| 目录 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第10-28页 |
| 1.1 干细胞研究介绍 | 第10-12页 |
| 1.1.1 历史 | 第10-11页 |
| 1.1.2 干细胞的特点 | 第11页 |
| 1.1.3 干细胞的分类 | 第11-12页 |
| 1.2 干细胞的分裂模式 | 第12-14页 |
| 1.2.1 干细胞的对称分裂 | 第12-13页 |
| 1.2.2 干细胞的不对称分裂 | 第13-14页 |
| 1.3 干细胞不对称分裂机制 | 第14-26页 |
| 1.3.1 干细胞不对称分裂外在机制 | 第15-18页 |
| 1.3.2 干细胞不对称分裂内在机制 | 第18-26页 |
| 1.4 本课题的研究意义 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第28-46页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第28-35页 |
| 2.1.1 常用生化试剂及缓冲液 | 第28-33页 |
| 2.1.2 实验仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.1.3 载体,菌株及培养基 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法与策略 | 第35-45页 |
| 2.2.1 重组质粒构建 | 第35-37页 |
| 2.2.2 重组质粒的蛋白质表达 | 第37-38页 |
| 2.2.3 重组质粒的蛋白质纯化 | 第38-40页 |
| 2.2.4 蛋白质性质表征 | 第40-41页 |
| 2.2.5 蛋白质相互作用 | 第41-43页 |
| 2.2.6 蛋白质晶体筛选与优化 | 第43-44页 |
| 2.2.7 蛋白质晶体结构解析及修正 | 第44-45页 |
| 2.3 常用软件及网站 | 第45-46页 |
| 第三章 LGN蛋白质自抑制机理研究 | 第46-83页 |
| 3.1 引言 | 第46-49页 |
| 3.2 LGN N端和C端蛋白质的表达 | 第49-53页 |
| 3.2.1 LGN TPRs的表达 | 第49-51页 |
| 3.2.2 GoLoco结构域片段的表达 | 第51-53页 |
| 3.3 LGN TPRs和GoLocoes相互作用研究 | 第53-58页 |
| 3.3.1 GLc1-2与GLc3-4均能与TPR0-7相互作用 | 第53-56页 |
| 3.3.2 TPR4-7是TPR结构域与GLc3-4结合的核心区域 | 第56-57页 |
| 3.3.3 TPR0-7能够同时结合GLc1-2与GLc3-4 | 第57页 |
| 3.3.4 小结与讨论 | 第57-58页 |
| 3.4 LGN TPR结构域和GLc3-4蛋白质复合物的结构研究 | 第58-74页 |
| 3.4.1 通过NMR研究LGN TPR/GLc3-4 | 第58-60页 |
| 3.4.2 LGN TPR/GLc3-4的纯化与表征 | 第60-61页 |
| 3.4.3 LGN TPR/GLc3-4晶体筛选与优化 | 第61-63页 |
| 3.4.4 LGN TPR-Linker-GLc3-4融合蛋白的纯化与表征 | 第63-64页 |
| 3.4.5 LGN TPR-Linker-GLc3-4晶体筛选与优化 | 第64-66页 |
| 3.4.6 LGN TPR2-7-3Ccs-GLc3-4晶体结构研究 | 第66-74页 |
| 3.5 NuMA,Gai参与LGN打开机制的研究 | 第74-83页 |
| 3.5.1 NuMA\GoLoco3-4\TPR0-7竞争实验 | 第74-77页 |
| 3.5.2 Gαi影响GoLoco3-4与TPR0-7的结合 | 第77-78页 |
| 3.5.3 Gαi\NuMA\Pins全长的结合关系 | 第78-82页 |
| 3.5.4 小结与讨论 | 第82-83页 |
| 第四章 LGN蛋白质与新蛋白质Frmpd1相互作用及其复合物结构研究 | 第83-94页 |
| 4.1 引言 | 第83-84页 |
| 4.2 确认Frmpd1与LGN和Pins TPR结构域的相互作用 | 第84-85页 |
| 4.3 Frmpd1/LGN蛋白复合物结构研究 | 第85-89页 |
| 4.3.1 Frmpd1/LGN蛋白复合物晶体筛选 | 第85-86页 |
| 4.3.2 Frmpd1/LGN蛋白复合物蛋白晶体总结构 | 第86-88页 |
| 4.3.3 Frmpd1/LGN蛋白复合物蛋白晶体细微结构 | 第88-89页 |
| 4.4 Frmpdl与NuMA性质的比较 | 第89-91页 |
| 4.4.1 Frmpd1能够单独且能够与Gαi同时结合Pins全长 | 第89-90页 |
| 4.4.2 Frmpd1/NuMA/LGN TPR的结合关系 | 第90-91页 |
| 4.4.3 Frmpd1/Inscuteable/LGN TPR的结合关系 | 第91页 |
| 4.5 总结与讨论 | 第91-94页 |
| 第五章 全文总结和展望 | 第94-97页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第94-95页 |
| 5.2 研究展望 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-110页 |
| 博士期间发表论文情况 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
