| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第9-14页 |
| 文献综述 | 第14-21页 |
| 1.1 鹅肥肝研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 IGFBP家族概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 IGFs的结构与功能 | 第15-17页 |
| 1.2.2 IGFBPs的生物学功能 | 第17页 |
| 1.3 IGFBP2基因的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.2 IGFBP2基因的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.3.3 IGFBP2基因参与的信号通路 | 第19页 |
| 1.4 本研究目的、意义及主要研究内容 | 第19-21页 |
| 2 材料方法 | 第21-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-27页 |
| 2.1.1 试验动物及饲养管理 | 第21页 |
| 2.1.2 朗德鹅胚胎孵化 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.1.4 常用的实验试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要相关试剂的配制 | 第23-26页 |
| 2.1.6 试验所需引物设计 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法及步骤 | 第27-39页 |
| 2.2.1 总RNA提取前的准备 | 第27页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第27-29页 |
| 2.2.3 总RNA反转录为cDNA | 第29-30页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第30页 |
| 2.2.5 鹅血细胞基因组DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.2.6 普通PCR反应 | 第31-32页 |
| 2.2.7 PCR产物检测 | 第32页 |
| 2.2.8 序列分析 | 第32页 |
| 2.2.9 IGFBP2上游转录因子软件预测 | 第32-33页 |
| 2.2.10 鹅原代肝细胞的分离与培养 | 第33-34页 |
| 2.2.11 葡萄糖、胰岛素、脂肪酸、胆固醇、维甲酸分别处理鹅原代肝细胞 | 第34-35页 |
| 2.2.12 细胞RNA提取、反转录以及荧光定量检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13 过表达IGFBP2基因 | 第36页 |
| 2.2.14 转染IGFBP2基因过表达载体 | 第36页 |
| 2.2.15 细胞RNA提取 | 第36页 |
| 2.2.16 RNA反转录及荧光定量检测 | 第36页 |
| 2.2.17 小干扰siRNA的设计与合成 | 第36-37页 |
| 2.2.18 siRNA转染鹅原代肝细胞 | 第37-38页 |
| 2.2.19 RNA的提取 | 第38页 |
| 2.2.20 RNA反转录及荧光定量检测 | 第38页 |
| 2.2.21 油红O细胞染色 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-51页 |
| 3.1 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段不同组织中的表达规律 | 第39-41页 |
| 3.1.1 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段肝脏中的表达规律 | 第39页 |
| 3.1.2 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段胸肌中的表达规律 | 第39-40页 |
| 3.1.3 IGFBP2基因在朗德鹅不同填饲阶段腹脂中的表达规律 | 第40-41页 |
| 3.2 脂肪肝形成相关因子对IGFBP2基因的调控研究 | 第41-44页 |
| 3.2.1 葡萄糖处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响 | 第41页 |
| 3.2.2 胰岛素处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.3 脂肪酸(棕榈酸、油酸、亚油酸)处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.4 胆固醇处理鹅原代肝细胞对IGFBP2基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.3 IGFBP2基因的转录调控研究 | 第44-46页 |
| 3.4 IGFBP2基因对鹅肝细胞脂肪沉积影响的研究 | 第46-48页 |
| 3.4.1 过表达IGFBP2基因后检测目的基因在鹅肝细胞中的表达 | 第46页 |
| 3.4.2 过表达IGFBP2后检测鹅肝细胞脂肪沉积情况 | 第46-47页 |
| 3.4.3 siRNA转染鹅原代肝细胞后IGFBP2基因的表达检测 | 第47页 |
| 3.4.4 抑制IGFBP2基因表达后检测鹅肝细胞脂肪沉积情况 | 第47-48页 |
| 3.5 IGFBP2基因在PI3K-Akt通路中的作用研究 | 第48-51页 |
| 3.5.1 过表达IGFBP2基因对PI3K-Akt通路相关基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.5.2 抑制IGFBP2基因对PBK-Akt通路相关基因表达的影响 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| 4.1 填饲引起的脂肪沉积显著抑制IGFBP2在相关组织中的表达 | 第51-52页 |
| 4.2 IGFBP2表达受不同脂肪肝形成相关因子的影响 | 第52-53页 |
| 4.2.1 葡萄糖和胰岛素显著抑制鹅原代肝细胞中IGFBP2的表达 | 第52页 |
| 4.2.2 胰岛素处理鹅原代肝细胞后对IGFBP2表达的影响 | 第52页 |
| 4.2.3 IGFBP2受不同脂肪酸处理的影响 | 第52-53页 |
| 4.2.4 胆固醇处理显著诱导鹅原代肝细胞中IGFBP2基因的表达 | 第53页 |
| 4.3 Oct-1可能介导鹅IGFBP2基因的转录调控 | 第53页 |
| 4.4 IGFBP2基因表达促进鹅肝细胞的脂肪沉积 | 第53-54页 |
| 4.5 IGFBP2在PI3K-Akt信号通路中的作用 | 第54-56页 |
| 5 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第68-69页 |
