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基因枪介导的抗体—乳铁蛋白融合基因和RNAi片段转化小麦的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-21页
    1.1 小麦转基因技术研究进展第11-17页
        1.1.1 小麦遗传转化方法第12-15页
        1.1.2 筛选标记基因在小麦遗传转化中的应用第15-17页
    1.2 小麦赤霉病防治研究进展第17-19页
        1.2.1 小麦赤霉病危害及国内外小麦赤霉病研究概述第17页
        1.2.2 抗赤霉病转基因小麦研究进展第17-19页
    1.3 最小表达框转化小麦的研究进展第19页
    1.4 基因枪介导的多基因共转化技术第19-20页
    1.5 本研究的目的及意义第20-21页
2 材料与方法第21-29页
    2.1 实验材料第21-23页
        2.1.1 菌株及质粒第21页
        2.1.2 菌体扩大培养所用培养基第21页
        2.1.3 质粒DNA提取试剂第21页
        2.1.4 转化基因第21-22页
        2.1.5 小麦材料第22页
        2.1.6 小麦幼胚愈伤转化所用培养基第22页
        2.1.7 引物第22-23页
        2.1.8 小麦基因组DNA提取试剂第23页
    2.2 实验方法第23-29页
        2.2.1 幼胚接种和培养第23页
        2.2.2 质粒DNA的提取试剂的配制第23页
        2.2.3 质粒DNA的提取第23-24页
        2.2.4 DNA片段回收第24-25页
        2.2.5 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击第25-26页
        2.2.6 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生第26页
        2.2.7 小麦基因组DNA提取试剂的配制第26页
        2.2.8 小麦叶片DNA的提取第26-27页
        2.2.9 抗性植株的PCR鉴定第27页
        2.2.10 转基因小麦叶片对禾谷镰刀菌的抑制作用第27-29页
3 结果与分析第29-45页
    3.1 最小表达框的制备第29-30页
    3.2. 小麦幼胚愈伤转化和抗性植株的获得第30-31页
    3.3 不同筛选体系对小麦幼胚转化的影响第31-32页
    3.4 襄麦76转RNAi-chs3、BLF-A6 基因的鉴定第32-36页
        3.4.1 转基因植株T0代PCR鉴定第32-33页
        3.4.2 转基因植株T1代PCR鉴定第33-34页
        3.4.3 转基因植株T2代PCR鉴定第34-36页
    3.5 襄麦76转RNAi-pkc-chs3、BLF-A6 基因鉴定第36-38页
        3.5.1 转基因植株T0代PCR鉴定第36-37页
        3.5.2 转基因植株T1代PCR鉴定第37页
        3.5.3 转基因植株T2代PCR鉴定第37-38页
    3.6 襄麦76转BLF-A6、plsAs6-chs3bAs1、pkcAs3-chs3bAs1 基因鉴定第38-43页
        3.6.1 转基因植株T0代PCR鉴定第38-39页
        3.6.2 转基因植株T1代PCR鉴定第39-40页
        3.6.3 转基因植株T2代PCR鉴定第40-41页
        3.6.4 转基因植株叶片对赤霉病致病菌抗性鉴定第41-43页
    3.7 襄麦76转plsAs6-chs3bAs1、chs3b-A5-i-S5-chs3b-A1-i-S1、chs3b-A2-i-S2-chs3b-A3-i-S3 基因鉴定第43-45页
        3.7.1 转基因植株T0代PCR鉴定第43页
        3.7.2 转基因植株T1代PCR鉴定第43-45页
4 讨论第45-48页
    4.1 筛选体系对于转化结果的影响分析第45-46页
    4.2 基因枪介导的遗传转化中目的基因启动子分析第46页
    4.3 转RNAi片段对小麦赤霉病防控的优势分析第46-48页
参考文献第48-55页
致谢第55页

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