| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 1.引言 | 第9-13页 |
| 1.1 毛色遗传的研究现状 | 第9-10页 |
| 1.2Agouti基因的研究 | 第10-12页 |
| 1.3 本课题组对山羊Agouti基因研究成果 | 第12页 |
| 1.4 本研究的目的意义及主要内容 | 第12-13页 |
| 2.材料与方法 | 第13-24页 |
| 2.1 试验材料及设备 | 第13-15页 |
| 2.1.1 试验样品及来源 | 第13页 |
| 2.1.2 常规试剂来源及配制 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要分析软件 | 第15页 |
| 2.2 试验方法和步骤 | 第15-24页 |
| 2.2.1DNA的提取及纯度和浓度的检测 | 第15-16页 |
| 2.2.2 山羊皮肤组织RNA提取、纯化、检测和反转录 | 第16-18页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第18-19页 |
| 2.2.4 PCR产物纯化与胶回收 | 第19-20页 |
| 2.2.5 目的片段的克隆及阳性克隆的鉴定 | 第20页 |
| 2.2.6 小量提取质粒与酶切鉴定 | 第20-21页 |
| 2.2.7 双酶切及重组质粒pGL3-Basic-A和pGL3-Basic-B的构建 | 第21页 |
| 2.2.8 无内毒素大提质粒和浓度测定 | 第21页 |
| 2.2.9 细胞培养及转染 | 第21-22页 |
| 2.2.10 Luc报告基因活性检测及数据处理 | 第22-24页 |
| 3.结果与分析 | 第24-54页 |
| 3.1 山羊基因组DNA的提取结果 | 第24页 |
| 3.2 山羊皮肤组织RNA的提取结果 | 第24页 |
| 3.3 Agouti基因部分序列PCR扩增及序列比对结果 | 第24-38页 |
| 3.4 Agouti基因外显子1剪接体验证PCR扩增与序列比对结果 | 第38-48页 |
| 3.5 目的片段A和B的启动子区活性验证 | 第48-54页 |
| 3.5.1 目的片段的序列比对结果 | 第48-49页 |
| 3.5.2 promoterA和promoterB的PCR扩增 | 第49-50页 |
| 3.5.3 重组质粒PMD19-T-A,和PMD19-T-B的PCR鉴定与双酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 3.5.4 重组质粒PGL3-basic-A和PGL3-basic-B的PCR鉴定与双酶切鉴定 | 第51页 |
| 3.5.5 测序鉴定 | 第51-53页 |
| 3.5.6 promoterA和promoterB启动子活性的鉴定 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| 4.1 提取基因组DNA | 第54页 |
| 4.2 RNA的提取 | 第54页 |
| 4.3 PCR扩增 | 第54-55页 |
| 4.4 细胞培养 | 第55页 |
| 4.5 关于山羊剪接体的讨论 | 第55-56页 |
| 4.6 关于山羊启动子的讨论 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
