摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
主要英文缩略语索引 | 第9-10页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-31页 |
1. 材料 | 第12-18页 |
1.1 质粒、菌种、细胞以及蛋白 | 第12页 |
1.2 主要试剂 | 第12-14页 |
1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第15-18页 |
2. 实验方法 | 第18-31页 |
2.1 DNA-PKcs对SIK2的稳定性调节 | 第18-20页 |
2.2 DNA-PKcs对SIK2蛋白的磷酸化调节 | 第20-28页 |
2.3 SIK2蛋白的Binding DNA实验 | 第28-29页 |
2.4 DNA-PKcs对截短体SIK2(? SIK2)蛋白的调节 | 第29-31页 |
结果 | 第31-47页 |
1. DNA-PKcs对SIK2稳定性的调节 | 第31-33页 |
1.1 敲低或抑制DNA-PKcs会降低SIK2的表达 | 第31页 |
1.2 DNA-PKcs影响SIK2蛋白的降解 | 第31-32页 |
1.3 敲低或抑制DNA-PKcs促进SIK2蛋白的泛素化降解 | 第32-33页 |
2. DNA-PKcs对SIK2的体外磷酸化调节 | 第33-43页 |
2.1 His标签pET20b-SIK2重组质粒的构建及鉴定 | 第33-34页 |
2.2 His标签全长SIK2蛋白的原核诱导表达 | 第34页 |
2.3 His标签全长SIK2蛋白的体外纯化 | 第34-38页 |
2.4 放射自显影检测SIK2蛋白的体外磷酸化实验 | 第38-39页 |
2.5 质谱分析查找SIK2的磷酸化位点 | 第39-43页 |
3. SIK2蛋白的Binding DNA实验 | 第43-45页 |
4. DNA-PKcs对?SIK2蛋白的体外调节 | 第45-47页 |
4.1 cHis-?SIK2的原核诱导表达与纯化(详细流程见 2.3.2) | 第45页 |
4.2 DNA-PKcs对cHis-?SIK2的体外调节 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-52页 |
文献综述 | 第52-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61-63页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第63页 |