英文缩略词表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
前言 | 第15-17页 |
第一部分 抑制 RhoC 表达重组质粒和增强 RhoC 表达重组质粒的构建及鉴定 | 第17-29页 |
1.1. 实验材料与方法 | 第17-25页 |
1.1.1. 材料 | 第17-18页 |
1.1.2. 实验方法 | 第18-25页 |
1.2. 结果 | 第25-27页 |
1.2.1. 重组质粒载体图 | 第25页 |
1.2.2. 重组质粒测序结果 | 第25-26页 |
1.2.3. 重组质粒的浓度及纯度 | 第26-27页 |
1.2.4. 荧光显微镜下观察重组质粒体在 293T 细胞中的表达结果 | 第27页 |
1.3. 讨论 | 第27-29页 |
第二部分 抑制 RhoC 表达重组质粒和增强 RhoC 表达重组质粒转染喉鳞状细胞癌Hep2 细胞株 | 第29-43页 |
2.1. 材料 | 第29-30页 |
2.1.1. 细胞株、质粒 | 第29页 |
2.1.2. 主要试剂及仪器 | 第29-30页 |
2.2. 重组质粒与脂质体比例的优化 | 第30-34页 |
2.2.1. 方法 | 第30-31页 |
2.2.2. 重组质粒与脂质体比例的优化结果 | 第31-34页 |
2.3. 重组质粒量的优化 | 第34-36页 |
2.3.1. 方法 | 第34页 |
2.3.2. 重组质粒量的优化结果 | 第34-36页 |
2.4. 免疫荧光染色方法观察 Hep2 细胞 RhoC 及肿瘤干细胞标记物 ALDH1A1的表达情况 | 第36-37页 |
2.4.1. 方法 | 第36页 |
2.4.2. Hep2 细胞中 RhoC 及肿瘤干细胞标记物 ALDH1A1 免疫荧光染色结果 | 第36-37页 |
2.5. QPCR方法检测Hep2细胞RhoC及肿瘤干细胞标记物ALDH1A1的表达情况 | 第37-41页 |
2.5.1. 方法 | 第38-39页 |
2.5.2. ALDH1A1mRNA、RhoCmRNA 表达检测结果 | 第39-41页 |
2.6. 讨论 | 第41-43页 |
2.6.1. 质粒转染喉鳞癌 Hep2 细胞的优化 | 第41-42页 |
2.6.2. RhoC 参与喉鳞癌肿瘤干细胞(CSC)的形成 | 第42-43页 |
第三部分 RhoC 表达对 Hep2 细胞的影响 | 第43-51页 |
3.1. 材料 | 第43页 |
3.1.1. 细胞株、质粒 | 第43页 |
3.1.2. 试剂及仪器 | 第43页 |
3.2. 方法 | 第43-45页 |
3.2.1. 抑制RhoC表达重组质粒GW-shRNA和增强RhoC表达重组质粒13GS03 转染 Hep2 细胞 | 第43-44页 |
3.2.2. TUNEL 检测转染重组质粒后细胞凋亡情况 | 第44页 |
3.2.3. 免疫荧光染色细胞骨架观察重组质粒转染后细胞形态的变化 | 第44-45页 |
3.2.4. 划痕实验观察重组质粒转染后细胞运动能力的变化 | 第45页 |
3.3. 结果 | 第45-48页 |
3.3.1. 转染重组质粒后细胞凋亡结果 | 第45页 |
3.3.2. 免疫荧光染色细胞骨架观察重组质粒转染后细胞形态的变化结果 | 第45页 |
3.3.3. 划痕实验观察重组质粒转染后细胞运动能力的结果 | 第45-48页 |
3.4. 讨论 | 第48-51页 |
第四部分 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
文献综述 | 第57-67页 |
参考文献 | 第62-67页 |
个人简历 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |