| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 非可培养状态（VBNC）状态研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 VBNC状态的形成因素和形态特征 | 第13页 |
| 1.1.2 VBNC状态细菌的复苏 | 第13-14页 |
| 1.2 复苏促进因子（Rpf）的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 Rpf的发现 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Rpf蛋白家族的生物学特性鉴定 | 第15-17页 |
| 1.2.3 Rpf蛋白家族的作用机制 | 第17页 |
| 1.3 革兰氏阴性菌的细胞复苏促进因子的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 沙门氏菌的细胞复苏促进因子 | 第17页 |
| 1.3.2 副溶血弧菌的细胞复苏促进因子 | 第17-18页 |
| 1.3.3 哈维氏弧菌中的Yeaz蛋白 | 第18页 |
| 1.4 石油降解菌红球菌（Rhodococcus spp.）特性 | 第18-19页 |
| 1.5 本文研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第2章 红平红球菌KB1的4种细胞复苏促进因子基因克隆及生物信息学分析 | 第20-37页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料 | 第20-21页 |
| 2.2.1 菌种及培养基 | 第20页 |
| 2.2.2 试剂 | 第20-21页 |
| 2.3 方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 DNA的提取及rpf-1、rpf-2、rpf-3、rpf-4的扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.2 rpf-1、rpf-2、rpf-3 和rpf-4的连接、转化及测序 | 第22页 |
| 2.3.3 生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.4 结果 | 第23-35页 |
| 2.4.1 Rhodococcus erythropolis PR4 rpf-1、rpf-2、rpf-3 和rpf-4基因序列的克隆与分析 | 第23-25页 |
| 2.4.2 rpf-1、rpf-2、rpf-3 和rpf-4编码氨基酸序列的分析 | 第25-27页 |
| 2.4.3 Rpf-1、Rpf-2、Rpf-3和Rpf-4蛋白信号肽及磷酸化位点分析 | 第27-29页 |
| 2.4.4 Rpf-1、Rpf-2、Rpf-3和Rpf-4蛋白二级结构 | 第29-30页 |
| 2.4.5 Rpf-1、Rpf-2、Rpf-3和Rpf-4结构域分析 | 第30-32页 |
| 2.4.6 物种间同源性分析 | 第32页 |
| 2.4.7 Rhodococcus erythropolis菌株Rpf蛋白系统发育分析 | 第32-33页 |
| 2.4.8 Rpf蛋白三级结构预测 | 第33-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-36页 |
| 2.6 结论 | 第36-37页 |
| 第3章 红平红球菌复苏促进因子Rpf-1蛋白在大肠杆菌中表达及性质 | 第37-48页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料和仪器 | 第37-39页 |
| 3.2.1 实验菌株与质粒 | 第37-38页 |
| 3.2.2 培养基 | 第38-39页 |
| 3.2.3 主要试剂和仪器 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 3.3.1 红平红球菌rpf-1基因的克隆 | 第39-42页 |
| 3.3.2 rpf-1基因表达质粒的构建、在大肠杆菌中表达 | 第42-45页 |
| 3.3.3 Rpf-1酶活性的检测 | 第45页 |
| 3.4 结果 | 第45-47页 |
| 3.4.1 p UCm-T-rpf-1质粒的构建 | 第45页 |
| 3.4.2 表达质粒的构建 | 第45-46页 |
| 3.4.3 纯化酶Rpf-1溶菌酶酶活力的测定 | 第46页 |
| 3.4.4 纯化酶Rpf-1偶氮络蛋白酶活力的测定 | 第46-47页 |
| 3.5 讨论 | 第47页 |
| 3.6 结论 | 第47-48页 |
| 第4章 红平红球菌复苏促进因子Rpf-1蛋白对红平红球菌的生长促进作用 | 第48-54页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料和仪器 | 第48页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第48页 |
| 4.2.2 实验试剂及仪器 | 第48页 |
| 4.3 重组蛋白Rpf-1对菌体的复苏促进作用 | 第48-49页 |
| 4.3.1 重组蛋白Rpf-1对红平红球菌的生长促进作用 | 第48-49页 |
| 4.3.2 重组蛋白Rpf-1对VBNC状态红平红球菌的复苏促进作用 | 第49页 |
| 4.3.3 重组蛋白Rpf-1对低温保存的红平红球菌复苏促进作用 | 第49页 |
| 4.3.4 重组蛋白Rpf-1对阴性菌VBNC状态哈维式弧菌的复苏促进作用 | 第49页 |
| 4.4 结果 | 第49-51页 |
| 4.4.1 重组蛋白Rpf-1对红平红球菌的生长促进作用 | 第49-50页 |
| 4.4.2 重组蛋白Rpf-1对VBNC状态红平红球菌的复苏促进作用 | 第50-51页 |
| 4.4.3 重组蛋白Rpf-1对低温保存的红平红球菌的复苏促进作用 | 第51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-53页 |
| 4.6 结论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第65页 |
