| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1.1 下丘脑-垂体-性腺轴（HPG）的简介 | 第14-15页 |
| 1.2 LH和FSH的生理结构及功能 | 第15-16页 |
| 1.3 LH和FSH的生物合成及作用机理 | 第16-18页 |
| 1.4 LH和FSH在硬骨鱼类中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 硬骨鱼类中AMH，StAR，17β-HSD及E2，11-kT的研究 | 第19-21页 |
| 1.6 研究内容 | 第21页 |
| 1.7 技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 金钱鱼促性腺激素基因全长的cDNA克隆 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 实验用鱼 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.2.1 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.2.2 相关试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第25-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 组织取材 | 第27页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3 模板cDNA的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第29-30页 |
| 2.2.5 金钱鱼GtH全长的RACE克隆 | 第30-36页 |
| 2.2.5.1 模板cDNA的 3’RACE | 第30-31页 |
| 2.2.5.2 模板cDNA的 5’RACE | 第31-32页 |
| 2.2.5.3 金钱鱼GtH中间片段的克隆扩增 | 第32-34页 |
| 2.2.5.4 目的基因的连接，转化 | 第34-35页 |
| 2.2.5.5 阳性克隆菌的筛选 | 第35-36页 |
| 2.2.6 金钱鱼GtH的全长序列分析 | 第36-37页 |
| 2.3 结果 | 第37-41页 |
| 第三章 金钱鱼促性腺激素重组蛋白的原核表达及纯化 | 第41-53页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-51页 |
| 3.2.1 重组质粒r-SaGtH的构建 | 第42-48页 |
| 3.2.1.1 目的基因GtH的扩增 | 第42-43页 |
| 3.2.1.2 克隆载体pEasy-T1-GtH的构建 | 第43-45页 |
| 3.2.1.3 载体质粒pEasy-T1-GtH的提取 | 第45-48页 |
| 3.2.2 重组蛋白r-SaGtH的诱导表达及纯化 | 第48-51页 |
| 3.2.2.1 重组蛋白r-SaGtH的粗提 | 第48-49页 |
| 3.2.2.2 重组融合蛋白r-SaGtH的纯化 | 第49-50页 |
| 3.2.2.3 重组蛋白r-SaGtH的Western Blot检测 | 第50-51页 |
| 3.3 结果 | 第51-53页 |
| 第四章 金钱鱼促性腺激素重组蛋白功能的初步验证 | 第53-69页 |
| 4.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.1 实验用鱼 | 第54页 |
| 4.1.2 主要试剂、仪器 | 第54页 |
| 4.2 实验方法 | 第54-61页 |
| 4.2.1 重组蛋白r-SaGtH的注射和投喂实验 | 第54-56页 |
| 4.2.1.1 重组蛋白r-SaGtH的注射实验 | 第54-55页 |
| 4.2.1.2 重组蛋白r-SaGtH的投喂实验 | 第55-56页 |
| 4.2.2 青鱂性腺的组织学切片观察 | 第56-57页 |
| 4.2.2.1 青鱂性腺的石蜡切片 | 第56-57页 |
| 4.2.2.2 青鱂性腺的H&E染色 | 第57页 |
| 4.2.3 金钱鱼性腺的扫描电子显微镜观察 | 第57-59页 |
| 4.2.3.1 扫描电子显微镜观察中主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| 4.2.3.1.1 固定液Karnovsky溶液的配制方法 | 第58页 |
| 4.2.3.1.2 磷酸盐缓冲液PB溶液的配制方法 | 第58页 |
| 4.2.3.2 扫描电子显微镜观察上机样品的制备 | 第58-59页 |
| 4.2.4 金钱鱼性腺成熟部分相关基因的表达分析 | 第59-60页 |
| 4.2.5 金钱鱼性腺成熟部分相关激素的测定 | 第60-61页 |
| 4.3 结果 | 第61-69页 |
| 4.3.1 青鱂性腺的组织学切片观察 | 第61-63页 |
| 4.3.2 金钱鱼性腺的扫描电子显微镜观察 | 第63-65页 |
| 4.3.3 金钱鱼性腺成熟相关基因的表达分析 | 第65-67页 |
| 4.3.3.1 金钱鱼促性腺激素受体（SaGtHR）的表达分析 | 第65-66页 |
| 4.3.3.2 金钱鱼生殖轴部分下游基因（Amh，Star，17β-hsd）的表达分析 | 第66-67页 |
| 4.3.4 金钱鱼性腺成熟部分相关激素的测定 | 第67-69页 |
| 第五章 小结和讨论 | 第69-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录 | 第84-85页 |
| 硕士期间科研成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
