| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-17页 |
| 第一章 瓜类细菌性果斑病研究进展 | 第11-17页 |
| 1 病原特性 | 第11-12页 |
| 2 症状识别 | 第12页 |
| 3 入侵途径 | 第12页 |
| 4 致病力的研究现状 | 第12-13页 |
| 5 防治措施 | 第13-14页 |
| 6 组氨酸生物合成途径 | 第14-15页 |
| 7 组氨酸营养缺陷型 | 第15-17页 |
| 第二部分 研究内容 | 第17-59页 |
| 第一章 西瓜噬酸菌致病相关基因hisC的功能研究 | 第19-43页 |
| 1 试验材料 | 第20-23页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第20-21页 |
| ·培养基及抗生素 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22-23页 |
| 2 试验方法 | 第23-34页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增及产物回收 | 第24-25页 |
| ·质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第26页 |
| ·大肠杆菌热击感受态的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·Southern杂交 | 第27-29页 |
| ·突变株的构建 | 第29-31页 |
| ·互补菌株的构建 | 第31-32页 |
| ·在MMX培养基中的生长测定 | 第32页 |
| ·外源添加不同氮源的菌体生长恢复情况 | 第32页 |
| ·外源添加植物组织提取液的菌体生长恢复情况 | 第32页 |
| ·致病性、过敏性反应测定及外源添加组氨酸的恢复情况 | 第32-33页 |
| ·突变体HCM在寄主组织中菌体生长能力的测定 | 第33页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第33页 |
| ·游动性和趋化性应答实验 | 第33-34页 |
| 3 结果和分析 | 第34-41页 |
| ·重组质粒pEXLKR的酶切验证 | 第34页 |
| ·突变株的验证 | 第34-35页 |
| ·互补菌株的验证 | 第35-36页 |
| ·hisC基因的突变影响西瓜噬酸菌的正常生长 | 第36-37页 |
| ·外源添加组氨酸和蛋白胨可恢复突变体的生长 | 第37页 |
| ·外源添加植物组织提取液可恢复突变体的生长 | 第37-38页 |
| ·hisC基因的突变延缓了西瓜噬酸菌的致病时间并丧失了烟草过敏性反应,外源添加组氨酸可恢复其致病性及烟草过敏性反应 | 第38-39页 |
| ·hisC基因的突变影响西瓜噬酸菌在寄主组织中的生长 | 第39-40页 |
| ·hisC基因的突变不影响西瓜噬酸菌胞外纤维素酶的产生 | 第40页 |
| ·hisC基因的突变不影响西瓜噬酸菌的游动性和趋化性 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第二章 西瓜噬酸菌致病相关基因hisA的功能研究 | 第43-59页 |
| 1 试验材料 | 第43-45页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第43页 |
| ·培养基及抗生素 | 第43-44页 |
| ·引物 | 第44-45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| 2 试验方法 | 第45-49页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·PCR扩增及产物回收 | 第45-46页 |
| ·质粒的提取 | 第46页 |
| ·DNA凝胶电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第46页 |
| ·大肠杆菌热击感受态的制备和转化 | 第46页 |
| ·Southern杂交 | 第46页 |
| ·突变株的构建 | 第46-47页 |
| ·互补菌株的构建 | 第47-48页 |
| ·在MMX培养基中的生长测定 | 第48页 |
| ·外源添加不同氮源的菌体生长恢复情况 | 第48页 |
| ·外源添加植物组织提取液的菌体生长恢复情况 | 第48页 |
| ·致病性、过敏性反应测定及外源添加组氨酸的恢复情况 | 第48页 |
| ·在寄主组织中HCM的菌体生长能力测定 | 第48页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第48-49页 |
| ·游动性测定 | 第49页 |
| 3 结果和分析 | 第49-56页 |
| ·自杀重组载体pⅥ-S12的验证 | 第49-50页 |
| ·突变体的验证 | 第50-52页 |
| ·互补菌株的验证 | 第52-53页 |
| ·hisA基因的突变影响西瓜噬酸菌的正常生长 | 第53页 |
| ·外源添加组氨酸和蛋白胨可恢复突变体的生长 | 第53-54页 |
| ·外源添加植物组织提取液可恢复突变体的生长 | 第54页 |
| ·hisA基因的突变延缓了西瓜噬酸菌的致病时间并丧失了烟草过敏性反应,外源添加组氨酸可恢复其致病性及烟草过敏性反应 | 第54-55页 |
| ·hisA基因的突变影响西瓜噬酸菌在寄主组织中的生长 | 第55页 |
| ·hisA基因的突变不影响西瓜噬酸菌胞外纤维素酶的产生 | 第55-56页 |
| ·hisA基因的突变不影响西瓜噬酸菌的游动性 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
