摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-13页 |
符号与缩写 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-45页 |
1.1 转录因子 | 第15-24页 |
1.1.1 转录因子的检测意义 | 第15页 |
1.1.2 转录因子的传统检测方法 | 第15-16页 |
1.1.3 转录因子的荧光检测方法 | 第16-24页 |
1.2 酶催化的等温信号扩增方法 | 第24-34页 |
1.2.1 内切酶催化的等温信号扩增方法 | 第24-26页 |
1.2.2 外切酶催化的等温信号扩增方法 | 第26-28页 |
1.2.3 聚合酶催化的等温信号扩增方法 | 第28-34页 |
1.3 本论文的研究目的和研究内容 | 第34-36页 |
1.3.1 研究目的 | 第34-35页 |
1.3.2 研究内容 | 第35-36页 |
1.4 参考文献 | 第36-45页 |
第二章 Fok Ⅰ切割-抑制策略用于转录因子的特异性及准确性检测 | 第45-65页 |
2.1 引言 | 第45-47页 |
2.2 实验部分 | 第47-48页 |
2.2.1 仪器 | 第47页 |
2.2.2 材料与试剂 | 第47-48页 |
2.3 实验步骤 | 第48-50页 |
2.3.1 双链DNA探针的制备 | 第48页 |
2.3.2 NF-κB p50-DNA结合及Fok Ⅰ酶切 | 第48页 |
2.3.3 冬凌草素的抑制作用 | 第48-49页 |
2.3.4 荧光测定 | 第49页 |
2.3.5 凝胶电泳成像 | 第49页 |
2.3.6 HeLa细胞裂解液的制备 | 第49-50页 |
2.4 结果与讨论 | 第50-59页 |
2.4.1 凝胶电泳表征 | 第50-51页 |
2.4.2 荧光光谱验证实验可行性 | 第51-52页 |
2.4.3 实验条件优化 | 第52-54页 |
2.4.4 目标物NF-κB p50的定量检测 | 第54-56页 |
2.4.5 特异性考察 | 第56页 |
2.4.6 精密度和重现性考察 | 第56-57页 |
2.4.7 目标物NF-κB p50的复杂介质检测 | 第57-58页 |
2.4.8 冬凌草素的抑制作用 | 第58页 |
2.4.9 实际样品分析 | 第58-59页 |
2.5 结论 | 第59-61页 |
2.6 参考文献 | 第61-65页 |
第三章 蛋白质结合-抑制作用为基础的DNA组装及滚环扩增用于转录因子的灵敏检测 | 第65-75页 |
3.1 引言 | 第65-66页 |
3.2 实验部分 | 第66-67页 |
3.2.1 仪器 | 第66页 |
3.2.2 材料与试剂 | 第66-67页 |
3.3 实验步骤 | 第67-68页 |
3.3.1 双链探针S1-S2的制备 | 第67页 |
3.3.2 NF-κB p50-DNA结合及AlwI信号转导 | 第67页 |
3.3.3 DNA三向结诱导滚环扩增 | 第67-68页 |
3.3.4 荧光测定 | 第68页 |
3.3.5 凝胶电泳成像 | 第68页 |
3.4 结果与讨论 | 第68-71页 |
3.4.1 探针S1-S2合成及AlwI酶切电泳表征 | 第68-69页 |
3.4.2 荧光光谱验证实验可行性 | 第69-70页 |
3.4.3 滚环模板杂交方式优化 | 第70-71页 |
3.5 结论 | 第71-72页 |
3.6 参考文献 | 第72-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
硕士期间发表论文 | 第76-77页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |