| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-25页 |
| 1.1 马铃薯低温糖化概述 | 第11页 |
| 1.2 转化酶的分类及其研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 酸性转化酶的调控方式 | 第13-18页 |
| 1.3.1 酸性转化酶转录水平的调控 | 第13-14页 |
| 1.3.2 酸性转化酶的转录后水平调控 | 第14页 |
| 1.3.3 酸性转化酶翻译后水平的调控 | 第14-18页 |
| 1.4 SnRK1 对转化酶的调控 | 第18-24页 |
| 1.4.1 SnRK1 复合体的结构 | 第18-20页 |
| 1.4.2 SnRK1 的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.5 课题的提出及意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 研究材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.3 引物 | 第26-27页 |
| 2.2 研究方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 马铃薯DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 RNA的抽提（生工试剂盒抽提SK8662） | 第28-29页 |
| 2.2.3 cDNA的制备 | 第29页 |
| 2.2.4 PCR反应体系及程序 | 第29-31页 |
| 2.2.5 胶回收、质粒抽提、质粒酶切和载体构建 | 第31页 |
| 2.2.6 载体构建 | 第31-32页 |
| 2.2.7 基因定点突变（Mut ExpressTM II Fast Mutagenesis Kit C212） | 第32-33页 |
| 2.2.8 烟草瞬时表达和荧光成像 | 第33-34页 |
| 2.2.9 农杆菌的电击转化 | 第34页 |
| 2.2.10 马铃薯遗传转化 | 第34-35页 |
| 2.2.11 转基因植株的筛选 | 第35页 |
| 2.2.12 突变基因的蛋白表达和纯化 | 第35-36页 |
| 2.2.13 磷酸化蛋白的western检测 | 第36页 |
| 2.2.14 突变蛋白的活性检测 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-59页 |
| 3.1 SbSnRK1α、SbSnRK1β、StvacINV1、StInvInh2B的亚细胞定位 | 第37-43页 |
| 3.1.1 基因与RFP融合表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 3.1.2 液泡膜标记AtγTIP融合GFP表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.1.3 SbSnRK1α、SbSnRK1β、StvacINV1、StInvInh2B的烟草表皮的亚细胞定位结果 | 第41-43页 |
| 3.2 马铃薯SbSnRK1 磷酸化位点研究 | 第43-49页 |
| 3.2.1 马铃薯SbSnRK1α 可能的磷酸化位点的突变 | 第43-45页 |
| 3.2.2 突变蛋白的表达和纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.3 突变蛋白的活性检测和磷酸化位点的确定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 根据磷酸化位点选取合适的抗体并对转基因株系磷酸化水平进行检测 | 第48-49页 |
| 3.3 马铃薯SbSnRK1β 功能分析 | 第49-59页 |
| 3.3.1 马铃薯中SnRK1β 亚基的生物信息学分析 | 第49-51页 |
| 3.3.2 SbSnRK1β 基因干涉和超量表达载体的构建 | 第51-53页 |
| 3.3.3 马铃薯遗传转化及SbSnRK1β 转基因株系的获得 | 第53-54页 |
| 3.3.4 SbSnRK1β 转基因株系的分子筛选 | 第54-56页 |
| 3.3.5 SbSnRK1β 转基因株系的田间种植表型 | 第56-57页 |
| 3.3.6 SbSnRK1β 转基因干涉株系生理指标测定 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 SbSnRK1-StInvInh2B-StvacINV1 定位研究 | 第59-60页 |
| 4.2 SbSnRK1α 的磷酸化对转化酶的调控 | 第60-61页 |
| 4.3 干涉SbSnRK1β 对马铃薯转化酶活性的影响 | 第61页 |
| 4.4 研究展望 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-66页 |
| 附录1 AtγTIP基因序列比对 | 第63-64页 |
| 附录2 StGAL83L和StGAL83S的cDNA序列比对 | 第64-65页 |
| 附录3 图12 的氨基酸序列比对 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
