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铜绿假单胞菌NY3胞外小分子活性物及其促进烃类降解的作用机制研究

摘要第3-5页
abstract第5-8页
1 前言第14-30页
    1.1 疏水性有机污染物的生物降解特性第14-17页
        1.1.1 疏水性有机污染物的结构特性第14-15页
        1.1.2 疏水性有机污染物的理化性质第15-16页
        1.1.3 有机污染物的疏水性、毒性及其生物降解特性第16页
        1.1.4 烃类的结构特性、环境污染现状及其可生化性分析第16-17页
    1.2 烃类污染物生物降解研究现状第17-22页
        1.2.1 环境中烃类降解菌的分布特性第17-18页
        1.2.2 微生物降解烃的相关氧化酶的研究现状第18-19页
        1.2.3 微生物胞内酶促降解烃类的途径第19-20页
        1.2.4 假单胞菌属及其对烃的降解特性第20-22页
    1.3 铜绿假单胞菌及其烃降解特性研究现状第22-24页
        1.3.1 铜绿假单胞菌及其特性第22页
        1.3.2 铜绿假单胞菌烷氧化酶研究现状第22-23页
        1.3.3 铜绿假单胞菌胞外分泌的鼠李糖脂及其促进烃降解特性第23-24页
        1.3.4 铜绿假单胞菌NY3及其降解烃的研究第24页
    1.4 铜绿假单胞菌胞外氧化还原活性小分子及其特性第24-27页
        1.4.1 铜绿假单胞菌分泌的吩嗪类物质及其产活性氧的特性第24-25页
        1.4.2 铜绿假单胞菌降解烃过程中所积累的小分子酸及其特性第25页
        1.4.3 绿脓杆菌螯铁蛋白的分泌及其特性第25-26页
        1.4.4 胞外活性小分子促进NY3菌降解烃类污染物可能性分析第26-27页
    1.5 本论文的选题依据、研究目的和研究内容第27-30页
        1.5.1 选题依据第27-28页
        1.5.2 研究目的第28-29页
        1.5.3 研究内容第29页
        1.5.4 课题来源第29-30页
2 实验材料与方法第30-46页
    2.1 实验试剂及仪器第30-32页
        2.1.1 实验试剂第30-31页
        2.1.2 实验仪器第31-32页
    2.2 受试菌株及其培养基组成第32-33页
        2.2.1 受试菌株第32页
        2.2.2 培养基组成第32-33页
    2.3 实验方法第33-39页
        2.3.1 NY3菌种子液的制备第33页
        2.3.2 吩嗪类物质对NY3菌降解石油烃作用的相关实验方法第33-34页
        2.3.3 Fe-PCH对NY3菌降解石油烃作用的相关实验方法第34-35页
        2.3.4 小分子有机酸对NY3菌降解石油烃作用的相关实验方法第35-37页
        2.3.5 鼠李糖脂对NY3菌降解石油烃作用的相关实验方法第37-39页
    2.4 测试方法第39-46页
        2.4.1 十六烷降解率的测定方法第39-40页
        2.4.2 石油烃中各直链烷烃去除率的测定第40页
        2.4.3 NY3菌降解体系中胞外小分子物质的检测第40页
        2.4.4 PCH的LCMS-IT-TOF表征第40-41页
        2.4.5 菌体细胞中NADH和NAD+含量测定第41页
        2.4.6 RT-qPCR实验第41-42页
        2.4.7 十六烷单加氧酶活性测定第42-43页
        2.4.8 NY3菌的十六醇生物转化速率测定第43页
        2.4.9 NY3菌降解十六烷过程脂多糖测定第43-44页
        2.4.10 NY3菌降解十六烷体系的电化学检测第44页
        2.4.11 电子自旋共振(EPR)检测第44页
        2.4.12 NY3菌细胞的SEM表征第44-45页
        2.4.13 NY3菌胞外粘性物质的组成测定第45页
        2.4.14 NY3菌胞外粘性物质的FT-IR表征第45-46页
3 胞外吩嗪类物质对NY3菌降解烃类的影响 及其作用机理研究第46-61页
    3.1 绿脓菌素对NY3菌以烃为碳源时生长特性的影响第46-48页
    3.2 NY3菌生长胞外上清液和菌体细胞降解十六烷的特性第48-49页
    3.3 NY3菌胞外上清液中分泌的吩嗪类物质的提取与鉴定第49-52页
    3.4 NY3菌胞外上清液中吩嗪类分泌量与其对十六烷降解效率的关系第52页
    3.5 NY3菌分泌的吩嗪类与NADH或GSH配合降解十六烷的特性第52-54页
    3.6 NY3菌分泌的吩嗪类与NADH或GSH作用降解十六烷机理第54-57页
    3.7 NY3菌活体细胞降解十六烷体系中自由基的EPR检测第57-58页
    3.8 NY3菌生物降解十六烷时胞外自由基降解氧化机理第58-59页
    3.9 本章小结第59-61页
4 胞外绿脓杆菌鳌铁蛋白对NY3菌降解 十六烷的影响作用研究第61-67页
    4.1 铜绿假单胞菌NY3分泌PCH的纯化及表征第61-62页
