摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 小麦转基因技术研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 小麦遗传转化方法 | 第12-15页 |
1.1.2 筛选标记基因在小麦遗传转化中的应用 | 第15-17页 |
1.2 小麦赤霉病防治研究进展 | 第17-19页 |
1.2.1 小麦赤霉病危害及国内外小麦赤霉病研究概述 | 第17页 |
1.2.2 抗赤霉病转基因小麦研究进展 | 第17-19页 |
1.3 最小表达框转化小麦的研究进展 | 第19页 |
1.4 基因枪介导的多基因共转化技术 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第21页 |
2.1.2 菌体扩大培养所用培养基 | 第21页 |
2.1.3 质粒DNA提取试剂 | 第21页 |
2.1.4 转化基因 | 第21-22页 |
2.1.5 小麦材料 | 第22页 |
2.1.6 小麦幼胚愈伤转化所用培养基 | 第22页 |
2.1.7 引物 | 第22-23页 |
2.1.8 小麦基因组DNA提取试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 幼胚接种和培养 | 第23页 |
2.2.2 质粒DNA的提取试剂的配制 | 第23页 |
2.2.3 质粒DNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.4 DNA片段回收 | 第24-25页 |
2.2.5 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击 | 第25-26页 |
2.2.6 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生 | 第26页 |
2.2.7 小麦基因组DNA提取试剂的配制 | 第26页 |
2.2.8 小麦叶片DNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.9 抗性植株的PCR鉴定 | 第27页 |
2.2.10 转基因小麦叶片对禾谷镰刀菌的抑制作用 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-45页 |
3.1 最小表达框的制备 | 第29-30页 |
3.2. 小麦幼胚愈伤转化和抗性植株的获得 | 第30-31页 |
3.3 不同筛选体系对小麦幼胚转化的影响 | 第31-32页 |
3.4 襄麦76转RNAi-chs3、BLF-A6 基因的鉴定 | 第32-36页 |
3.4.1 转基因植株T0代PCR鉴定 | 第32-33页 |
3.4.2 转基因植株T1代PCR鉴定 | 第33-34页 |
3.4.3 转基因植株T2代PCR鉴定 | 第34-36页 |
3.5 襄麦76转RNAi-pkc-chs3、BLF-A6 基因鉴定 | 第36-38页 |
3.5.1 转基因植株T0代PCR鉴定 | 第36-37页 |
3.5.2 转基因植株T1代PCR鉴定 | 第37页 |
3.5.3 转基因植株T2代PCR鉴定 | 第37-38页 |
3.6 襄麦76转BLF-A6、plsAs6-chs3bAs1、pkcAs3-chs3bAs1 基因鉴定 | 第38-43页 |
3.6.1 转基因植株T0代PCR鉴定 | 第38-39页 |
3.6.2 转基因植株T1代PCR鉴定 | 第39-40页 |
3.6.3 转基因植株T2代PCR鉴定 | 第40-41页 |
3.6.4 转基因植株叶片对赤霉病致病菌抗性鉴定 | 第41-43页 |
3.7 襄麦76转plsAs6-chs3bAs1、chs3b-A5-i-S5-chs3b-A1-i-S1、chs3b-A2-i-S2-chs3b-A3-i-S3 基因鉴定 | 第43-45页 |
3.7.1 转基因植株T0代PCR鉴定 | 第43页 |
3.7.2 转基因植株T1代PCR鉴定 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
4.1 筛选体系对于转化结果的影响分析 | 第45-46页 |
4.2 基因枪介导的遗传转化中目的基因启动子分析 | 第46页 |
4.3 转RNAi片段对小麦赤霉病防控的优势分析 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
致谢 | 第55页 |