摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第12-23页 |
1.1 植物病原线虫的危害 | 第12页 |
1.2 植物病原线虫的致病机理 | 第12页 |
1.3 植物病原线虫的防治 | 第12-16页 |
1.3.1 化学防治 | 第12-13页 |
1.3.2 物理防治 | 第13页 |
1.3.3 栽培防治 | 第13页 |
1.3.4 选育抗病品种 | 第13-14页 |
1.3.5 生物防治 | 第14-16页 |
1.3.5.1 真菌 | 第14-15页 |
1.3.5.2 细菌 | 第15页 |
1.3.5.3 放线菌 | 第15-16页 |
1.3.5.4 植物 | 第16页 |
1.3.5.5 其他生防资源 | 第16页 |
1.4 Bt对寄生线虫的作用 | 第16-18页 |
1.4.1 杀线虫活性的发现 | 第16-17页 |
1.4.2 种类及其基因型 | 第17页 |
1.4.3 伴胞晶体及其杀线虫机理 | 第17页 |
1.4.4 外毒素 | 第17-18页 |
1.4.5 几丁质酶 | 第18页 |
1.5 微生物挥发性代谢产物(MVOCs) | 第18-21页 |
1.5.1 MVOCs的主要类型 | 第18页 |
1.5.2 MVOCs在植物病害中的应用 | 第18-21页 |
1.5.2.1 MVOCs的促生作用 | 第18-19页 |
1.5.2.2 MVOCs对病原菌的拮抗致死作用 | 第19-20页 |
1.5.2.3 MVOCs的杀线虫活性 | 第20页 |
1.5.2.4 MVOCs的作用机制 | 第20-21页 |
1.5.3 MVOCs的萃取技术 | 第21页 |
1.5.4 GC-MS在MVOCs检测中的应用 | 第21页 |
1.6 本研究的立题依据和意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 供试菌株及线虫 | 第23-24页 |
2.1.2 培养基 | 第24页 |
2.1.3 仪器 | 第24页 |
2.2 方法与步骤 | 第24-33页 |
2.2.1 松材线虫的饲养 | 第24-26页 |
2.2.1.1 松材线虫的分离 | 第24-25页 |
2.2.1.2 线虫的计数 | 第25页 |
2.2.1.3 线虫的消毒 | 第25页 |
2.2.1.4 线虫的保存 | 第25页 |
2.2.1.5 不同真菌对线虫繁殖的影响 | 第25页 |
2.2.1.6 不同温度对线虫繁殖的影响 | 第25页 |
2.2.1.7 不同接种量对线虫繁殖的影响 | 第25-26页 |
2.2.1.8 不同菌龄的链格孢菌对线虫繁殖的影响 | 第26页 |
2.2.1.9 线虫在链格孢菌上的生长曲线 | 第26页 |
2.2.2 产杀线虫挥发性代谢产物Bt菌株的筛选及其培养条件的优化 | 第26-30页 |
2.2.2.1 Bt菌株上清发酵液的制备 | 第26页 |
2.2.2.2 三格培养皿法测定Bt挥发物的杀线虫活性 | 第26页 |
2.2.2.3 产杀线虫挥发性代谢产物的Bt菌株的复筛 | 第26-27页 |
2.2.2.4 单因素试验 | 第27页 |
2.2.2.5 Plackett-Burman设计 | 第27-28页 |
2.2.2.6 最陡爬坡试验 | 第28页 |
2.2.2.7 Box-Behnkem设计对培养条件的进一步优化 | 第28-29页 |
2.2.2.8 优化效果验证 | 第29-30页 |
2.2.3 菌株BRC-XQ12挥发性代谢产物的鉴定 | 第30-33页 |
2.2.3.1 SPME法收集菌株BRC-XQ12的VOCs | 第30页 |
2.2.3.2 GC-MS法鉴定菌株BRC-XQ12的VOCs | 第30页 |
2.2.3.3 活性有机化合物的筛选与确定 | 第30-32页 |
2.2.3.4 高杀线虫活性有机化合物最低完全致死浓度的计算 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-58页 |
3.1 松材线虫的饲养 | 第33-38页 |
3.1.1 松材线虫的分离鉴定 | 第33-34页 |
3.1.2 不同真菌对松材线虫繁殖的影响 | 第34页 |
3.1.3 松材线虫繁殖的最适温度 | 第34-35页 |
3.1.4 松材线虫在链格孢菌上繁殖的最佳接种量 | 第35-36页 |
3.1.5 不同菌龄的链格孢菌对线虫繁殖的影响 | 第36-37页 |
3.1.6 松材线虫在链格孢菌上的生长曲线 | 第37-38页 |
3.2 对线虫高活性Bt菌株的获得及其培养条件的优化 | 第38-53页 |
3.2.1 产杀线虫挥发性代谢产物的Bt菌株的初步筛选 | 第38-40页 |
3.2.2 产杀线虫挥发性代谢产物的Bt菌株的复筛 | 第40-41页 |
3.2.3 不同碳源对Bt BRC-XQ12杀线虫活性的影响 | 第41-42页 |
3.2.4 不同氮源对Bt BRC-XQ12杀线虫活性的影响 | 第42-43页 |
3.2.5 Plackett-Burman设计法筛选重要影响因子 | 第43-46页 |
3.2.6 最陡爬坡试验 | 第46页 |
3.2.7 响应面分析优化培养条件 | 第46-50页 |
3.2.8 优化效果验证 | 第50-53页 |
3.2.8.1 优化模型可靠性验证 | 第50页 |
3.2.8.2 优化模型对杀线虫速度的影响 | 第50-51页 |
3.2.8.3 优化模型对发酵时间的影响 | 第51-52页 |
3.2.8.4 对3种线虫的活性比较 | 第52-53页 |
3.2.8.5 活性炭验证BRC-XQ12挥发性代谢产物的杀线虫活性 | 第53页 |
3.3 Bt BRC-XQ12所产VOCs的测定 | 第53-58页 |
3.3.1 SPME-GC/MS鉴定BRC-XQ12产生的VOCs | 第53-56页 |
3.3.2 19种候选化合物杀线虫活性测定 | 第56-57页 |
3.3.3 高杀线虫活性化合物最低完全致死浓度计算 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
4.1 关于松材线虫饲养方法的改良 | 第58页 |
4.2 关于Bt产杀线虫挥发物的最佳培养条件 | 第58-59页 |
4.3 关于Bt产生的杀线虫挥发性代谢产物 | 第59-60页 |
5 结论与展望 | 第60-61页 |
5.1 结论 | 第60页 |
5.2 展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
附录 部分有活性化合物的质谱图 | 第69-74页 |
致谢 | 第74页 |