| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 RNA的研究 | 第10-17页 |
| 1.1.1 小干扰RNA的发现 | 第10页 |
| 1.1.2 RNA干扰作用机制 | 第10-14页 |
| 1.1.2.1 RNA干扰作用机制的步骤 | 第10-11页 |
| 1.1.2.2 RNA干扰作用机制的种类 | 第11页 |
| 1.1.2.3 RdRP酶的作用 | 第11-12页 |
| 1.1.2.4 RNaseⅢ酶的作用 | 第12页 |
| 1.1.2.5 Dicer酶的作用 | 第12-13页 |
| 1.1.2.6 RISC的作用 | 第13-14页 |
| 1.1.3 RNA干扰作用过程及其特点 | 第14-15页 |
| 1.1.4 siRNA的制备 | 第15-16页 |
| 1.1.5 siRNA的导入方法与途径 | 第16-17页 |
| 1.2 靶向给药系统 | 第17-20页 |
| 1.2.1 靶向给药制剂的分类 | 第18页 |
| 1.2.2 靶向给药的方法 | 第18-19页 |
| 1.2.2.1 载体介导的靶向给药 | 第18-19页 |
| 1.2.2.2 受体介导的靶向给药 | 第19页 |
| 1.2.2.3 抗体介导的靶向给药 | 第19页 |
| 1.2.2.4 化学传递系统 | 第19页 |
| 1.2.3 靶向给药的展望 | 第19-20页 |
| 1.3 壳聚糖 | 第20-21页 |
| 1.3.1 壳聚糖在医药领域的应用 | 第20-21页 |
| 1.3.2 壳聚糖在其他领域的应用 | 第21页 |
| 1.4 磁性微球 | 第21-24页 |
| 1.4.1 磁性微球的组成与特性 | 第22页 |
| 1.4.2 磁性微球的制备方法 | 第22-23页 |
| 1.4.3 磁性微球的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 论文的选题思想及主要内容 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 实验原料 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要设备及仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 纳米级磁性壳聚糖微球的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.1 磁流体的制备 | 第28页 |
| 2.2.2 壳聚糖溶液的配置 | 第28页 |
| 2.2.3 纳米级磁性壳聚糖微球的制备 | 第28-29页 |
| 2.3 酵母RNA的磁性固定化的研究 | 第29-34页 |
| 2.3.1 酵母RNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 酵母RNA含量的测定 | 第29-31页 |
| 2.3.2.1 标准曲线的制作 | 第29-30页 |
| 2.3.2.2 核酸样品的消化 | 第30页 |
| 2.3.2.3 核酸样品总磷的测定 | 第30页 |
| 2.3.2.4 核酸样品无机磷的测定 | 第30-31页 |
| 2.3.3 酵母RNA的磁性固定化条件 | 第31-33页 |
| 2.3.3.1 不同反应时间对固定化的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.3.2 不同反应温度对固定化的影响 | 第32页 |
| 2.3.3.3 不同RNA添加量对固定化的影响 | 第32页 |
| 2.3.3.4 不同pH对固定化的影响 | 第32页 |
| 2.3.3.5 不同戊二醛添加量对固定化的影响 | 第32-33页 |
| 2.3.3.6 不同转速对固定化的影响 | 第33页 |
| 2.3.4 磁性固定化酵母RNA的稳定性 | 第33-34页 |
| 2.3.4.1 磁性固定化酵母RNA的储存稳定性 | 第33页 |
| 2.3.4.2 磁性固定化酵母RNA的操作稳定性 | 第33-34页 |
| 2.4 磁性固定化siRNA的靶向性及对大鼠肝脏GPT基因表达的干扰 | 第34-39页 |
| 2.4.1 GPT酶活力的测定 | 第34-36页 |
| 2.4.1.1 标准曲线的制作 | 第34-35页 |
| 2.4.1.2 GPT酶活性的测定 | 第35-36页 |
| 2.4.2 大鼠肝脏组织培养条件的确定 | 第36-37页 |
| 2.4.2.1 大鼠肝脏组织的培养 | 第36页 |
| 2.4.2.2 培养液更换的最佳时间 | 第36-37页 |
| 2.4.2.3 磁场对培养组织GPT酶活的影响 | 第37页 |
| 2.4.3 磁性固定化siRNA的磁性介导及对大鼠GPT基因表达的干扰 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-58页 |
| 3.1 酵母RNA磁性固定化的研究 | 第39-54页 |
| 3.1.1 定磷溶液标准曲线的绘制 | 第39-40页 |
| 3.1.2 酵母RNA磁性固定化条件的优化 | 第40-49页 |
| 3.1.2.1 固定化最佳反应时间 | 第40-41页 |
| 3.1.2.2 固定化最佳反应温度 | 第41-43页 |
| 3.1.2.3 固定化最佳RNA添加量 | 第43-44页 |
| 3.1.2.4 固定化最佳pH | 第44-46页 |
| 3.1.2.5 固定化最佳戊二醛添加量 | 第46-47页 |
| 3.1.2.6 固定化最佳转速 | 第47-49页 |
| 3.1.3 磁性固定化RNA的稳定性 | 第49-52页 |
| 3.1.3.1 磁性固定化RNA的储存稳定性 | 第49-51页 |
| 3.1.3.2 磁性固定化RNA的操作稳定性 | 第51-52页 |
| 3.1.4 酵母RNA磁性固定化的正交优化实验 | 第52-54页 |
| 3.2 磁性固定化siRNA对大鼠肝脏GPT基因表达的干扰 | 第54-58页 |
| 3.2.1 GPT活力标准曲线的绘制 | 第54页 |
| 3.2.2 培养条件对大鼠肝脏组织GPT酶活的影响 | 第54-56页 |
| 3.2.2.1 培养液更换的最佳时间的确定 | 第54-55页 |
| 3.2.2.2 磁场对GPT酶活力的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.3 磁性固定化siRNA对大鼠GPT基因表达的干扰 | 第56-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