    4.2 体外实验研究PCH浓度对Fe-PCH降解十六烷的影响第62-63页
    4.3 Fe浓度对Fe-PCH降解十六烷的影响第63-64页
    4.4 H_2O_2对Fe-PCH降解十六烷的影响第64页
    4.5 Fe-PCH氧化作用在NY3菌活体细胞降解十六烷中所占比例第64-65页
    4.6 Fe-PCH降解十六烷的机制初探第65-66页
    4.7 本章小结第66-67页
5 胞外小分子有机酸对NY3菌降解十六烷的影响机制研究第67-89页
    5.1 小分子有机酸共代谢对NY3菌降解十六烷的影响第67-70页
        5.1.1 小分子有机酸共存对NY3菌在十六烷上生长特性的影响第67-68页
        5.1.2 胞外共存小分子有机酸对NY3菌同步降解十六烷效率的影响第68-69页
        5.1.3 胞外共存小分子有机酸对NY3菌alkB1与alkB2基因转录水平的影响第69-70页
    5.2 共存戊二酸促进NY3菌降解十六烷的作用机制研究第70-81页
        5.2.1 共存戊二酸对NY3菌细胞在十六烷碳源上的生长特性的影响第70-71页
        5.2.2 共存戊二酸浓度随NY3菌生长的变化趋势第71-72页
        5.2.3 戊二酸对NY3菌同步降解十六烷的影响第72-73页
        5.2.4 共存戊二酸对NY3菌降解十六烷过程中细胞氧化还原状态的影响第73-74页
        5.2.5 共存戊二酸对NY3菌生长的细胞中十六烷单加氧酶活性的影响第74页
        5.2.6 共存戊二酸对NY3菌alkB1和alkB2基因表达量的调节作用第74-76页
        5.2.7 共存戊二酸对NY3菌细胞中烷烃羟化酶的诱导作用第76-77页
        3.2.8 共存戊二酸对NY3菌降解十六烷过程中绿脓菌素(Pyo)分泌量的影响第77-78页
        5.2.9 共存戊二酸对NY3菌降解十六烷时分泌吩嗪类物质种类和产量的影响第78-79页
        5.2.10 共存戊二酸对NY3降解十六烷体系电子传递速度的影响第79-80页
        5.2.11 共存戊二酸对NY3菌降解十六烷时细胞表面脂多糖含量的影响第80-81页
    5.3 共存草酸对NY3菌降解十六烷效率的影响作用研究第81-87页
        5.3.1 共存草酸对NY3菌细胞中alkB1和alkB2基因表达特性的影响第82页
        5.3.2 草酸共代谢作用对NY3菌中十六烷单加氧酶活性的影响第82-83页
        5.3.3 共存草酸对NY3菌以烃类碳源生长的胞外上清液降解十六烷的效率的影响第83-84页
        5.3.4 共存草酸对NY3菌胞外分泌氧化还原活性小分子物质特性的影响第84-85页
        5.3.5 PCA对NY3菌的胞外上清液降解十六烷的影响第85-86页
        5.3.6 NY3菌胞外上清液降解十六烷的机理研究第86-87页
    5.4 本章小结第87-89页
6 鼠李糖脂对NY3菌降解石油烃污染物的作用机制研究第89-109页
    6.1 鼠李糖脂在NY3菌固定化生物膜降解含油废水中的作用研究第89-97页
        6.1.1 载体对NY3菌固定化生物膜形成的影响作用第89-90页
        6.1.2 NY3菌在PUF载体上形成生物膜的条件优化第90-91页
        6.1.3 NY3菌固定化生物膜对模拟含油废水的处理性能研究第91-93页
        6.1.4 NY3菌生物膜处理前后废水中原油的表征第93-95页
        6.1.5 鼠李糖脂诱导剂在NY3菌生物膜恢复过程中的作用第95-97页
    6.2 鼠李糖脂在NY3菌快速降解油污泥中的作用研究第97-104页
        6.2.1 油泥中石油烃组分的表征第98页
        6.2.2 溶解氧浓度对NY3菌降解油泥中石油烃效率的影响第98-99页
        6.2.3 鼠李糖脂添加量对NY3菌降解油泥中石油烃的影响第99-100页
        6.2.4 鼠李糖脂对NY3菌降解油泥中石油烃去除速率的影响第100-101页
        6.2.5 产鼠李糖脂发酵碳源甘油对NY3菌降解油泥中石油烃的影响第101-102页
        6.2.6 NY3菌降解油泥过程中产糖蛋白高分子的特性第102-103页
        6.2.7 NY3菌降解油泥过程所产黏性物质对其油泥降解的促进作用第103-104页
    6.3 鼠李糖脂促进NY3菌代谢石油烃机理的研究第104-107页
        6.3.1 鼠李糖脂对NY3菌降解生长的影响第104-105页
        6.3.2 鼠李糖脂对NY3菌利用十六烷碳源合成细胞脂多糖特性的影响第105页
        6.3.3 鼠李糖脂对十六烷向NY3菌胞内传质效率的影响第105-106页
        6.3.4 外加鼠李糖脂对所生长的NY3菌细胞形貌的影响第106-107页
    6.4 本章小结第107-109页
7 结论与建议第109-112页
    7.1 主要结论第109-110页
    7.2 创新点第110-111页
    7.3 建议第111-112页
致谢第112-113页
参考文献第113-136页
在学期间发表研究成果第136页

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