英文缩略词表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-15页 |
2 实验材料 | 第15-20页 |
2.1 主要试剂与材料 | 第15-17页 |
2.2 主要仪器 | 第17-18页 |
2.3 常用溶液的配制 | 第18-20页 |
3 实验方法 | 第20-34页 |
3.1 抗TLR4抗体Fab片段DNA的扩增 | 第20-25页 |
3.2 重组表达载体p ETDuet1Anti-TLR4 -Fab的构建 | 第25-29页 |
3.3 人源抗TLR4抗体Fab片段的制备与初步鉴定 | 第29-31页 |
3.4 人源抗TLR4抗体Fab片段的纯化 | 第31页 |
3.5 人源抗TLR4抗体Fab片段生物学活性的鉴定及抗体亲和力的检测 | 第31-34页 |
4.实验结果 | 第34-44页 |
4.1 成功扩增人源抗TLR4抗体Fab DNA片段 | 第34-36页 |
4.2 成功构建重组表达载体pETDuet1Fab重组质粒 | 第36-37页 |
4.3 制备可溶性人源抗TLR4抗体Fab片段并经Western blot鉴定 | 第37-38页 |
4.4 人源抗TLR4抗体Fab片段生物学活性的鉴定及抗体亲和力的检测结果 | 第38-44页 |
4.4.1 非变性凝胶电泳鉴定结果显示人源抗TLR4抗体Fab片段的重链和轻链能够特异性的折叠结合 | 第38-39页 |
4.4.2 ELISA法检测纯化后的抗体结果表明Fab抗体可与hTLR4特异性结合且具有浓度依赖性 | 第39-40页 |
4.4.3 流式细胞仪检测Fab片段抗体活性结果显示抗体Fab片段能够与TLR4抗原特异性地结合 | 第40-41页 |
4.4.4 Biacore X100仪检测抗体Fab片段亲和力 | 第41-42页 |
4.4.5 体外中和试验显示抗体Fab片段可阻断LPS诱导的TNF-α炎症因子的产生 | 第42-44页 |
5.讨论 | 第44-48页 |
6.结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录 1:文献综述 | 第53-61页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 2 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |