| 目录 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.1.1 课题来源 | 第11页 |
| 1.1.2 研究目的 | 第11-12页 |
| 1.1.3 研究意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.1 国外研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.2 国内研究概况 | 第15页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 研究资料及仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第16页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 实验流程与方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 GPC-3-shRNA干扰质粒设计及构建 | 第17-19页 |
| 2.2.2 细胞复苏、培养、冻存和转染 | 第19页 |
| 2.2.3 细胞GPC-3 mRNA检测 | 第19-21页 |
| 2.2.4 细胞蛋白分析 | 第21页 |
| 2.2.5 MTT法检测细胞增殖 | 第21页 |
| 2.2.6 EdU法分析细胞增殖能力 | 第21-22页 |
| 2.2.7 划痕试验分析细胞愈合能力 | 第22页 |
| 2.2.8 Transwell法分析细胞侵袭及运动能力 | 第22页 |
| 2.2.9 细胞周期分析 | 第22-23页 |
| 2.2.10 细胞凋亡分析方法 | 第23页 |
| 2.2.11 间接免疫荧光分析 | 第23-24页 |
| 2.2.12 ELISA法检测VEGF表达 | 第24页 |
| 2.2.13 磺酰罗丹明B蛋白染色法(SRB) | 第24页 |
| 2.2.14 Caspase 3/7活性检测 | 第24-25页 |
| 2.2.15 Z-VAD-FMK抑制Caspase激活 | 第25页 |
| 2.2.16 统计学分析 | 第25-26页 |
| 第三章 结果 | 第26-37页 |
| 3.1 shRNA干扰质粒构建及鉴定 | 第26页 |
| 3.2 shRNA成功转染肝癌细胞 | 第26-27页 |
| 3.3 shRNA干扰影响GPC-3表达 | 第27-28页 |
| 3.4 shRNA干预抑制HepG2细胞增殖 | 第28-30页 |
| 3.5 shRNA干预影响癌细胞运动、迁移及侵袭能力 | 第30-32页 |
| 3.6 shRNA干预使肝癌细胞增殖周期阻滞 | 第32页 |
| 3.7 shRNA促进HepG2细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 3.8 shRNA转染影响β-catenin和Gli1表达 | 第33-34页 |
| 3.9 shRNA转染下调IGF-Ⅱ、VEGF表达 | 第34-35页 |
| 3.10 shRNA和抗癌药物协同抑制作用 | 第35-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-40页 |
| 第五章 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 英文缩写词表 | 第44-46页 |
| 综述 | 第46-56页 |
| 综述参考文献 | 第53-56页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的科研项目 | 第56-59页 |
| A：国内、外刊物正式发表论文 | 第56-57页 |
| B：参加国内、外学术会议论文 | 第57-58页 |
| C：所参加的科研项目 | 第58页 |
| D：参加主办国家/省级继续医学教育项目 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
