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胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)在鹅肥肝形成中的作用及相关机制研究

中文摘要第3-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第9-14页
文献综述第14-21页
    1.1 鹅肥肝研究进展第14-15页
    1.2 IGFBP家族概况第15-17页
        1.2.1 IGFs的结构与功能第15-17页
        1.2.2 IGFBPs的生物学功能第17页
    1.3 IGFBP2基因的研究进展第17-19页
        1.3.2 IGFBP2基因的作用机制第18-19页
        1.3.3 IGFBP2基因参与的信号通路第19页
    1.4 本研究目的、意义及主要研究内容第19-21页
2 材料方法第21-39页
    2.1 试验材料第21-27页
        2.1.1 试验动物及饲养管理第21页
        2.1.2 朗德鹅胚胎孵化第21页
        2.1.3 主要仪器设备第21-22页
        2.1.4 常用的实验试剂及试剂盒第22-23页
        2.1.5 主要相关试剂的配制第23-26页
        2.1.6 试验所需引物设计第26-27页
    2.2 试验方法及步骤第27-39页
        2.2.1 总RNA提取前的准备第27页
        2.2.2 总RNA的提取第27-29页
        2.2.3 总RNA反转录为cDNA第29-30页
        2.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第30页
        2.2.5 鹅血细胞基因组DNA提取第30-31页
        2.2.6 普通PCR反应第31-32页
        2.2.7 PCR产物检测第32页
        2.2.8 序列分析第32页
        2.2.9 IGFBP2上游转录因子软件预测第32-33页
        2.2.10 鹅原代肝细胞的分离与培养第33-34页
        2.2.11 葡萄糖、胰岛素、脂肪酸、胆固醇、维甲酸分别处理鹅原代肝细胞第34-35页
        2.2.12 细胞RNA提取、反转录以及荧光定量检测第35-36页
        2.2.13 过表达IGFBP2基因第36页
        2.2.14 转染IGFBP2基因过表达载体第36页
        2.2.15 细胞RNA提取第36页
        2.2.16 RNA反转录及荧光定量检测第36页
        2.2.17 小干扰siRNA的设计与合成第36-37页
        2.2.18 siRNA转染鹅原代肝细胞第37-38页
        2.2.19 RNA的提取第38页
        2.2.20 RNA反转录及荧光定量检测第38页
        2.2.21 油红O细胞染色第38-39页
3 结果与分析第39-51页
    3.1 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段不同组织中的表达规律第39-41页
        3.1.1 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段肝脏中的表达规律第39页
        3.1.2 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段胸肌中的表达规律第39-40页
        3.1.3 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段腹脂中的表达规律第40-41页
    3.2 脂肪肝形成相关因子对IGFBP2基因的调控研究第41-44页
        3.2.1 葡萄糖处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响第41页
        3.2.2 胰岛素处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响第41-42页
        3.2.3 脂肪酸(棕榈酸、油酸、亚油酸)处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响第42-43页
        3.2.4 胆固醇处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响第43-44页
    3.3 IGFBP2基因的转录调控研究第44-46页
    3.4 IGFBP2基因对鹅肝细胞脂肪沉积影响的研究第46-48页
        3.4.1 过表达IGFBP2基因后检测目的基因在鹅肝细胞中的表达第46页
        3.4.2 过表达IGFBP2后检测鹅肝细胞脂肪沉积情况第46-47页
        3.4.3 siRNA转染鹅原代肝细胞后IGFBP2基因的表达检测第47页
        3.4.4 抑制IGFBP2基因表达后检测鹅肝细胞脂肪沉积情况第47-48页
    3.5 IGFBP2基因在PI3K-Akt通路中的作用研究第48-51页
        3.5.1 过表达IGFBP2基因对PI3K-Akt通路相关基因表达的影响第48-49页
        3.5.2 抑制IGFBP2基因对PBK-Akt通路相关基因表达的影响第49-51页
4 讨论第51-56页
    4.1 填饲引起的脂肪沉积显著抑制IGFBP2在相关组织中的表达第51-52页
    4.2 IGFBP2表达受不同脂肪肝形成相关因子的影响第52-53页
        4.2.1 葡萄糖和胰岛素显著抑制鹅原代肝细胞中IGFBP2的表达第52页
        4.2.2 胰岛素处理鹅原代肝细胞后对IGFBP2表达的影响第52页
        4.2.3 IGFBP2受不同脂肪酸处理的影响第52-53页
        4.2.4 胆固醇处理显著诱导鹅原代肝细胞中IGFBP2基因的表达第53页
    4.3 Oct-1可能介导鹅IGFBP2基因的转录调控第53页
    4.4 IGFBP2基因表达促进鹅肝细胞的脂肪沉积第53-54页
    4.5 IGFBP2在PI3K-Akt信号通路中的作用第54-56页
5 全文结论第56-57页
参考文献第57-67页
致谢第67-68页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第68-69页

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