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人源抗hTLR4基因工程抗体Fab片段的制备及生物特性鉴定

英文缩略词表第7-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-15页
2 实验材料第15-20页
    2.1 主要试剂与材料第15-17页
    2.2 主要仪器第17-18页
    2.3 常用溶液的配制第18-20页
3 实验方法第20-34页
    3.1 抗TLR4抗体Fab片段DNA的扩增第20-25页
    3.2 重组表达载体p ETDuet1Anti-TLR4 -Fab的构建第25-29页
    3.3 人源抗TLR4抗体Fab片段的制备与初步鉴定第29-31页
    3.4 人源抗TLR4抗体Fab片段的纯化第31页
    3.5 人源抗TLR4抗体Fab片段生物学活性的鉴定及抗体亲和力的检测第31-34页
4.实验结果第34-44页
    4.1 成功扩增人源抗TLR4抗体Fab DNA片段第34-36页
    4.2 成功构建重组表达载体pETDuet1Fab重组质粒第36-37页
    4.3 制备可溶性人源抗TLR4抗体Fab片段并经Western blot鉴定第37-38页
    4.4 人源抗TLR4抗体Fab片段生物学活性的鉴定及抗体亲和力的检测结果第38-44页
        4.4.1 非变性凝胶电泳鉴定结果显示人源抗TLR4抗体Fab片段的重链和轻链能够特异性的折叠结合第38-39页
        4.4.2 ELISA法检测纯化后的抗体结果表明Fab抗体可与hTLR4特异性结合且具有浓度依赖性第39-40页
        4.4.3 流式细胞仪检测Fab片段抗体活性结果显示抗体Fab片段能够与TLR4抗原特异性地结合第40-41页
        4.4.4 Biacore X100仪检测抗体Fab片段亲和力第41-42页
        4.4.5 体外中和试验显示抗体Fab片段可阻断LPS诱导的TNF-α炎症因子的产生第42-44页
5.讨论第44-48页
6.结论第48-49页
参考文献第49-53页
附录 1:文献综述第53-61页
    参考文献第57-61页
附录 2第61-62页
致谢第62页

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