| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 英文缩略词索引 | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-14页 |
| 参考文献 | 第12-14页 |
| 第一部分 lnc-PCE在肺纤维化中表达的研究 | 第14-29页 |
| 前言 | 第15页 |
| 材料与方法 | 第15-23页 |
| 1 材料 | 第15-18页 |
| 1.1 实验用动物及细胞株 | 第15页 |
| 1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
| 1.3 实验主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.4 三段lnc-PCE干扰序列 | 第17页 |
| 1.5 常用试剂配制 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-22页 |
| 2.1 大鼠肺纤维化模型造模 | 第18-19页 |
| 2.2 RLE-6TN细胞的培养及其转分化模型的建立 | 第19-20页 |
| 2.3 荧光定量PCR检测lnc-PCE的表达 | 第20-21页 |
| 2.4 羟脯氨酸检测 | 第21-22页 |
| 2.5 siRNA转染实验(6孔板,sRNA终浓度50nM) | 第22页 |
| 3 统计学分析 | 第22-23页 |
| 结果 | 第23-27页 |
| 1 鉴定lnc-PCE为长链非编码RNA | 第23-24页 |
| 2 Lnc-PCE上调表达且与肺纤维化的发生正相关 | 第24-27页 |
| 讨论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-29页 |
| 第二部分 Lnc-PCE在EMT中的功能研究 | 第29-45页 |
| 前言 | 第30页 |
| 材料与方法 | 第30-37页 |
| 1 材料 | 第30-33页 |
| 1.1 细胞 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂材料 | 第30-32页 |
| 1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第32-33页 |
| 2 方法 | 第33-36页 |
| 2.1 RLE-6TN细胞的培养及其转分化模型的建立 | 第33页 |
| 2.2 引物设计 | 第33页 |
| 2.3 siRNA转染实验(24孔板,siRNA终浓度50 nM) | 第33页 |
| 2.4 细胞免疫荧光 | 第33-34页 |
| 2.5 细胞样品蛋白的提取 | 第34页 |
| 2.6 样品蛋白浓度的检测 | 第34-35页 |
| 2.7 Western bolt免疫印记分析 | 第35页 |
| 2.8 RTCA细胞实时监控分析 | 第35-36页 |
| 2.9 RLE-6TN细胞周期检测 | 第36页 |
| 3 统计学分析 | 第36-37页 |
| 结果 | 第37-42页 |
| 1 Lnc-PCE促进了由TGF-β1诱发的上皮-间质细胞转分化 | 第37-38页 |
| 2 Lnc-PCE促进了由TGF-β1刺激的RLE-6TN细胞增殖 | 第38-39页 |
| 3 Lnc-PCE促进RLE-6TN细胞周期由G0/G1进入S期 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三部分 Lnc-PCE致纤维化潜在机制的研究 | 第45-75页 |
| 前言 | 第47页 |
| 材料与方法 | 第47-57页 |
| 1 材料 | 第47-50页 |
| 1.1 细胞 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂材料 | 第47-49页 |
| 1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 1.4 常用试剂配制 | 第49-50页 |
| 2 方法 | 第50-56页 |
| 2.1 Lnc-PCE靶基因预测 | 第50页 |
| 2.2 PCR检测mRNA的表达 | 第50-52页 |
| 2.3 荧光定量PCR检测lnc-PCE的表达 | 第52页 |
| 2.4 siRNA的转染(6孔板,siRNA浓度50nM),转分化模型的建立 | 第52页 |
| 2.5 双荧光素酶(萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶)报告基因构建 | 第52-56页 |
| 2.6 RTCA细胞实时监控细胞动态 | 第56页 |
| 2.7 RLE-6TN细胞周期的检测 | 第56页 |
| 2.8 Western bolt免疫印记分析 | 第56页 |
| 3 统计学分析 | 第56-57页 |
| 结果 | 第57-72页 |
| 1 筛选lnc-PCE的潜在靶基因 | 第57-60页 |
| 2 MiR-344a-5p是lnc-PCE的靶基因 | 第60-62页 |
| 3 Lnc-PCE与miR-344a-5p直接结合实现彼此调控 | 第62-69页 |
| 4 MAP3K11受miR-344a-5p的直接调控 | 第69-72页 |
| 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 综述: 肺纤维化中的非编码RNA | 第75-85页 |
| 前言 | 第76页 |
| 1. MiRNA与肺纤维化 | 第76-78页 |
| 2. LncRNA与肺纤维化 | 第78页 |
| 3. ncRNA的前景应用 | 第78-79页 |
| 4. 检测ncRNA的新方法 | 第79-80页 |
| 5. 展望 | 第80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 硕士就读期间发表的文章及获得的奖励 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
