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基于限制性内切酶构建的荧光生物传感器用于转录因子检测

摘要第10-12页
英文摘要第12-13页
符号与缩写第14-15页
第一章 绪论第15-45页
    1.1 转录因子第15-24页
        1.1.1 转录因子的检测意义第15页
        1.1.2 转录因子的传统检测方法第15-16页
        1.1.3 转录因子的荧光检测方法第16-24页
    1.2 酶催化的等温信号扩增方法第24-34页
        1.2.1 内切酶催化的等温信号扩增方法第24-26页
        1.2.2 外切酶催化的等温信号扩增方法第26-28页
        1.2.3 聚合酶催化的等温信号扩增方法第28-34页
    1.3 本论文的研究目的和研究内容第34-36页
        1.3.1 研究目的第34-35页
        1.3.2 研究内容第35-36页
    1.4 参考文献第36-45页
第二章 Fok Ⅰ切割-抑制策略用于转录因子的特异性及准确性检测第45-65页
    2.1 引言第45-47页
    2.2 实验部分第47-48页
        2.2.1 仪器第47页
        2.2.2 材料与试剂第47-48页
    2.3 实验步骤第48-50页
        2.3.1 双链DNA探针的制备第48页
        2.3.2 NF-κB p50-DNA结合及Fok Ⅰ酶切第48页
        2.3.3 冬凌草素的抑制作用第48-49页
        2.3.4 荧光测定第49页
        2.3.5 凝胶电泳成像第49页
        2.3.6 HeLa细胞裂解液的制备第49-50页
    2.4 结果与讨论第50-59页
        2.4.1 凝胶电泳表征第50-51页
        2.4.2 荧光光谱验证实验可行性第51-52页
        2.4.3 实验条件优化第52-54页
        2.4.4 目标物NF-κB p50的定量检测第54-56页
        2.4.5 特异性考察第56页
        2.4.6 精密度和重现性考察第56-57页
        2.4.7 目标物NF-κB p50的复杂介质检测第57-58页
        2.4.8 冬凌草素的抑制作用第58页
        2.4.9 实际样品分析第58-59页
    2.5 结论第59-61页
    2.6 参考文献第61-65页
第三章 蛋白质结合-抑制作用为基础的DNA组装及滚环扩增用于转录因子的灵敏检测第65-75页
    3.1 引言第65-66页
    3.2 实验部分第66-67页
        3.2.1 仪器第66页
        3.2.2 材料与试剂第66-67页
    3.3 实验步骤第67-68页
        3.3.1 双链探针S1-S2的制备第67页
        3.3.2 NF-κB p50-DNA结合及AlwI信号转导第67页
        3.3.3 DNA三向结诱导滚环扩增第67-68页
        3.3.4 荧光测定第68页
        3.3.5 凝胶电泳成像第68页
    3.4 结果与讨论第68-71页
        3.4.1 探针S1-S2合成及AlwI酶切电泳表征第68-69页
        3.4.2 荧光光谱验证实验可行性第69-70页
        3.4.3 滚环模板杂交方式优化第70-71页
    3.5 结论第71-72页
    3.6 参考文献第72-75页
致谢第75-76页
硕士期间发表论文第76-77页
学位论文评阅及答辩情况表第77页

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