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Brpf1和Brpf2基因产物的结构与功能的初步研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
第一章 前言第9-21页
 1. TrxG基因家族简介第9-10页
 2. Brpf1、Brpf2基因简介第10-16页
   ·Brpf1基因的简介第10-11页
   ·Brpf2基因简介第11页
   ·Brpf1、Brpf2的功能结构域简介第11-16页
 3. 同源异型框基因简介第16-17页
 4. Rhox5基因简介第17-19页
   ·Rhox基因家族简介第17页
   ·Rhox5基因简介第17-19页
 5. 研究目的、意义及创新点第19-21页
   ·研究目的第19页
   ·研究意义及创新点第19-21页
第二章 实验仪器与材料第21-26页
 1. 主要仪器第21页
 2. 实验材料第21-26页
   ·细胞、菌种、质粒第21-22页
   ·主要试剂第22-23页
   ·主要溶液的配置第23-26页
第三章 实验方法第26-40页
 1. Western blot检测Brpf1与Brpf2蛋白在小鼠体内蛋白表达水平的分布第26-29页
   ·小鼠组织的提取第26-27页
   ·SDS-PAGE第27-28页
   ·转膜第28页
   ·封闭及抗原抗体反应第28页
   ·发光显影第28-29页
 2. 生物信息学分析Brpf1蛋白和Brpf2蛋白的结构及对其功能第29页
 3. Brfp1、Brpf2蛋白与Rhox5蛋白结合的差异性研究第29-35页
   ·pEYFP-Brpf1、pEYFP-Brpf2和pDsReD2-Rhox5重组质粒的构建第29-34页
   ·荧光定位实验验证Brpf1蛋白、Brfp2蛋白和Rhox5蛋白的相互作用第34-35页
 4. Brpf2蛋白与Rhox5蛋白相互作用关键结构域的确定第35-36页
   ·PEYFP-BrP几A、PEYFP-BrP几B、PEYFP-BrP几C、PEYFP-BrP几D、PEYFP-BrP几E 重组质粒的构建第35-36页
   ·荧光定位实验验证Brfp2蛋白与Rhox5蛋白相互作用的关键结构域第36页
 5. Brpf1、Brpf2蛋白稳定表达细胞系的构建第36-38页
   ·Brpf1-pcDNA(3.1+)和Brpf2-pcDNA(3.1+)重组质粒的构建第36-37页
   ·NIH3T3细胞对G418耐受性的筛选第37页
   ·G418筛选稳定表达细胞系第37-38页
   ·Western blot鉴定Brpf1、Brpf2蛋白稳定表达细胞系第38页
   ·pGEX4T1-Brpf1、pGEX4T1-Brpf2重组质粒的构建第38页
   ·pGEX4T1-Brpf1、pGEX4T1-Brpf2和pGEX4T1质粒转化至RossetaTM 2(DE3)表达菌株第38页
 6. Brpf1、Brpf2蛋白的融合表达及纯化第38-40页
第四章 结果与讨论第40-58页
 1. Brpf1和Brpf2在小鼠体内蛋白表达水平的分布结果第40页
 2. 生物信息学分析结果第40-51页
   ·Brpf1和Brpf2蛋白二级结构分析结果第40-45页
   ·Brpf1和Brpf2蛋白溶剂可及性分析结果第45-46页
   ·Brpf1和Brpf2蛋白三级结构分析结果第46-47页
   ·Brpf1和Brpf2蛋白功能位点分析结果第47-50页
   ·Brpf1和Brpf2蛋白跨膜区域分析结果第50-51页
 3. Brfp1、Brpf2蛋白与Rhox5蛋白结合的差异性研究第51-53页
   ·pEYFP-Brpf1、pEYFP-Brpf2和pDsReD2-Rhox5重组质粒的PCR鉴定结果第51页
   ·Brpf1蛋白、Brfp2蛋白和Rhox5蛋白的相互作用结果第51-53页
 4. Brpf2蛋白与Rhox5蛋白相互作用关键结构域的确定第53-55页
   ·pEYFP-Brpf2A、pEYFP-Brpf2B、pEYFP-Brpf2C、pEYFP-Brprf2D、pEYFP-Brpf2E重组质粒PCR鉴定结果第53页
   ·Brfp2蛋白和Rhox5蛋白相互作用关键结构域的筛选结果第53-55页
 5. Brpf1、Brpf2蛋白稳定表达细胞系的构建第55-56页
   ·Brpf1-pcDNA(3.1+)和Brpf2-pcDNA(3.1+)重组质粒的双酶切鉴定结果第55页
   ·Brpf1、Brpf2蛋白稳定表达细胞系的鉴定结果第55-56页
 6. Brpf1、Brpf2蛋白的融合表达及纯化第56-58页
   ·pGEX4T1-Brpf1、pGEX4T1-Brpf2重组质粒的PCR鉴定结果第56页
   ·Brpf1、Brpf2原核表达融合蛋白的纯化结果第56-58页
第五章 全文小结与展望第58-60页
参考文献第60-66页
附录第66-74页
在学期间发表论文清单第74-75页
致谢第75页

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