页 |
| 5.2.4 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变对Tet1/2/3基因的转录活性影响不大 | 第72-73页 |
| 5.2.5 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变对小鼠的胚胎发育没有重大影响 | 第73页 |
| 5.3 实验结果讨论 | 第73-75页 |
| 5.3.1 UHRF2可能特异地参与5hmC修饰的调控 | 第73-74页 |
| 5.3.2 Uhrf2~(N2/N2)纯合突变对小鼠的胚胎发育没有重大影响 | 第74页 |
| 5.3.3 未来工作展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
